詳細(xì)介紹
包蟲病犬糞抗原檢測(cè)試劑盒
犬糞包蟲抗原檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
使用說(shuō)明書
●用途意義
本試劑用于犬糞便中包蟲抗原的檢測(cè)。
●試劑組成
1.預(yù)包被板 96T; 7. 樣品稀釋液(5號(hào)液) 1支;
2.酶結(jié)合物 1支; 8. 終止液(6號(hào)液) 1支;
3.濃縮洗滌液
(2號(hào)液,用前以蒸餾水10倍稀釋) 1支; 9. 陽(yáng)性對(duì)照品 1支;
4.底物(3號(hào)液) 1支; 10.陰性對(duì)照品 1支;
5.顯色劑(4號(hào)液) 1支; 11.使用說(shuō)明書 1份
6.濃縮糞便處理液
(7號(hào)液,用前以蒸餾水等體積稀釋) 1支;
● 操作程序
1. 樣品處理: 犬糞樣品需要預(yù)先低溫冷凍七天以上,以滅活蟲卵。取約1克犬糞(約黃豆量大?。┘尤?ml已稀釋的糞便處理液,充分?jǐn)嚢杌靹?,靜置10分鐘,再經(jīng)5000rpm離心30分鐘,取上清液檢驗(yàn)。
2. 加樣反應(yīng): 根據(jù)需要量取出預(yù)包被板。設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各一孔;其中陰、陽(yáng)對(duì)照孔分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照各100ul,空白對(duì)照孔加入樣品稀釋液(5號(hào)液)二滴。其它各樣品孔先滴加樣品稀釋液(5號(hào)液)各一滴,再取犬糞上清液50ul加入板孔中。37℃下避光反應(yīng)30分鐘,甩去孔內(nèi)液體。用已稀釋的洗滌液洗滌四次,每次靜止1分鐘,拍干。
3. 加酶反應(yīng): 除空白孔外,各孔滴加酶結(jié)合物二滴。37℃下避光反應(yīng)30分鐘,甩去孔內(nèi)液體。用已稀釋的洗滌液洗滌三次,每次靜止1分鐘,拍干。
4. 顯色反應(yīng): 每孔加底物(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各一滴,37℃下避光反應(yīng)10分鐘,加終止液(6號(hào)液)一滴混勻,終止反應(yīng)。
●結(jié)果判斷
以空白對(duì)照調(diào)零,用酶標(biāo)儀于450nm讀取O.D值,待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.07時(shí)按0.07計(jì)算。
●注意事項(xiàng)
1. 試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2. 如犬糞難以溶解,應(yīng)適當(dāng)搗碎處理。
3. 濃縮洗滌液及濃縮糞便處理液若出現(xiàn)結(jié)晶時(shí),應(yīng)置37℃至溶解。
4. 應(yīng)采集新鮮的犬糞樣本進(jìn)行測(cè)試。如不能及時(shí)檢測(cè),應(yīng)將糞樣放置低溫凍存,防止腐敗或反復(fù)凍融。
5. 對(duì)樣本及相關(guān)物品應(yīng)視為污染物,應(yīng)依照實(shí)驗(yàn)室規(guī)范妥為處理,并注意個(gè)人防護(hù)如佩戴手套等。