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產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱	品牌
G9211	Anti-HaloTag® Monoclonal Antibody	Promega
E1500	Luciferase Assay System	promega
E2691	FuGENE? 6 Transfection Reagent	promega
G7572	CellTiter-Glo? Luminescent Cell Viability Assay	promega
E6120	ONE-Glo? Luciferase Assay System	Promega
E4550	Luciferase 1000 Assay System	Promega
G7572	CellTiter-Glo? Luminescent Cell Viability Assay	promega
A3500	Reverse Transcription System	promega
U1515	dNTP Mix	promega
G8091	Caspase-Glo® 3/7 Assay	Promega
E2620	Bright-Glo™ 螢光素酶檢測系統(tǒng)	promega
M1801S	T4 DNA Ligase	promega
G7892	CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay	promega
V5113	Sequencing Grade Modified Trypsin	promega
G9243	CellTiter-Glo® 2.0 Assay	promega
G9242	CellTiter-Glo® 2.0 Assay	promega
Z5342	MagneSphere® Technology Magnetic Separation Stands	promega
G3581	CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay (MTS)	promega
G7572	CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay	promega
v1062	Chymotrypsin, Sequencing Grade	promega
v1 651	Glu-C, Sequencing Grade	promega
G7892	CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay	promega
P1193	Nuclease-Free Water	promega
V4251	TBE Buffer, 10X, Molecular Biology Grade	promega
V2011	SoftLink™ Soft 1Release Avidin Resin	promega
V5113	TNM-FH (Liquid) - HyClone Insect Cell Culture Media	promega
V5113	Sequencing Grade Modified Trypsin	promega
E6120	ONE-Glo™ 螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)	promega
G9243	CellTiter-Glo® 2.0 Cell Viability Assay	promega
E6120	ONE-Glo™ 螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)	Promega
E2691	FuGENE 6 轉(zhuǎn)染試劑	promeg
E2940	Dual-Glo® 雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)	promega
P1171	DTT, Molecular Grade (DL-Dithiothreitol)	promega
G7892	CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay	promega
E4651	pGL4 52[luc2P STAT5RE Hygro] Vector	promega
G7572	CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay	promega
V4251	TBE Buffer, 10X, Molecular Biology Grade	promega
V5113	Sequencing Grade Modified Trypsin	promega
E2520	Steady-Glo® 螢光素酶檢測系統(tǒng)	promega
E2661	Glo Lysis Buffer, 1X	promega
P1171	DTT, Molecular Grade (DL-Dithiothreitol)	promega
E4982	ViaFect™ Transfection Reagent	promega
V5113	Sequencing Grade Modified Trypsin	promega
E4530	Luciferase Assay System	promega
E6120	ONE-Glo™ 螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)	Promega
V5113	Sequencing Grade Modified Trypsin, Frozen	promega
E2620	Bright-Glo™ 螢光素酶檢測系統(tǒng)	promega
E1500	Luciferase Assay System	promega
E6120	ONE-Glo? Luciferase Assay System	promega
G7892	CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay,	promega
E2940	Dual-Glo® 雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)	promega
G7572	CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay	promega
G7572	CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay	promega
E6120	ONE-Glo™ 螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)	promega
E6120	ONE-Glo™ 螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)	promega
G1780	CytoTox 96® Non-Radioactive Cytotoxicity Assay	promega

 

 

產(chǎn)品種類齊全，北京華新康信與國外諸多生命科學(xué)領(lǐng)域*合作眾多，代理品牌Glycan Therapeutics，Intact Genomics，Integral Molecular，Medkoo，Niomech，Terragene，Anshlabs wako，EZbioscience，CMCTAG，Anatrance ，F(xiàn)avorage ，Affinity，Advanced biomatrix，bioplastics，天地人和，TRC，凱杰，義翹，sciencell；價格優(yōu)勢品牌：seracare，Streck，Toxin，Zeptometrix，sigma，F(xiàn)orteBio，CanSyn，polyplus，santa，chormsystems，bethyl ，moltox， permagenlabware ，bioflux，Bio－Rad， coriell，   listlabs， ZYMO ， ABclonal  ， EY laboratories  ，greatcellsolar ， agdia ， beckman ， Bioxcell，，biomax ，usascientific ， TRC ，nist ，americanelements，cayman  ， Fisher ，thermofisher ，  nanopore，   日立，  三菱株式會社 ，RD， takara等，緊跟生命科學(xué)的發(fā)展，不斷滿足客戶的需求，為各位的科研之路上添磚加瓦！

