貨號: | CM-6010K |
供應(yīng)商: | 上海淳麥 |
數(shù)量: | 1000只 |
英文名: | DB3.1Chemically Competent Cell |
保質(zhì)期: | 1年 |
保存條件: | 零下80度 |
規(guī)格: | 20*100ul |
DB3.1感受態(tài)細(xì)胞
DB3.1 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:
DB3.1 | |
pUC19(control vector) | 10pg/μl 10μl |
DB3.1感受態(tài)細(xì)胞基因型:
F- gyrA462 endA1 glnV44 (sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)ara14galK2lacY1proA2rpsL20(Smr) xyl5 Δleu mtl1
DB3.1感受態(tài)細(xì)胞簡要說明:
CMbio DB3.1大腸桿菌菌株基因組中含有 gyrA462 基因,賦予其對ccdB毒性基因的抗性,特別適用于構(gòu)建或擴(kuò)繁含有ccdB基因的質(zhì)粒載體(例GATEWAY?System vector) ,此菌株具有鏈霉素抗性。DB3.1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
DB3.1感受態(tài)細(xì)胞操作說明:
- CMbio DB3.1感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA并用指尖輕輕管底混勻(避免用槍吸打),冰上靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
DB3.1感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng):
- CMbio 感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。