PANBIO登革熱IgM 捕獲ELISA法
預(yù)定用途:
Panbio登革熱IgM 捕獲ELISA法是一種定量檢測(cè)血清中登革熱IgM抗體的方法,可以作為臨床具有登革熱癥狀病人的臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)輔助手段。Panbio登革熱捕獲ELISA法應(yīng)和其它的登革熱血清學(xué)方法聯(lián)合應(yīng)用。
序言:
登革熱,黃病毒屬B群黃病毒,廣泛存在于熱帶和亞熱帶地區(qū)。通過(guò)蚊子,主要是埃及伊蚊和白紋伊蚊傳播。感染了登革熱病毒在臨床上可以引起一系列從不明顯到致死性的登革出血熱癥狀。典型登革熱癥狀表現(xiàn)為突然發(fā)熱、激烈頭痛、肌痛、關(guān)節(jié)痛和出疹。還有二相熱型、失眠、由于味覺(jué)喪失或苦味導(dǎo)致的厭食等也很常見(jiàn)。登革出血熱和登革休克綜合征經(jīng)常是伴隨二次血清感染出現(xiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥。
登革熱病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)法是一種很有用的方法,尤其是在二次和后繼的多次感染中,那時(shí)并發(fā)癥的發(fā)生率很高。登革熱病人的血清IgM抗體能在發(fā)熱后3~5天就能檢測(cè)并通常能持續(xù)30~90天,雖然檢測(cè)水平可能在感染后的8個(gè)月都可存在。
原理:
IgM群血清抗體和粘附在微孔測(cè)試板聚笨乙烯表面上的抗人IgM抗體相結(jié)合。用抗原稀釋液把登革熱1~4號(hào)抗原濃縮液稀釋到恰當(dāng)?shù)墓ぷ魅萘???乖衫ハx(chóng)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和一種免疫純化的單克隆抗體制得而成。在稀釋抗原中加入適量的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)結(jié)合單克隆抗體(MAb)形成抗原-MAb復(fù)合物。洗去測(cè)試板內(nèi)的殘存血清,加入抗原-MAb復(fù)合物。孵育后,洗滌微孔板,加入無(wú)色底物,四甲基聯(lián)苯胺/過(guò)氧化氫(TMB/H2O2)。底物被酶水解后變成藍(lán)色。加酸終止反應(yīng)后,TMB變成黃色。顏色的變化表明測(cè)試樣本中有抗登革熱IgM抗體。
提供的材料:
1.抗-人IgM包埋微孔板—(測(cè)試板)微孔用抗-人IgM抗體包埋(12*8個(gè)孔)。備用。不用的微孔板立即收好,貯存在有干燥劑的地方。在2-8oC穩(wěn)定至失效。2. 登革熱1-4號(hào)抗原(重組體)— 一個(gè)透明有蓋的玻璃瓶,150 μL(藍(lán)色)濃縮的登革熱病毒抗原1,2,3和4號(hào)。沒(méi)有用過(guò)的稀釋的抗原一定要扔掉。濃縮的抗原貯存于2~8度直至失效。
3. 洗滌緩沖濃縮液— 一瓶60ml用吐溫20和防腐劑(0.1% ProclinTM)20倍濃縮的磷酸鹽緩沖鹽水pH 7.2-7.6。在低溫下可能會(huì)形成結(jié)晶。為避免這種情況,把它放在37oC直至變得透明。充分混勻。在1份洗滌緩沖濃縮液加入19份蒸餾水稀釋。稀釋的緩沖液在2~25oC可以貯存一個(gè)星期。
4. 血清稀釋液-兩瓶50ml裝(粉紅色)。備用。三羥甲基氨基甲烷緩沖鹽水pH 7.2-7.6 含防腐劑(0.1% Proclin)和添加劑。在2~8oC保持穩(wěn)定直至失效。
5. 抗原稀釋液-一瓶50ml裝(透明色)。備用。磷酸鹽緩沖液含防腐劑(0.1% ProclinTM 和0.005% 慶DA霉素)。在2~8oC保持穩(wěn)定直至失效。
6. 辣根過(guò)氧化物酶共軛單克隆抗體示蹤劑-一瓶7ml裝(黃色)。備用。辣根過(guò)氧化物酶共軛單克隆抗體示蹤劑含防腐劑(0.1% Proclin.)和蛋白穩(wěn)定劑。在2~8度保持穩(wěn)定直至失效。
7. 四甲基聯(lián)苯胺TMB-一瓶15ml裝。備用。3,3,5,5''-TMB和枸酸鹽緩沖液(pH 3.5-3.8)內(nèi)的過(guò)氧化氫的混合物。在2~8oC保持穩(wěn)定直至失效。