 

 

抗HaloTag®單克隆抗體  Anti-HaloTag® Monoclonal Antibody

G9211_Anti-HaloTag--單克隆抗體_3

針對HaloTag®蛋白的單克隆抗體

與其他非HaloTag®蛋白幾乎沒有交叉反應(yīng)

可以通過Western blot檢測低0.5–1ng的HaloTag®融合蛋白

以1mg / ml的濃度提供

尺寸：200mg

Anti-HaloTag®單克隆抗體是針對HaloTag®蛋白的小鼠單克隆抗體，可用于通過Western blot檢測HaloTag®融合蛋白。 HaloTag®平臺滿足了細胞成像，蛋白質(zhì)純化和蛋白質(zhì)下拉應(yīng)用中功能蛋白質(zhì)分析的靈活性需求。了解有關(guān)HaloTag®技術(shù)的更多信息。

 

應(yīng)用：完整的HaloTag®融合蛋白的免疫學(xué)檢測，專門用于蛋白質(zhì)印跡。蛋白質(zhì)印跡的建議工作稀釋度為PBS中的1：1,000。

 

通訊協(xié)定

完整協(xié)議

HaloTag®技術(shù)：專注于成像技術(shù)手冊

 

1.HaloTag®技術(shù)和細胞成像簡介了解蛋白質(zhì)的功能作用以及它們?nèi)绾卧诩毎麅?nèi)相互作用越來越重要。通常需要多次重組蛋白融合才能完成這項研究，由于在不同應(yīng)用之間移動效率低下，有時可能很慢且麻煩。結(jié)果，需要提供在表達和定位，蛋白質(zhì)純化，蛋白質(zhì)相互作用發(fā)現(xiàn)，篩選和進一步的功能分析之間具有靈活性的重組蛋白質(zhì)標簽。 HaloTag®平臺（a–g）滿足了功能蛋白分析靈活性的需求。這種模塊化技術(shù)基于融合標簽和合成配體之間共價鍵的形成，旨在全面表征細胞和生化環(huán)境中蛋白質(zhì)的功能。有多種HaloTag®配體（a–g）和試劑盒可用于熒光細胞成像和蛋白質(zhì)捕獲/純化，以及可定制的反應(yīng)性配體構(gòu)建基塊（a，e，f）。 HaloTag®報告基因蛋白是水解酶的一種工程化，無催化活性的衍生物，可與HaloTag®配體形成共價鍵（圖1）。在生理條件下，該共價鍵快速形成且高度特異性且基本上不可逆，從而形成即使在嚴格條件下也穩(wěn)定的復(fù)合物（1-3）。 HaloTag®蛋白是33kDa的單體蛋白，不是哺乳動物，植物或大腸桿菌細胞內(nèi)源的；因此，沒有非特異性活性水平，只有高標記特異性。該技術(shù)已成功用于許多系統(tǒng)，包括：哺乳動物細胞（4），細菌（5），酵母（6），植物（7）和動物模型（8）。

使用HaloTag®熒光配體進行細胞成像的優(yōu)勢在于可以地進行標記的時空控制：HaloTag®技術(shù)的模塊化性質(zhì)以及與配體的快速結(jié)合動力學(xué)，可以對蛋白質(zhì)運輸和周轉(zhuǎn)進行直接成像。由于可用的配體既具有變化的熒光光譜，也具有細胞滲透和不滲透的特性，因此用戶可以對標記進行空間和時間控制。例如，研究人員只能用不滲透細胞的配體標記膜結(jié)合蛋白的表面池，并跟蹤其生物學(xué)，內(nèi)在化或其他命運?；蛘呖梢韵扔靡环N“顏色”的配體標記蛋白質(zhì)，然后在一段時間后再次用含有不同顏色的染料的配體標記蛋白質(zhì)。這種脈沖追蹤標記允許直接觀察蛋白質(zhì)隨時間的運輸和/或更新。

 

