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重組人白細胞介素2所屬藥物之一，本品是一種淋巴因子，可使細胞毒性T細胞、自然殺傷細胞和淋巴因子活化的殺傷細胞增殖，并使其殺傷活性增強，還可以促進淋巴細胞分泌抗體和干擾素，具有促進機體免疫反應等作用。重組人白細胞介素2功能主治：1.用于腎細胞癌、黑色素瘤、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、直腸癌、淋巴癌、肺癌等惡性腫瘤的治療，用于癌性胸腹水的控制，也可以用于淋巴因子激活的殺傷細胞的培養(yǎng)。2.用于手術(shù)、放療及化療后的腫瘤患者的治療，可增強機體免疫功能。3.用于先天或后天免疫缺陷癥的治療，提高病人細胞免疫功能和抗
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干擾素是一種很強大的藥劑，它被使用在醫(yī)學中的很多方面，特別是重組人干擾素，對于人體的很多疾病都有著很重大的作用。重組人干擾素α2b具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用，也是衛(wèi)健委推薦的藥物之一。與機體內(nèi)的細胞受體結(jié)合后，一方面誘導組織細胞分泌抗病毒蛋白，激活體內(nèi)的一些酶，促使病毒mRNA降解，進而導致病毒蛋白合成受阻，抑制病毒復制；另一方面，通過促進CTL細胞增值、激活NK細胞殺傷功能、增強巨噬細胞吞噬能力，增強免疫清除能力，發(fā)揮清除病毒的作用。重組人干擾素α2b是一類具有廣譜抗病毒、抗增殖和免疫調(diào)
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重組蛋白真核表達系統(tǒng)與原核表達系統(tǒng)的區(qū)別
重組蛋白真核表達采用原核表達系統(tǒng)進行研究，主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉(zhuǎn)化到細菌中，通過IPTG誘導和終純化獲得所需的目的蛋白。其優(yōu)點是可以在短時間內(nèi)獲得基因表達產(chǎn)物，所需成本相對較低。目前的表達系統(tǒng)各有利弊，但一般理想的表達系統(tǒng)滿足以下幾點：一是特異性，不受其他內(nèi)源性因素影響，只能通過外源性無毒物激活。二是不干擾，不干擾細胞通路。以及誘導劑的誘導性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。因此，在選擇表達系統(tǒng)時，必須充分考慮各種因素，如蛋白質(zhì)性質(zhì)、實驗條件、生產(chǎn)成本、表達水平和安全性 -
重組人BMP4蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式，原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態(tài)，真核細胞表達的重組蛋白為溶液態(tài)保存，這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定，在-80℃條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進行溶解，其中溶解的方法非常關(guān)鍵，因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細注意。重組人BMP4的分泌表達優(yōu)點:1、一些可被細胞內(nèi)蛋白酶所降解的蛋白質(zhì)分泌到周質(zhì)或培養(yǎng)基中可增加其穩(wěn)定性；2、有些在細胞內(nèi)表達時無活性的蛋白分泌表達時能夠按適當?shù)姆绞竭M行準確折疊，增加到蛋白
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真核表達細胞表達產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學功能方面更接近于天然的高等生物蛋白質(zhì)分子。原核基因表達調(diào)控與真核存在很多共同之處。但因原核生物沒有細胞核，亞細胞結(jié)構(gòu)及其基因組結(jié)構(gòu)要比真核簡單得多。1.原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特點⑴σ因子識別特異啟動序列，不同的σ因子決定特異基因的轉(zhuǎn)錄激活，決定mRNA,rRNA和tRNA基因的轉(zhuǎn)錄。⑵除個別基因外，原核生物絕大多數(shù)基因按功能相關(guān)性成簇的串聯(lián)、密集于染色體上，共同組成一個轉(zhuǎn)錄單位——操縱子。一個操縱子只含一個啟動序列及數(shù)個可轉(zhuǎn)錄的編碼基因。2.真核細胞結(jié)構(gòu)
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哺乳動物細胞自身具備蛋白折疊和翻譯后修飾的功能，其表達的重組蛋白在分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和生物學功能方面接近于天然的高等生物蛋白質(zhì)分子，更有可能獲得與天然分子相同的生物活性。哺乳動物瞬時表達重組蛋白服務系統(tǒng)能表達天然結(jié)構(gòu)完整的重組蛋白，是廣泛應用的人類復雜糖基化蛋白的表達系統(tǒng)，生物活性接近于天然蛋白質(zhì)，是活性蛋白因子及各類受體蛋白的表達系統(tǒng)，在生物制藥領域應用較廣,60%以上的的藥用蛋白產(chǎn)品由哺乳動物細胞表達系統(tǒng)獲得。哺乳動物細胞瞬時轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達高活性蛋白，滿足蛋白制備的需求。哺乳動物瞬時
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哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)是哺乳動物細胞經(jīng)過翻譯和再加工后產(chǎn)生的外源蛋白，在活性上遠優(yōu)于原核表達系統(tǒng)和酵母、昆蟲細胞等真核表達系統(tǒng)，更接近天然蛋白。哺乳動物細胞表達系統(tǒng)可以提供較接近自然狀態(tài)的重組人蛋白的翻譯后修飾。在蛋白質(zhì)表達過程中，會形成接近天然蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)折疊和聚合，具有活性蛋白質(zhì)所必需的空間結(jié)構(gòu)和修飾。哺乳動物細胞經(jīng)過翻譯和再加工后產(chǎn)生的外源蛋白比原核表達系統(tǒng)和真核表達系統(tǒng)如酵母和昆蟲細胞要好得多，更接近天然蛋白。這一特性使得哺乳動物細胞表達系統(tǒng)廣泛應用于重組蛋白藥物，特別是治療性重組單
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化學感受態(tài)細胞該菌株衍生自大腸桿菌菌株B，具有l(wèi)on和ompT蛋白酶缺陷的優(yōu)點，是目前應用廣泛的表達宿主菌之一，其操作方法如下：1、化學感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，6分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手滑動EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。2、42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置5分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。3、向離心管中加入0.9mL室溫S.O.C.(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)或LB培養(yǎng)基。4、30℃，250rpm復蘇60分鐘。當
