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BlastR™過濾系統(tǒng)

概述

BlastR™裂解過濾系統(tǒng)允許用戶使用變性緩沖液從所有細(xì)胞隔室中捕獲蛋白質(zhì)，以獲得相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)非變性緩沖液更完整的蛋白質(zhì)圖譜。變性緩沖液的一個(gè)顯著缺點(diǎn)是粘性基因組DNA污染，這可能干擾蛋白質(zhì)分析、蛋白質(zhì)在SDS-PAGE凝膠上的遷移以及干擾免疫沉淀測(cè)定。

BlastR™過濾器從變性細(xì)胞裂解緩沖液提取物中去除粘性基因組DNA，同時(shí)將處理時(shí)間縮短至不到一分鐘。專有過濾技術(shù)基于可壓縮聚氨酯過濾器，具有捕獲基因組DNA的最佳孔徑。過濾器的可壓縮性質(zhì)允許樣品的最大回收率，通常為原始體積的90%。

有兩種版本可供選擇：1）過濾器加緩沖液版本（Cat.#BLR01，包括；BlastR™裂解緩沖液），開發(fā)為

BlastR快速過濾套件

BlastR快速過濾套件（50個(gè)過濾器）

SKU BLR02

數(shù)據(jù)表

MSDS

數(shù)量/包裝

BlastR™過濾器與變性緩沖液（如胍、尿素或通常產(chǎn)生豐富粘度的高SDS基提取緩沖液）結(jié)合使用時(shí)，可以快速可靠地制備無基因組DNA（gDNA）的細(xì)胞裂解物，用于蛋白質(zhì)印跡或免疫沉淀。gDNA污染是變性緩沖液的一個(gè)重要問題，變性緩沖液可能干擾下游應(yīng)用，如SDS-PAGE中蛋白質(zhì)的免疫沉淀和遷移。與超聲處理或胰島素針gDNA剪切方法不同，BlastR™過濾器可有效去除gDNA污染，同時(shí)對(duì)裂解物中蛋白質(zhì)的完整性沒有影響。

產(chǎn)品用途包括

降低樣品粘度

蛋白質(zhì)提取物的快速分離

變性裂解緩沖液提取物的制備

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：Blaster快速過濾套件白書

BlastR過濾器設(shè)置50個(gè)單元。

BlastR™裂解物gDNA的澄清

（A） 將粘性樣品裂解液裝載到BlastR™過濾器上。

（B） 樣品通過捕獲gDNA的過濾系統(tǒng)。>細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的回收率為90%。

Signal Seeker™泛素檢測(cè)試劑盒（30份）

信號(hào)導(dǎo)引頭泛素化檢測(cè)試劑盒（30個(gè)測(cè)定，免疫沉淀格式）

SKU BK161

數(shù)據(jù)表

MSDS

數(shù)量/包裝

Signal Seeker™生產(chǎn)線的開發(fā)允許專家和非專家對(duì)關(guān)鍵的調(diào)節(jié)蛋白修飾進(jìn)行簡(jiǎn)單分析。全面的Signal Seeker™試劑盒提供了一個(gè)親和珠系統(tǒng)，用于從任何給定的細(xì)胞或組織裂解物中分離和富集修飾蛋白。然后使用靶蛋白的一級(jí)抗體通過標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。

