貨號: | CM-6022K |
供應(yīng)商: | 上海淳麥 |
數(shù)量: | 1000只 |
英文名: | TurboChemically Competent Cell |
保質(zhì)期: | 1年 |
保存條件: | 零下80度 |
規(guī)格: | 20*100ul |
Turbo
Turbo Chemically Competent Cell
Turbo感受態(tài)細(xì)胞基因型:
F' proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1
thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
Turbo感受態(tài)細(xì)胞簡要說明:
Turbo 菌株是生長最快的大腸桿菌菌株。-CMbio-
平板上 6.5 小時可見克隆,營養(yǎng)液中搖菌 4-6 小時可提取質(zhì)粒,缺失核酸內(nèi)切酶 (endA),提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和 質(zhì)量;Turbo 菌株可嚴(yán)格控制 laclq 的表達(dá),可以克隆毒性基因;fhuA2 突變賦予 Turbo 菌株對噬菌體 T1 的抗性;lacZ ΔM15 的存在使 Turbo 可用于藍(lán)、白斑篩選。-CMbio-
-CMbio-Turbo 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×108 cfu/μg DNA。
Turbo感受態(tài)細(xì)胞操作說明:
1. Turbo 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5 分鐘后待菌塊融化,加入目的 DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手
EP 管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置 25 分鐘。-CMbio-
2. 42℃水浴熱激 45 秒,迅速放回冰上并靜置 2 分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。-CMbio-
3. 向離心管中加入 700 μl 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (SOC 或 LB),混勻后 37℃,200 rpm 復(fù)蘇 60 分鐘。
4. 5000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基 上。-CMbio-
5. 將平板倒置放于 37℃培養(yǎng) 6.5 小時以上。-CMbio-
Turbo感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化。插入冰中 8 分鐘內(nèi)加入目標(biāo) DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降 低轉(zhuǎn)化效率。-CMbio-
2. 混入目的 DNA 時應(yīng)輕柔操作。-CMbio-
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。-CMbio-