8. IgM陽(yáng)性對(duì)照血清-一個(gè)黑色有蓋的瓶子裝有200 μL人血清(含有0.1%疊氮化納和0.005%硫酸慶DA霉素)。在2~8oC保持穩(wěn)定直至失效。
9. IgM標(biāo)準(zhǔn)血清-一個(gè)橙色有蓋瓶子裝有400μL人血清(內(nèi)含0.1%疊氮化納和0.005%硫酸慶DA霉素)。在2~8oC保持穩(wěn)定直至失效。
10. IgM陰性對(duì)照血清-一個(gè)白色有蓋的瓶子裝有200 μL人血清(含有0.1%疊氮化納和0.005%硫酸慶DA霉素)。在2~8oC保持穩(wěn)定直至失效。
11. 終止液-一個(gè)瓶子15ml裝。備用。1M磷酸。在2~25oC保持穩(wěn)定直至失效。
Proclin. 300是RohmHaas公司的注冊(cè)商標(biāo)產(chǎn)品
對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)血清安全注意事項(xiàng):
在這些成份里疊氮化納的濃度是有毒性的,是屬于下列級(jí)別R22, R32的:“吞食有毒"和“和酸接觸會(huì)釋放出有毒氣體"
另外必需具備但不提供的材料:
1 精確可調(diào)節(jié)微量移液器(5-1000 μL容量),配備一次性使用吸管
2 去離子水
3 微量培養(yǎng)板洗滌系統(tǒng)
4 酶標(biāo)儀配備450nm濾波片
5 計(jì)時(shí)器
6 刻度量筒
7 燒瓶
8 血清稀釋用的試管或微量滴定板
9 抗原稀釋用的玻璃或塑料試管或瓶。
警示
用于體外診斷用
i 用在準(zhǔn)備對(duì)照時(shí)的所有人類來(lái)源的材料在測(cè)試對(duì)人類缺陷性病毒1和2(HIV1和2)、丙型肝炎病毒以及乙型肝炎病毒表面抗原抗體時(shí),都為陰性。但是沒(méi)有哪種方法能夠*保證,所以所有的人體對(duì)照和抗原都應(yīng)該認(rèn)為是潛在的感染源。疾病預(yù)防控制中心和國(guó)家健康署建議可能傳染的抗原應(yīng)該在2級(jí)生物安全下進(jìn)行處理。
ii 這種測(cè)試只能用血清。用全血、血漿或是其它的樣本間質(zhì)不能做。
iii 黃疸的或黃體脂蛋白血清,或表現(xiàn)出溶血的,或有細(xì)菌生長(zhǎng)的血清都不可用。
iv 不要加熱失活的血清。
v 在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前,所有的試劑必須要平衡至室溫(20~25oC)。試驗(yàn)受到室溫變化的影響。只有達(dá)到了室溫才能把微孔板從密封包里拿出來(lái)。
vi 用干凈的槍頭直接在瓶子里配試劑。轉(zhuǎn)移試劑可能會(huì)導(dǎo)致污染。
vii 未用過(guò)的微孔板,應(yīng)立即重新封存,并儲(chǔ)存有干燥劑的地方。如果不這樣做可能會(huì)造成錯(cuò)誤的結(jié)果。
viii 底物系統(tǒng)
a 由于TMB易受金屬離子污染影響,所以不允許底物系統(tǒng)和金屬表面接觸。
b 避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于陽(yáng)光直射下。
c 一些洗滌劑可能會(huì)干擾TMB的表現(xiàn)。
d TMB可能會(huì)有一些淡藍(lán)色。這個(gè)不會(huì)影響底物的活性或者試驗(yàn)的結(jié)果。
警告
ix 這些試劑盒成份內(nèi)含有疊氮HUA鈉,它可能與鉛或銅管道反應(yīng)形成高爆炸性金屬疊氮化合物。當(dāng)通過(guò)水管裝置來(lái)去除這些試劑時(shí),用大量的水沖洗以防止疊氮積聚在排水管。
x 疊氮HUA鈉會(huì)抑制結(jié)合物的活性。必須用干凈的移液管槍頭來(lái)加結(jié)合物以致疊氮HUA鈉不會(huì)被其它試劑攜帶污染。
為獲得更多的安全信息請(qǐng)參照從PANBI0得到的原料安全數(shù)據(jù)表(MSDS)
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標(biāo)本收集和準(zhǔn)備
讓靜脈血在室溫下(20~25oC)凝結(jié)成塊,然后根據(jù)全國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)NCCLS(收集診斷靜脈血的認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)程序,H3-A4, 1998)進(jìn)行離心。
