詳細(xì)介紹
河豚毒素檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
本測(cè)試盒用直接競(jìng)爭(zhēng)免疫分析法定量測(cè)定河豚魚(yú)中的河豚毒素(TTX)。該測(cè)試盒反應(yīng)孔可拆卸,可測(cè)單份樣品,也可測(cè)多份樣品。定量分析時(shí)需有含450nm波長(zhǎng)的微孔板酶標(biāo)儀。
1.概要
河豚魚(yú)是近海底棲居的肉食性有毒海產(chǎn)魚(yú)類(lèi),其內(nèi)臟有劇毒。其毒性物質(zhì)主要是河豚毒素,河豚毒素是一種劇烈的神經(jīng)毒素,其性質(zhì)穩(wěn)定,加熱、鹽腌及高溫烹煮均不能使其破壞,其毒性比氰化鈉大1000倍。因誤食或食用加工不當(dāng)?shù)暮与圄~(yú)而發(fā)生人畜中毒的事件每年都有發(fā)生。故準(zhǔn)確檢測(cè)河豚魚(yú)中的河豚毒素對(duì)預(yù)防和控制河豚毒素中毒,具有重要意義。本檢測(cè)方法具有靈敏、快速、簡(jiǎn)便、特異性好、取樣量小、不破壞魚(yú)體結(jié)構(gòu),并可同時(shí)檢測(cè)大量樣品等優(yōu)點(diǎn)。
2 測(cè)定原理
本測(cè)試盒利用固相酶聯(lián)免疫吸附原理,采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法進(jìn)行測(cè)定。用抗原包被微孔板,加入河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、抗河豚毒素酶標(biāo)單克隆抗體進(jìn)行免疫反應(yīng)后,加入底物顯色,終止液終止后,用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定OD值。
3 提供的物品
微孔板
5個(gè)濃度的TTX標(biāo)準(zhǔn)溶液(各1mL)
標(biāo)準(zhǔn)1:0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)2:5.0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)3:20.0ng/mL ………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)4:50.0ng/mL ………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)5:200.0ng/mL ………………………………………………………直接使用
抗TTX抗體溶液(6mL) ………………………………………………………直接使用
顯色液(12mL) …………………………………………………………………直接使用
終止液(6mL) ………………………………………………………………………直接使用
濃縮洗液(30mL) …………………………………………………………………稀釋使用
4 盒中未提供,需自備物品
微孔板酶標(biāo)儀(含450nm)、振蕩器、粉碎機(jī)、微量移液器
量筒、漏斗、容量瓶、快速定性濾紙
乙酸、甲醇(分析純)、去離子水或蒸餾水
5 操作者注意事項(xiàng)
標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有TTX毒素,應(yīng)特別小心。
終止液為1N硫酸,避免接觸皮膚。
每次加樣后立即將所有試劑放回2~8 ℃。
每步加樣時(shí)間應(yīng)控制在5min內(nèi)。
孵育過(guò)程中應(yīng)避光。
不要使用過(guò)期試劑盒。
不要交叉使用不同批號(hào)的試劑盒中的試劑。
6 儲(chǔ)存條件
保存試劑盒于2~8℃。不要冷凍
顯色液對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
將不用的微孔板放進(jìn)原鋁箔袋中,置2~8℃保存。
7 試劑變質(zhì)的標(biāo)志
標(biāo)準(zhǔn)1的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。