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藥物是不能亂吃的,需要在醫(yī)生的指導下服用!重組人干擾素α2b又叫長生扶康,是一種微黃色或白色疏松體,溶解后為澄明液體,無肉眼可見的不溶物。重組人干擾素α2b通過肌肉或皮下注射,血液濃度達峰時間為3.5~8小時,消除半衰期為4~12小時。腎臟分解代謝為干擾素主要消除途徑,而膽汁分泌與肝臟代謝的消除是重要途徑。肌內(nèi)注射或皮下注射的吸收超過80%。重組人干擾素α2b用法用量1.慢性乙型肝炎:皮下或肌內(nèi)注射,3~6×106IU/日,連用四周后改為3次/周,連用16周以上。2.慢性粒細胞白血?。?~5×1
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哺乳動物細胞真核表達產(chǎn)物接近于天然高等生物蛋白質(zhì)分子
哺乳動物細胞真核表達系統(tǒng)在表達過程中有翻譯后修飾和折疊的功能,這一特點使其蛋白更接近天然蛋白,具備天然蛋白必須的空間結構和修飾,與天然蛋白有相同的生物活性,哺乳動物細胞表達系統(tǒng)在功能蛋白、抗體生產(chǎn)、臨床疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)中應用較為廣泛。原核表達系統(tǒng)具有表達水平高、操作簡單、周期短、易于大規(guī)模高密度培養(yǎng)、成本低等優(yōu)點,而對于全抗體和糖蛋白類生物藥物來說,表達產(chǎn)物多肽鏈的折疊、二硫鍵的形成、糖基化的有無以及糖基化的類型常常影響表達產(chǎn)物的合成分泌、生物活性、體內(nèi)穩(wěn)定性以及免疫原性等特性。由于原核細胞缺少 -
重組蛋白作為生物制藥在醫(yī)學中作用顯著,一般用轉(zhuǎn)基因動物的乳腺產(chǎn)生。重組蛋白真核表達包括酵母表達系統(tǒng)、桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統(tǒng)、腺病毒表達系統(tǒng)等。一般可以正確折疊,包含各種修改。但是價格高,周期長。重組蛋白真核表達系統(tǒng)技術平臺的特色快速、highly-stringent篩選:只篩選到高表達穩(wěn)定株;4~5個月獲得穩(wěn)定高表達細胞株(常規(guī)方法要9~12個月)高效表達:*啟動子和*分泌信號肽,很容易達到30p/c/d/以上(傳統(tǒng)方法需要用藥物篩選9~11輪以上才能達到)穩(wěn)定表達:表達質(zhì)粒上的AGE穩(wěn)定子
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真核細胞培養(yǎng)時支原體污染表現(xiàn)以及解決方式
支原體是一種特殊的微生物,在哺乳動物(包括人類)、爬行動物、昆蟲和植物中廣泛分布。它是小、較為簡單的可自我復制的原核生物,大小僅為0.2-0.8um。支原體的基因組僅為0.58-2.20Mb,其自身生物合成能力有限,因此大部分營養(yǎng)物質(zhì)都要依賴于宿主。在真核細胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達到63%,因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養(yǎng)中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染,估計細胞培養(yǎng)的同學就開始犯愁了,細胞培養(yǎng)的老手都知道,支原體污染非常不 -
化學感受態(tài)細胞是常規(guī)克隆和亞克隆實驗應用較為合適的解決方案。經(jīng)氯化鈣處理,促進質(zhì)粒DNA黏附于感受態(tài)細胞膜上。將感受態(tài)細胞通過水浴熱激,使細胞膜孔打開,從而質(zhì)??梢赃M入。操作方法:(以下操作均按無菌條件的標準進行)1、取感受態(tài)細胞置于冰浴中,如需分裝可將剛融化細胞懸液分裝到無菌預冷的離心管中,置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100μl,可以根據(jù)實際情況分裝使用。應注意所用DNA體積不要超過感受態(tài)細胞懸液體積的十分之一。以下實驗以100μl感受態(tài)細胞為例。2、向感受態(tài)細胞懸液中加入
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不管是從應用還是制備,多克隆抗體與單克隆抗體都有很大區(qū)別
多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,刺激機體多個B細胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體后,所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。多克隆抗體與單克隆抗體的應用比較(1)多克隆抗體的應用一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗 -
M15化學感受態(tài)細胞操作方法看似簡單,細節(jié)很重要
M15化學感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌M15菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的化學轉(zhuǎn)化。它能表達lac阻遏蛋白,抑制T5強啟動子的表達。同時,pREP4還賦予宿主菌株卡那霉素抗性。pREP4是從pACYC改造而來的,含有p15A復制子。它能夠與所有帶ColE1復制起點的質(zhì)粒共存。主要特點使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達108,-80℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。recA1和endA1突變阻止對克隆DNA的修飾或?qū)λ拗骶旧獶NA的重組,提高純化質(zhì)粒的產(chǎn)量和質(zhì)量。M15化學感受態(tài) -
重組人白介素-11是由造血微環(huán)境基質(zhì)細胞和部分間葉細胞產(chǎn)生的多效性細胞因子。IL-11通過與細胞表面特異性受體-配體結合鏈IL-11Rα結合,并連接到信號傳導鏈可溶性糖蛋白130(gp130)后發(fā)揮其生物學作用,可以直接作用于骨髓巨核系祖細胞、巨噬細胞、T細胞、上皮細胞和肝細胞,具有促進巨核細胞和血小板生成、調(diào)控免疫、抗炎和保護黏膜上皮等多種功能。IL-11的促造血功能主要表現(xiàn)在直接刺激造血干細胞和巨核系祖細胞的增殖,誘導巨核細胞分化成熟,促進高倍性巨核細胞生成,增加單個巨核細胞血小板的產(chǎn)量,從