血清應(yīng)盡快分離并冷藏(2~8oC),如果在兩天內(nèi)不試驗(yàn)的話,就應(yīng)該冷凍(-20oC或更低的溫度)。不推薦使用自我解凍的致冷機(jī)。黃疸血清、有溶血的、脂血的或是有細(xì)菌生長(zhǎng)的血清都不推薦使用。CLSI提供貯存血樣的建議。(血樣處理加工的認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)程序,H18-A2, 1999)。
測(cè)試程序
注意:確保在實(shí)驗(yàn)前,所有的試劑都平衡至室溫(20~25 oC)。在超出所提供的時(shí)間和溫度范圍內(nèi)試驗(yàn)可能會(huì)導(dǎo)致無(wú)效的結(jié)果。沒(méi)有在即定的時(shí)間和溫度內(nèi)進(jìn)行的試驗(yàn)應(yīng)重復(fù)一次。
血清預(yù)稀釋
i 從箔袋內(nèi)拿出所需數(shù)量的微孔板,并插入夾板固定器。5個(gè)板分別是陰性對(duì)照,陽(yáng)性對(duì)照和三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物。確保剩下未用的微孔板緊緊地密封在箔袋內(nèi)。
ii 用合適的試管或微量滴定板稀釋陽(yáng)性對(duì)照,陰性對(duì)照,標(biāo)準(zhǔn)物和病人樣品。
a 在10μL血清中加入1000μL血清稀釋液。充分混勻。或者
b 在10μL血清中加入90μL血清稀釋液。取出20μL稀釋的血清加入180μL血清稀釋液。充分混勻。
ELISA操作步驟
方法概括參見(jiàn)附圖
a抗原
i 確定好你試驗(yàn)所需孔的數(shù)量。用抗原稀釋液稀釋抗原1/250。建議zui少要稀釋10μL 抗原至2.5ml抗原稀釋液。這樣才足夠做5條帶(共有40個(gè)孔)。每條帶都需要0.5ml稀釋的抗原。一旦抗原被加入了抗原稀釋液,那溶液就會(huì)變成淡藍(lán)色。確保剩下沒(méi)用的濃縮抗原貯存在2~8 oC。
ii 取出需要量的稀釋抗原,然后在一個(gè)干凈的玻璃或塑料瓶里混合相同體積的MAb 示蹤劑。輕輕地混勻抗原和MAb 示蹤劑溶液,再在室溫下保持至所需時(shí)。棄掉沒(méi)用過(guò)的稀釋抗原。
b 測(cè)試板
iii 混勻后10分鐘內(nèi),吸取100μL稀釋的病人樣本和對(duì)照,分別加入測(cè)試板相應(yīng)的微孔內(nèi)。
iv 蓋上測(cè)試板,在37 oC±1 oC孵育1小時(shí)。
v 用稀釋的洗滌緩沖液沖洗6次。(參見(jiàn)下面的沖洗步驟)
vi 混勻抗原和MAb示蹤劑。吸取100 μL混勻物,加入測(cè)試板相應(yīng)的孔內(nèi)。
vii 蓋上測(cè)試板,在37 oC±1 oC孵育1小時(shí)。
viii 用稀釋的洗滌緩沖液沖洗6次。(參見(jiàn)下面的沖洗步驟)
ix 在每個(gè)孔內(nèi)加入100 μLTMB。
x 從*次加入算起,在室溫下20-25 oC培育10分鐘。藍(lán)色將會(huì)出現(xiàn)。
xi 按TMB加入的時(shí)間和順序,在所有的孔內(nèi)加入100 μL終止液?;靹颉K{(lán)色將會(huì)變成黃色。
xii 30分鐘內(nèi)讀數(shù),波長(zhǎng)450nm,參照濾波器600~650nm。
注意:如果是雙波長(zhǎng)分光光度計(jì),在600~650nm間設(shè)定參照濾波。如果在450nm讀數(shù)沒(méi)有參照濾波時(shí),可能會(huì)由于背景因素出現(xiàn)更高的吸光值。
沖洗步驟:
有效的沖洗能去除沒(méi)有混合的樣品或成分,這對(duì)于ELISA程序是很有必要。
A. 全自動(dòng)沖洗板
1 吸光所有孔內(nèi)容物。
2 在沖洗過(guò)程中,洗滌緩沖液要注滿孔(350 μL)
3 6次沖洗完后,把板翻轉(zhuǎn),在吸水紙上用力敲打確保去除所有的沖洗緩沖液。
4 全自動(dòng)沖洗板一定要維護(hù)好,確保沖洗效果。在所有時(shí)間內(nèi)都要遵照制造商的沖洗說(shuō)明。
B. 人工沖洗
1 把內(nèi)容物倒入合適的廢物缸。