產(chǎn)品用途包括

調(diào)查瞬態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制

測(cè)量多途徑成員蛋白的信號(hào)事件

發(fā)現(xiàn)感興趣的蛋白質(zhì)的新修飾

深入了解監(jiān)管機(jī)制

測(cè)量?jī)?nèi)源性或瞬時(shí)表達(dá)的蛋白質(zhì)信號(hào)事件

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：泛素檢測(cè)試劑盒白書

試劑盒內(nèi)容

泛素試劑盒包含以下成分：

裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)澄清步驟洗滌步驟洗脫步驟西方步驟

BlastR™裂解緩沖液

BlastR™稀釋緩沖液

BlastR™過濾器

蛋白酶抑制劑雞尾酒

去泛素酶抑制劑Cocktail

Precision Red™蛋白質(zhì)測(cè)定試劑

泛素親和珠

泛素控制珠

BlastR™沖洗緩沖液

旋轉(zhuǎn)柱

珠子洗脫緩沖液

化學(xué)發(fā)光試劑A

化學(xué)發(fā)光試劑B

抗泛素HRP抗體

示例結(jié)果

這些試劑盒有許多應(yīng)用（見下一節(jié)），我們?cè)谶@里描述Rac1蛋白的一個(gè)有趣應(yīng)用：

應(yīng)用1：調(diào)查高度瞬態(tài)調(diào)節(jié)事件

Rho蛋白家族的活性，包括Rac1，已知在一定程度上通過泛素化（也稱為泛素化）事件來調(diào)節(jié)，泛素化事件可以導(dǎo)致

在這一研究領(lǐng)域可以嘗試的其他實(shí)驗(yàn)包括：

•參與Rac1單泛素化和多泛素化的泛素酶或去泛素酶的藥理學(xué)研究

•研究在各種不同生長(zhǎng)因子或藥物治療下Rac1激活和泛素化之間的關(guān)系。

•檢查泛素化Rac1與效應(yīng)物的相互作用。

•檢查泛素化Rac1和Rac1的其他調(diào)節(jié)性PTM之間的串?dāng)_。

欲了解更多信息，請(qǐng)聯(lián)系

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品：

Signal Seeker™磷酸酪酸檢測(cè)試劑盒（目錄號(hào)BK160）

Signal Seeker™SUMOylation 2/3檢測(cè)套件（類別號(hào)BK162）

Signal Seeker™：BlastR™快速裂解物制備試劑盒（目錄號(hào)BLR01）

Signal Seeker™泛素親和珠（類別號(hào)UBA01B珠）

Signal Seeker™：PTMtrue™泛素抗體（目錄號(hào)AUB01）

BlastR快速裂解物制備試劑盒

BlastR快速裂解物制備試劑盒（50個(gè)過濾器）

SKU BLR01

數(shù)據(jù)表

MSDS

數(shù)量/包裝

BlastR™過濾器與變性緩沖液（如胍、尿素或通常產(chǎn)生豐富粘度的高SDS基提取緩沖液）結(jié)合使用時(shí)，可以快速可靠地制備無基因組DNA（gDNA）的細(xì)胞裂解物，用于蛋白質(zhì)印跡或免疫沉淀。gDNA污染是變性緩沖液的一個(gè)重要問題，變性緩沖液可能干擾下游應(yīng)用，如SDS-PAGE中蛋白質(zhì)的免疫沉淀和遷移。與超聲處理或胰島素針gDNA剪切方法不同，BlastR™過濾器可有效去除gDNA污染，同時(shí)對(duì)裂解物中蛋白質(zhì)的完整性沒有影響。

產(chǎn)品用途包括

降低樣品粘度

蛋白質(zhì)提取物的快速分離

變性裂解緩沖液提取物的制備

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：Blaster快速過濾套件白書

示例結(jié)果

BlastR™裂解物gDNA的澄清

（A） 將粘性樣品裂解液裝載到BlastR™過濾器上。

（B） 樣品通過捕獲gDNA的過濾系統(tǒng)。>細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的回收率為90%。

裝載BlastR™過濾器收集低粘度提取物

BlastR™與常用的非變性和變性裂解緩沖液的比較。從膜、細(xì)胞質(zhì)、線粒體和細(xì)胞核中分離蛋白質(zhì)。

A431細(xì)胞用BlastR™、RIPA、mPER、IP裂解、變性（1%SDS）和萊姆利裂解緩沖液裂解。使用各自的隔室標(biāo)記蛋白來確定從膜、細(xì)胞質(zhì)、線粒體和核標(biāo)記物中分離蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)印跡圖突出了BlastR™緩沖液與其他變性緩沖液類似地從所有細(xì)胞隔室中分離蛋白質(zhì)的能力。與變性緩沖液不同的是，BlastR™緩沖液與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)測(cè)定法兼容，這在同等條件下是至關(guān)重要的

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