詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 梅花PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Flos mume |
貨號 | FS-P99195 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
人結(jié)膜成纖維細(xì)胞微小RNAPancuronium dibromideIL-13(Ierleukin-13) 白介素13抗原
青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺(100X)
Penicillin-Streptomycin-Glutamine人無色素睫狀上皮細(xì)胞微小RNA2,4-二氟甲IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原
青霉素-鏈霉素-新霉素(100X)
PSN aibiotic mixture人小梁網(wǎng)細(xì)胞微小RNA2,4-二氟甲IL-15(Ierleukin-15) 白細(xì)胞介素-15抗原
胰酶,Trpsin,0.25%人羊膜上皮細(xì)胞微小RNA十二烷基三基溴化膦IL-16(Ierleukin-16) 白介素16抗原
人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞微小RNA十二烷基三基溴化膦IL-16/LCF(ierleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細(xì)胞介素-16抗原
胰酶,Trpsin,2.5%(10X)人絨毛間葉成纖維細(xì)胞微小RNAPlerixafor 8HCl (AP92100 8HCl)IL-17(Ierleukin-17) 白介素-17抗原
胰酶-EDTA,
0.05%胰酶,EDTA。4Na人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟微小RNA順,順-1,5-環(huán)辛二烯, 99%, 50-200ppm Irganox 1076穩(wěn)定劑IL-17(Ierleukin-17)human 白介素-17抗原(人)
人前脂肪細(xì)胞-皮下微小RNA利托那韋IL-18/IGIF(Ierleukin-18) 白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子
LRP/MVP /FITC 熒光素標(biāo)記肺耐藥相關(guān)蛋白IgG7型膠原5-溴-2,4-二氯嘧啶Porcine ADCY3 (Adenylate Cyclase 3) 檢測試劑盒
LRP1/CD91/FITC 熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白相關(guān)受體1IgG磷酸化β 連環(huán)素蛋白5-溴-2,4-二氯嘧啶Porcine PGD2S (Prostaglandin D2 Syhase, Brain) 檢測試劑盒
Phospho-LRP6 (Ser1490) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6IgG原癌蛋白CBL24-乙?;姿峒柞orcine MMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) 檢測試劑盒
LRP6/FITC 熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6IgG信號調(diào)節(jié)蛋白α4-乙?;姿峒柞orcine CAM-Ab (Ai-Calmodulin Specific Aibody) 檢測試劑盒
LRRC4/FITC 熒光素標(biāo)記腦瘤相關(guān)基因IgG信號淋巴細(xì)胞活化分子CD150N-芐基哌啶酮Porcine MN (Metanephrine) 檢測試劑盒
LRRK2 /FITC 熒光素標(biāo)記富亮氨酸重復(fù)激酶2IgG巨噬細(xì)胞炎性蛋白16N-芐基哌啶酮Porcine FTL (Ferritin, Light Polypeptide) 檢測試劑盒
LTB4/Leukotriene B4/FITC 熒光素標(biāo)記白三烯B4IgG果蠅CG6856-PAN-芐基哌啶酮Porcine H-Cadherin (Cadherin, Heart) 檢測試劑盒
LTB4-R1/LTB4R/FITC 熒光素標(biāo)記白三烯B4受體1IgG細(xì)胞色素c氧化酶COX7A2基順酐Porcine OLAb (Ai-Oxidized Low Density Lipoprotein Aibody) 檢測試劑盒
梅花PCR鑒定試劑盒甲鈷胺GAD1 Antibody
右旋酮洛芬氨丁三mNeonGreen Tag Antibody
右旋酮洛芬氨丁三(標(biāo)準(zhǔn)品)AMPA Receptor 2 (GluA2) (D39F2) Rabbit mAb
溴酚蘭,溴二甲苯酚藍(lán) AMPA Receptor 2 (GluA2) (D39F2) Rabbit mAb
植物凝膠(Sigma)GAP43 Antibody
右旋酮洛芬SNAP25 (D7B4) Rabbit mAb
二苯基碳酰二肼(二苯胺基脲)SNAP25 (D9A12) Rabbit mAb
5-磺基水楊酸Semaphorin-4D/CD100 (E5C3B) XP® Rabbit mAb
1-氨基-2-萘酚-4-磺酸Semaphorin-4D/CD100 (E5C3B) XP® Rabbit mAb
利卡西平;10,11-二氫-10-羥基卡馬西平PTP1B Antibody