2 用一個(gè)合適的擠壓瓶把洗滌緩沖液加滿孔,避免起泡,因?yàn)檫@可能會(huì)降低沖洗效果。立即倒掉緩沖液。
3 重新加滿,再立即倒掉。
4 再重復(fù)4次步驟3。總共用洗滌緩沖液洗6次。
5 洗完zui后一次后,倒掉孔內(nèi)容物,把板翻轉(zhuǎn),在吸水紙上用力敲打確保去除所有的沖洗緩沖液。
質(zhì)量控制:
每個(gè)試劑盒包括標(biāo)準(zhǔn)物,陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照血清。
在隨附的說(shuō)明表列有這些血清合適值。那陰性和陽(yáng)性對(duì)照是用來(lái)監(jiān)測(cè)由試劑引起的失敗。陽(yáng)性對(duì)照不能確保試驗(yàn)臨界點(diǎn)的精確度。如果對(duì)照或標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值沒(méi)有達(dá)到說(shuō)明書(shū)標(biāo)準(zhǔn),則測(cè)試無(wú)效,就應(yīng)該重做。如果測(cè)試無(wú)效,病人結(jié)果就不能報(bào)告。質(zhì)量控制需要必須遵照當(dāng)?shù)氐?、州?或國(guó)家法律或委任書(shū)和你們實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量程序。
建議用戶參照NCLSI C24-A和42 CFR 493.1202c中的合適的質(zhì)量控制實(shí)踐指導(dǎo)。
計(jì)算:
重要提示:校準(zhǔn)系數(shù)是一組特性,詳細(xì)列在說(shuō)明書(shū)上了。在開(kāi)始計(jì)算前,得到校準(zhǔn)系數(shù)值。
1 計(jì)算三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物的平均吸光度值,然后和校準(zhǔn)系數(shù)相乘。這就是臨界值。
2 樣品的吸光度除以臨界值就得到指數(shù)值。
或者
3 指數(shù)值乘以10就得到Panbio 單位。
指數(shù)值=樣品的吸光度/臨界值
例如:樣品A的吸光度=0.949
樣品B的吸光度=0.070
標(biāo)準(zhǔn)物的平均吸光度=0.802
校準(zhǔn)系數(shù)=0.62
臨界值=0.802 X 0.62=0.497
樣品A 0.949/0.497=1.91 指數(shù)值
樣品B 0.070/0.497=0.14 指數(shù)值
Panbio 單位=指數(shù)值 X 10
樣品A 1.91 X 10 = 19.1 Panbio 單位
樣品B 0.14 X 10 = 1.4 Panbio 單位
結(jié)果解釋:
通過(guò)來(lái)自東南亞/南美和澳大利亞Queensland的人口數(shù)據(jù)得到臨界值。這其中包括有208個(gè)有特性的陰性,91個(gè)陽(yáng)性和110個(gè)病例對(duì)照樣本。通過(guò)二圖接受器操作特性分析得到臨界值。選擇1.0的臨界比例是基于靈敏性和特異性的*F值。
登革熱感染的診斷:登革熱IgM捕獲ELISA法檢定病人血清中IgM抗體水平。陽(yáng)性結(jié)果(> 11 Panbio 單位)表明急性初次或二次登革熱感染。如果要區(qū)分是初次還是二次感染,就應(yīng)該用到登革熱Duo ELISA法。
指數(shù) | Panbio 單位 | 結(jié)果 |
<0.9 | <9 | 陰性 |
0.9–1.1 | 9–11 | 可疑 |
>1.1 | >11 | 陽(yáng)性 |
結(jié)果 | 解釋 |
陰性 | 沒(méi)有檢測(cè)到IgM抗體。這結(jié)果不能排除登革熱感染。如果懷疑有早期感染,就應(yīng)該在7~14天內(nèi)對(duì)另外的樣品進(jìn)行檢測(cè)。其它登革熱測(cè)試方法也應(yīng)用來(lái)排除急性感染。 |
可疑 | 可疑樣品應(yīng)重復(fù)檢測(cè)。重復(fù)檢測(cè)后如果結(jié)果還是可疑,就應(yīng)用另外的方法來(lái)測(cè)試,或采集另一個(gè)樣品。 |
陽(yáng)性 | 檢測(cè)到IgM抗體的存在。應(yīng)用其它登革熱血清學(xué)方法來(lái)證實(shí)登革熱感染。 |
