坐骨神經(jīng)sun傷 （周圍神經(jīng)sun傷）動(dòng)物模型

周圍神經(jīng)損傷后影響外周神經(jīng)修復(fù)的因素是神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。已知的證據(jù)表明，周圍神經(jīng)受損 后參與神經(jīng)再生的主要因素包括神經(jīng)中樞和神經(jīng)局部的微環(huán)境。本章建立了坐骨神經(jīng)損傷動(dòng)物模型，研究 切斷坐骨神經(jīng)后行為學(xué)的變化情況，為進(jìn)一步研究神經(jīng)損傷修復(fù)的機(jī)制及策略提供基礎(chǔ)。

物種：

Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：

夾閉坐骨神經(jīng)干導(dǎo)致坐骨神經(jīng)損傷

模式動(dòng)物品系：

SPF級(jí)SD大鼠，雄性，8 周

實(shí)驗(yàn)分組：

隨機(jī)分組：對(duì)照組，模型組，陽性藥物組，受試藥物組(三個(gè)劑量梯度組)，15只每組

建模方法：

1、對(duì)雄性大鼠行腹腔注射麻醉。將大鼠俯臥位固定于鼠固定架上，鋪孔巾，暴露鼠左下肢并剪掉鼠 毛。

2、碘酒、酒精消毒三遍，于左側(cè)股后正中行縱行、長(zhǎng)約6-8mm切口，暴露皮下肌肉。

3、用zhi血鉗鈍性分離股二頭肌、半腱肌、半膜肌后，分離出白色、粗大的坐骨神經(jīng)，刺激后左足出現(xiàn) 抽動(dòng)。

4、距坐骨結(jié)節(jié)6-8mm處（定位）；用大止xue鉗夾閉坐骨神經(jīng)干，壓滿3扣；擠壓5秒鐘后松開止xue鉗， 間隔10秒后再夾閉5秒鐘，再放松10秒，第三次再夾閉5秒（定時(shí)）。

5、神經(jīng)干擠壓傷寬度約3mm。9-0無chuang縫線標(biāo)記后，將坐骨神經(jīng)送回原位，整理肌肉，縫合創(chuàng)口；假手 術(shù)組大鼠麻醉后，僅切開皮膚暴露左側(cè)坐骨神經(jīng)但不做鉗夾，在相應(yīng)部位相同方法標(biāo)記后縫合。

后期取材：

取出的動(dòng)物飼養(yǎng)一周，結(jié)束后，注射水he氯醛麻醉大鼠，將鼠仰臥位固定于大鼠固定架上。自頜下 至小腹行胸、復(fù)聯(lián)合切口，切斷肋骨，剪斷膈肌，暴露出跳動(dòng)的心臟。用16號(hào)針頭由左心尖刺入左心室， 用軟靜脈留置導(dǎo)管沿左心室經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入主動(dòng)脈，剪開右心耳。

先用0.9%生理鹽水250ml快速?zèng)_洗組織內(nèi)血液，其后用4%哆聚甲醛固定液快速推注100ml，再緩慢推 注100ml，直至使鼠尾巴翹起，身體逐漸僵硬，顏色變白為止。灌注后，立即將身體一僵硬的鼠于俯臥位 固定于手shu臺(tái)上，由胸-骶部沿脊柱正中切開，暴露及分離背部肌肉，沿十二肋肌部切斷T12 L1水平脊 柱、脊髓。沿坐骨神經(jīng)走行切腰4、腰5、骶1段脊髓和包括擠壓傷在內(nèi)的上下各2mm的坐骨神經(jīng)。

同法切取假手術(shù)組的相應(yīng)部位等長(zhǎng)標(biāo)本。分三種方法進(jìn)行處理及固定。

(1) 4%哆聚甲醛固定液中固定，制備石蠟切片。

(2) 2.5%戊2醛液固定后，備做電鏡。

(3) 液氮中冷凍，備做冰凍切片。

坐骨神經(jīng)sun傷 （周圍神經(jīng)sun傷）動(dòng)物模型