圖1.HaloTag®融合蛋白顯示了與TEV位點成比例的連接子以及與HaloTag®配體共價相互作用的結(jié)合袋。標記活細胞，然后對活細胞或固定細胞進行成像，和/或直接運行凝膠進行定量：所有HaloTag®熒光配體均允許對活細胞進行標記和成像。根據(jù)您的工作流程需要，可以通過一個清洗步驟（一個小時內(nèi)）快速完成標簽，或者使用無洗程序進行一整夜的標簽。由于HaloTag®融合蛋白和配體之間共價鍵的穩(wěn)定性以及染料本身的穩(wěn)定性，也可以對通過標準免疫細胞化學(xué)方案操作的固定細胞進行成像。這種穩(wěn)定性還允許使用熒光掃描儀通過SDS-PAGE直接分析標記的細胞。僅設(shè)計一個可用于多種應(yīng)用程序的基因構(gòu)建體：無需設(shè)計和克隆新的表達構(gòu)建體即可獲得新功能。除細胞成像外，相同的融合蛋白還可以純化為單個純蛋白，或者與它的搭檔一起下拉以發(fā)現(xiàn)新的蛋白相互作用。使用HaloLink™樹脂從HaloTag®熒光配體轉(zhuǎn)換為HaloTag®純化和下拉系統(tǒng)，可有效捕獲和回收HaloTag®融合蛋白或復(fù)合物。

 

 

用戶要提供的材料（解決方案組合物請參見第9.B節(jié)。）•裝有表達HaloTag®融合蛋白的細胞的密閉玻璃蓋罩•37°C時適合細胞使用的完整培養(yǎng)基•培養(yǎng)基中缺少酚紅37°C（可選）•1X PBS（pH 7.5，可用于洗滌）•共聚焦顯微鏡或?qū)捯曇盁晒怙@微鏡，配有合適的濾光片組和/或激光器（請參見第9.A節(jié)和圖2）•37°C + CO2細胞培養(yǎng)培養(yǎng)箱1.在即將加入細胞之前，在溫暖的培養(yǎng)基中制備HaloTag®配體的1：200稀釋液。這是5倍的工作液解決方案。 2.用5XHaloTag®配體工作儲備溶液替換現(xiàn)有體積的五分之一，標記細胞，并輕輕混合。因此建議的終標記濃度建議為5µM TMR。 3.5µM AlexaFluor®660; 1µM diAcFAM，OregonGreen®或AlexaFluor®488；和10µM香豆素配體。 3.在37°C + CO2細胞培養(yǎng)箱中孵育15分鐘。 4.對于可透過細胞的配體，請用等體積（或更大體積）的溫暖新鮮培養(yǎng)基（或1X PBS [pH 7.5]）輕輕替換含配體的培養(yǎng)基。重復(fù)兩次，以溫暖的*培養(yǎng)基結(jié)束，共進行三遍*漂洗，然后繼續(xù)執(zhí)行步驟5。對于細胞不滲透的配體（含AlexaFluor®的配體），請用相等（或更大）的濃度替換含配體的培養(yǎng)基體積的溫?zé)嵝迈r培養(yǎng)基兩次，然后進行步驟7。因為它們不滲透細胞，所以這些配體不需要洗去未結(jié)合的配體。 5.在細胞培養(yǎng)箱中于37°C + CO2的*培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞30分鐘，以洗滌未結(jié)合的配體。 6.用等體積的新鮮溫?zé)崤囵B(yǎng)基替換培養(yǎng)基。使用缺少酚紅的培養(yǎng)基可以改善成像效果。 7.轉(zhuǎn)移顯微鏡，并捕獲圖像。

 

5月-7月疫情期間，北京華新康信生物科技有限公司進行產(chǎn)品大力讓利活動，代理Promega品牌。北京華新康信生物科技有限公司是 Promega品牌代理商。北京華新康信專業(yè)代理各大產(chǎn)品，系列齊全，大部分現(xiàn)貨，保證質(zhì)量，真誠合作，歡迎您咨詢，我們將竭盡全力滿足您的需求。選購Promega代理，您選北京華新康信生物科技有限公司，北京華新康信生物科技有限公司專業(yè)代理Promega品牌，Promega代理 北京華新康信生物科技有限公司是（Promega）（Promega代理）（Promega專業(yè)代理）（Promega北京代理）（Promega上海代理）（Promega代理），歡迎電話咨詢，我們的產(chǎn)品，將會給您帶來意想不到的成效，歡迎電話咨詢，合作共贏。