下面推薦一種報(bào)道結(jié)果的方法:由Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法得出下列結(jié)果。不同方法得出的結(jié)果不能互換。測(cè)量結(jié)果超出臨界值不表示現(xiàn)有抗體總量。結(jié)果應(yīng)該報(bào)告為陽(yáng)性、陰性或可疑,而不能報(bào)數(shù)值。
測(cè)試的局限性:
1. 臨床診斷必須根據(jù)臨床癥狀和病人體征來(lái)解釋。從試劑得來(lái)的結(jié)果不是診斷性的。應(yīng)該結(jié)合臨床數(shù)據(jù)和病人癥狀來(lái)考慮。
2. 在不同的地理區(qū)域,人群血清流行病學(xué)可能會(huì)隨著時(shí)間的改變而變化。因此,那臨界值可能需要根據(jù)當(dāng)?shù)氐难芯窟M(jìn)行調(diào)整。
3. 不能用來(lái)做一般人群的篩查。陽(yáng)性預(yù)值依賴于現(xiàn)存在病毒的可能性。只能對(duì)有臨床癥狀的病人進(jìn)行測(cè)試,或者有可疑暴露時(shí)。
4. 和黃病毒屬出現(xiàn)血清學(xué)交叉反應(yīng)是常見(jiàn)的事(即在登革熱1,2,3,4型和墨累山谷腦炎病毒,日本腦炎病毒,黃熱病病毒,西尼羅河病毒等之間)。在確診前必須排除這些疾病。
5. 免疫測(cè)定中的嗜異染抗體是一種很好識(shí)別的干擾原因。這些動(dòng)物IgG抗體可能會(huì)與試劑IgG抗體交叉反應(yīng)并產(chǎn)生假陽(yáng)性。這在確診前也必須被排除。
6. 沒(méi)有為可視的結(jié)果確定建立表現(xiàn)特征。
7. 這個(gè)測(cè)定利用昆蟲(chóng)表達(dá)蛋白。人類抗-昆蟲(chóng)抗體的交叉反應(yīng)或干擾對(duì)測(cè)定結(jié)果來(lái)說(shuō)是不可知的。
8. 根據(jù)Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法,所有的血清都顯示為一個(gè)陽(yáng)性結(jié)果時(shí),這時(shí)應(yīng)該送交參照實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確定和流行病學(xué)記錄。
9. Panbio登革熱Duo ELISA(E-DEN01D)測(cè)定IgG是zui方便的。它用和IgM ELISA相同的捕獲法。所以測(cè)定IgM和IgG用的是相同的方法和相同的血清稀釋液。另外,Panbio間接IgG ELISA法能和IgM捕獲ELISA法聯(lián)合使用,它的臨界吸光度是急性二次感染的臨界標(biāo)準(zhǔn)值的4倍。IgG Panbio單位也能用來(lái)區(qū)分登革熱初次和二次感染。
期望值:
登革熱初次感染表現(xiàn)為在感染發(fā)作后的3~5天IgM水平很高或是顯著升高,能持續(xù)3~5個(gè)月。二次感染表現(xiàn)為感染發(fā)作后的1~2天特異性IgG的升高,而且大部分病例>70%還伴有IgM的升高。在早期感染和一些二次感染中IgM抗體的可檢測(cè)水平可能很低。一些病人在感染后的頭7~10天可能不會(huì)產(chǎn)生可檢測(cè)到水平的抗體。只要癥狀還存在,我們就建議在*份樣本后的7天對(duì)病人重新進(jìn)行測(cè)試。
性能特征:
作為內(nèi)部研究的一部分,我們用Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法對(duì)255份有特性的血清進(jìn)行了測(cè)試。那血清包括83份地方性的血清陰性樣品,57份初次登革熱感染病人的樣品,以及115份二次登革熱感染病人的樣品。測(cè)試結(jié)果與登革熱的血清狀況進(jìn)行比較以測(cè)定那方法的靈敏性,特異性和一致性。數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。
表1 Panbio ELISA血清學(xué)靈敏性和特異性與登革熱疾病狀況的比較
Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法
登革熱狀況 | 陽(yáng)性 | 可疑* | 陰性 | 總計(jì) |
