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北京華新康信生物科技有限公司 |
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更新時(shí)間:2022-08-29 16:48:44瀏覽次數(shù):973
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產(chǎn)量最高的新生兒心肌細(xì)胞分離
貓?zhí)枺?span>nc-6031
科學(xué)家的正確策略
大多數(shù)關(guān)于新生大鼠或小鼠肌細(xì)胞分離的方法不僅是耗時(shí)耗力的過程,而且會(huì)產(chǎn)生研究人員最關(guān)心的低細(xì)胞活力。
需要更多細(xì)胞來研究細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和死亡的細(xì)胞和分子機(jī)制的科學(xué)家會(huì)發(fā)現(xiàn),他們的實(shí)驗(yàn)不可能獲得低產(chǎn)量的細(xì)胞。
高性能系統(tǒng)
使用最新更新的心肌細(xì)胞分離系統(tǒng),您將*消除所有這些問題,并在一小時(shí)內(nèi)獲得最健康和最大產(chǎn)量的新生兒心肌細(xì)胞。
新生大鼠或小鼠心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)無風(fēng)險(xiǎn),保證滿意。
隔離步驟
產(chǎn)品
貓 # 尺寸 價(jià)格
Neomyt 試劑盒 nc-6031 6 次 415 美元
SureCoat(用于培養(yǎng)板涂層) SC-9035 500 毫升
115 美元
NS培養(yǎng)基(含血清) m-8031 500 毫升
175 美元
NW 培養(yǎng)基(不含血清)
m-8032 500 毫升 124 美元
* 1 rxn 可以做 5 - 35 顆新生大鼠心臟,20 - 80 顆小鼠心臟
* Neomyt 試劑盒中不包含 NS 培養(yǎng)基和 NW 培養(yǎng)基
非病毒哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)
轉(zhuǎn)基因表達(dá)系統(tǒng)
非病毒轉(zhuǎn)基因
表達(dá)系統(tǒng)
誘導(dǎo)表達(dá)
向量系統(tǒng)
miRNA表達(dá)載體
基于 miRNA 的
基因敲除
小環(huán) miRNA
表達(dá)載體
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miRNA 表達(dá)載體
Cellutron 為您提供強(qiáng)大的 miRNA 工具來檢查 miRNA 對(duì)細(xì)胞功能和表型的影響。有數(shù)百種庫存載體可用于您選擇的天然 miRNA 和 antagomiR 過表達(dá)。此外,Cellutron 還構(gòu)建了用于表達(dá)人工 miRNA 的表達(dá)載體,這些人工 miRNA 被設(shè)計(jì)成與您的目標(biāo)基因具有 100% 的同源性,從而阻斷基因表達(dá)。
Cellutron miRNA expression vectos 允許您:
1. 表達(dá)人工 miRNA 以敲低靶基因的表達(dá)。
2. 高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型,包括:分裂細(xì)胞、非分裂細(xì)胞、成體和胚胎干細(xì)胞以及iPS細(xì)胞。
3. 在體內(nèi)和體外有條件地表達(dá)您選擇的 miRNA。
4. 生成用于長(zhǎng)期 miRNA 表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞系。
一般 miRNA 通路
MicroRNAs (miRNAs) 是長(zhǎng)度為 21 到 25 個(gè)核苷酸的小型非編碼 RNA,它們通過與 3' 非翻譯區(qū)以及可能與靶 mRNA 的編碼序列進(jìn)行堿基配對(duì)來調(diào)節(jié)基因表達(dá),從而導(dǎo)致翻譯抑制或降解。
miRNA 由 RNA 聚合酶 II 轉(zhuǎn)錄,可以來源于單個(gè) miRNA 基因、蛋白質(zhì)編碼基因的內(nèi)含子或通常編碼多個(gè)密切相關(guān)的 miRNA 的多順反子轉(zhuǎn)錄物。Pri-miRNAs 通常有幾千個(gè)堿基長(zhǎng),在細(xì)胞核中被 RNase Drosha 加工成 70-100 個(gè)核苷酸長(zhǎng)的發(fā)夾狀前體,稱為 pre-miRNAs。在轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)后,pre-miRNA 被 RNA 核酸內(nèi)切酶 Dicer 進(jìn)一步加工以產(chǎn)生雙鏈 miRNA。
然后將此 miRNA 雙鏈體整合到稱為 RNA 誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物 (RISC) 的多組分蛋白質(zhì)復(fù)合物中。在此過程中,miRNA雙鏈體的一條鏈被選擇為成熟的miRNA,而另一條鏈通常被快速去除和降解。miRNA 5' 末端的核苷酸 2-8 被命名為“種子序列",因?yàn)樵搮^(qū)域似乎對(duì) mRNA 靶標(biāo)識(shí)別特別重要。
miRNA在真核生物中非常保守,在基因表達(dá)和調(diào)控中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。
誘導(dǎo)表達(dá)載體系統(tǒng)
Cellutron 利用 Cre-Loxp 技術(shù)開發(fā)了一種新型可誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng),并提供了調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)基因表達(dá)的能力。該系統(tǒng)包含兩個(gè)具有強(qiáng) CAG 啟動(dòng)子的表達(dá)載體,用于高效基因表達(dá)。pEGFP/RFP-miRNA-BL 和 pEGFP/RFP-T2A-GOI-BL 是具有 EGFP 和 3X 終止序列的表達(dá)載體,其兩側(cè)有兩個(gè) loxP 位點(diǎn),然后是用于表達(dá) RFP 和 miRNA 或蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)基因的共順反子序列. 此外,在 miRNA 和蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)基因的表達(dá)盒下游克隆了一個(gè)殺稻瘟素 (BL) 表達(dá)盒(用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的藥物選擇)。與誘導(dǎo)型表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染需要 pCreER-IRES-Puro。
共轉(zhuǎn)染后,系統(tǒng)最初只表達(dá) EGFP,這是一種方便監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)染效率的報(bào)告蛋白??梢栽隗w外和體內(nèi)添加 4-OHT 以激活 Cre 重組酶的條件活性形式,從而導(dǎo)致 miRNA 或蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)基因的高水平和受調(diào)控的表達(dá)。
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其他的這些是菌株
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