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70年代中期,Gospodarowicz從腦垂體中純化出一種細(xì)胞生長因子,因其能促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖,故命名為成纖維細(xì)胞生長因子(fibrobastgrowthfactor,F(xiàn)GF)。進(jìn)一步研究表明,F(xiàn)GF按等電點(diǎn)的不同,可分為堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basicfibrobastgrowthfactor,bFGF)和酸性成纖維細(xì)胞生長因子(acidfibrobastgrowthfactor,aFGF)。bFGF的等電點(diǎn)為9.6,aFGF的等電點(diǎn)為5.6均為不含糖的肽類,有約56%相同氨基酸排列順序
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重組人干擾素是一種醫(yī)藥品,適用于治療惡性腫瘤、亞急性重癥肝炎、肝纖維化(早期肝硬化)、骨髓增生異常綜合癥、感染與損傷性疾病、系統(tǒng)性硬皮病、病毒性疾病、異位性皮炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等癥狀。干擾素與細(xì)胞表面受體結(jié)合誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生多種抗病毒蛋白,抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)繁殖,提高免疫功能包括增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能,增強(qiáng)淋巴細(xì)胞對靶細(xì)胞的細(xì)胞毒性和天然殺傷性細(xì)胞的功能。重組人干擾素主要成份為α2b,輔料為鹽酸精氨酸、聚山梨酯80、醋酸鈉專(三水)、冰屬醋酸。其主要成份α2b系由含有表達(dá)人干擾素α2b基因的大腸桿菌,經(jīng)
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重組蛋白真核表達(dá)包括酵母表達(dá)系統(tǒng)、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、腺病毒表達(dá)系統(tǒng)等。一般可以正確折疊,包含各種修改。但是價(jià)格高,周期長。重組蛋白真核表達(dá)與原核表達(dá)如何選擇真核表達(dá):常用酵母、昆蟲、動(dòng)物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞。其優(yōu)點(diǎn)是根據(jù)原核生物蛋白與靶DNA的高度特異性相互作用而設(shè)計(jì),不存在基因的非特異性激活或抑制。它可以誘導(dǎo)高達(dá)105倍的高效基因表達(dá)??梢試?yán)格控制基因表達(dá)。原核表達(dá):它的優(yōu)點(diǎn)是可以在短時(shí)間內(nèi)獲得基因表達(dá)產(chǎn)物,而且成本相對較低。方法也簡單,可以表達(dá)的蛋白質(zhì)也很多。但缺點(diǎn)是表達(dá)的蛋白質(zhì)沒有經(jīng)過
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重組人干擾素是一種臨床應(yīng)用于治療疾病的藥物,該藥適可以治療惡性腫瘤、亞急性重癥肝炎、肝纖維化(早期肝硬化)、感染與損傷性疾病、骨髓增生異常綜合癥、病毒性疾病、系統(tǒng)性硬皮病、異位性皮炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等癥狀。重組人干擾素有a2b和a1b,a2a三種亞型,區(qū)別是比較大的,應(yīng)該引起注意.它們都是蛋白質(zhì),三級結(jié)構(gòu)相同,一級結(jié)構(gòu)有差別,這導(dǎo)致了它們有系列的差別:1、比活性:干擾素a2b和a2a的比活性(每毫克蛋白質(zhì)中所包含的干擾素的分子數(shù))是10的8次方,a1b亞型是10的7次方,這直接導(dǎo)致了前兩者與和a1
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哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)之瞬時(shí)轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)是生物哺乳動(dòng)物系統(tǒng)表達(dá)蛋白的方式之一。它能夠在短期內(nèi)得到一定量的重組蛋白/重組抗體。哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)廣泛地應(yīng)用于基因產(chǎn)物的快速表達(dá)及蛋白質(zhì)的小規(guī)模制備等方面。將DNA導(dǎo)入真核細(xì)胞的方式有兩種:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是用于建立克隆的細(xì)胞系,這種細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染的目的基因整合到染色體DNA中并指導(dǎo)適量目的蛋白的合成。在此我們主要介紹瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中,重組DNA導(dǎo)入感染性強(qiáng)的細(xì)胞系以獲得目的基因暫時(shí)高水平的表達(dá)。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合進(jìn)宿主染色體,當(dāng)有大量樣品需要在短時(shí)間內(nèi)分析時(shí) -
真核表達(dá)系統(tǒng)的出現(xiàn)客服了傳統(tǒng)原核表達(dá)系統(tǒng)諸多缺陷
原核表達(dá)系統(tǒng)是一個(gè)成熟的系統(tǒng),常用于研究基因功能。由于原核表達(dá)系統(tǒng)存在包涵體蛋白純化困難、蛋白修飾不*等缺陷,人們開始利用真核表達(dá)系統(tǒng)來研究基因。在各種表達(dá)系統(tǒng)中,首先采用原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行研究,這也是目前成熟的表達(dá)系統(tǒng)。該技術(shù)的主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體(通常為質(zhì)粒)轉(zhuǎn)化到細(xì)菌(通常為大腸桿菌)中,通過IPTG誘導(dǎo)和終純化獲得所需的目的蛋白。其優(yōu)點(diǎn)是可以在短時(shí)間內(nèi)獲得基因表達(dá)產(chǎn)物,所需成本相對較低。但與此同時(shí),原核表達(dá)系統(tǒng)仍有許多不可克服的缺點(diǎn):如常用的表達(dá)系統(tǒng)不能調(diào)節(jié)表達(dá)時(shí) -
重組人表皮細(xì)胞生長因子(recombinant human EGF)
1960年Cohen*從小鼠領(lǐng)下腺中發(fā)現(xiàn)了表皮生長因子(Epidermalgrowthfactor,EGF)。1975年,Gregory*從人尿中分離得到人表皮細(xì)胞生長因子(humanepidermalgrowthfactor,hEGF),因?yàn)榫哂幸种莆杆岱置谧饔玫奈镔|(zhì),所以當(dāng)時(shí)被稱為胃抑素,后來研究發(fā)現(xiàn)胃抑素跟人表皮細(xì)胞生長因子是同一種物質(zhì)。天然hEGF是由53個(gè)氨基酸組成的相對分子質(zhì)量為6045的小分子多肽。生物學(xué)功能:人表皮細(xì)胞生長因子(hEGF)不僅對上皮細(xì)胞而且對許多類型細(xì)胞均有促增殖 -
藥物是不能亂吃的,需要在醫(yī)生的指導(dǎo)下服用,若是需要使用重組人干擾素α2b治療疾病,那患者朋友就必須要來了解清楚重組人IFN-α2b的用法用量,然后根據(jù)自己的實(shí)際情況科學(xué)用藥。那重組人干擾素α2b的用法用量是什么。重組人干擾素α2b的用法用量是噴涂患處,每次1~2噴(如創(chuàng)口面積較大,也可噴涂多次以能覆蓋整個(gè)創(chuàng)面為宜),每日三次??诖桨捳罴吧称靼捳钸B續(xù)用藥一周,尖銳濕疣連續(xù)用藥六周。同時(shí),使用重組人干擾素α2b的禁忌是對本品及其中任何成份過敏者禁用?;颊吲笥咽褂弥亟M人干擾素α2b如與其他藥物同時(shí)使