血清學(xué)IgM陰性(ELISA法) | 0 | 0 | 83 | 83 |
初次感染IgM陽(yáng)性(HAI法) | 41 | 1 | 1 | 43 |
初次感染IgM陽(yáng)性(ELISA法) | 13 | 0 | 1 | 14 |
二次感染IgG陽(yáng)性(HAI法) | 41 | 11 | 14 | 86 |
二次感染IgG陽(yáng)性(ELISA法) | 23 | 0 | 6 | 29 |
總計(jì) | 118 | 12 | 125 | 255 |
95% CI*
血清學(xué)靈敏性(初次感染) = 54/57 = 94.7% 85.4 – 98.9%
血清學(xué)靈敏性(二次感染) = 64/115 = 55.7% 46.6 – 64.7%
血清學(xué)特異性(血清陰性) = 83/83 = 100% 95.7 – 100%
血清學(xué)一致性 = 137/140 = 97.9% 93.7 – 99.6%
(排除了二次感染血清)
a可疑樣本的重測(cè)試沒(méi)有計(jì)算在內(nèi),因?yàn)槟切颖臼菬o(wú)效的。
*CI=可疑區(qū)間
重現(xiàn)性
為了測(cè)定Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法試劑盒的重現(xiàn)性,我們用3個(gè)批號(hào)的試劑盒在不同的3天對(duì)7份血清每份進(jìn)行了3次測(cè)試。用方差分析對(duì)組內(nèi),日間,組間和總的精密度進(jìn)行了分析。結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法精密度測(cè)定(用指數(shù)值*)
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| 組內(nèi) | 日間 | 組間 | 總計(jì) |
樣品 | 數(shù)量 | 均值* | *SD CV | *SD CV | *SD CV | *SD CV |
陽(yáng)性 臨界 陰性 #1 #2 #3 #4 #5 #6 #7 | 27 27 27 27 27 27 27 27 27 27 | 2.87 1.00 0.36 6.19 5.91 1.25 1.33 1.30 0.71 0.81 | 0.12 4.3% 0.06 5.7% 0.06 16.7% 0.31 5.1% 0.21 3.6% 0.05 4.1% 0.07 5.4% 0.08 6.1% 0.04 6.0% 0.06 7.7% | 0.05 1.7% 0.00 0.0% 0.00 0.0% 0.12 1.9% 0.11 1.9% 0.00 0.0% 0.03 1.9% 0.00 0.0% 0.00 0.0% 0.00 0.0% | 0.62 21.6% 0.00 0.0% 0.16 45.2% 0.41 6.7% 0.52 8.8% 0.10 7.9% 0.07 5.4% 0.12 9.3% 0.01 1.7% 0.00 0.0% | 0.53 18.6% 0.05 5.3% 0.15 41.0% 0.48 7.7% 0.49 8.3% 0.10 7.7% 0.10 7.2% 0.13 9.8% 0.04 6.0% 0.06 7.3% |
所有的值都是從指數(shù)值計(jì)算得來(lái)的
SD=標(biāo)準(zhǔn)差; CV=變異系數(shù)
注意:由于列表原因,標(biāo)準(zhǔn)差結(jié)果保留兩位小數(shù)
*樣品吸光度除以臨界值得到指數(shù)值。
交叉反應(yīng)性:
通過(guò)測(cè)試一組115份來(lái)自其它確診病人(非登革熱)的樣品來(lái)測(cè)定Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法的診斷特異性。那樣品來(lái)自于患有可能存在交叉反應(yīng)疾病的病人。測(cè)試中的每份樣品的Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法分析都要服從于其疾病診斷。在疾病組中,zui小的交叉反應(yīng)見(jiàn)于瘧疾,西尼河病毒和類風(fēng)濕因子樣品。結(jié)果參見(jiàn)表3。
表3 Panbio登革熱IgM捕獲ELISA法-交叉反應(yīng)分析
僅供研究,不作臨床診斷!
PANBIO登革熱IgM 捕獲ELISA法