詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 海螵蛸探針法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Endoconcha sepiae |
貨號(hào) | FS-P99155 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
Membrane-fiter Eerococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLE人無色素睫狀上皮細(xì)胞裂解物雙()二氯鉑(II), Pt minCCR-7(CC chemokine receptor 7) CC趨化因子受體7(多肽)
膜過濾腸球菌選擇瓊脂人小梁網(wǎng)細(xì)胞裂解物二羰基乙酰酮銠(I)CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原
Esculin bile agar 七葉苷膽鹽瓊脂人羊膜上皮細(xì)胞裂解物三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鈷(III) (metals basis)VEGF(Vascular endothelial growth factor) 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(多肽抗原)
Thioglycolate medium G 疏基鹽培養(yǎng)基G人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞裂解物鹽酸伊伐布雷定CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase) CD10抗原
Fluid thilglycolate medium 疏基鹽培養(yǎng)基人絨毛間葉成纖維細(xì)胞裂解物Fmoc-哌啶-4-甲酸ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1) ZCWCC1抗原
FRASER Listeria Selective Enrichme Broth( base)人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟裂解物環(huán)烷甲CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原
弗雷澤李斯特菌選擇富集肉湯(基礎(chǔ))人前脂肪細(xì)胞-皮下裂解物環(huán)烷甲CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原
FRASER Listeria Selective Suppleme 弗雷澤李斯特菌選擇添加劑人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓裂解物三氟磺酸鋱(III)水合物CD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原
human IFN- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記干擾素-α(抗人)IgGCD2結(jié)合蛋白3亞硝酰硝酸釕(III)溶液Rat TFR2 (Transferrin Receptor Protein 2) 檢測(cè)試劑盒
IFN- Beta/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素-βIgG膠原三股螺旋重復(fù)蛋白12-氯-5-氟Rat TFR (Transferrin Receptor) 檢測(cè)試劑盒
IFN- Beta/FITC 熒光素標(biāo)記抗人干擾素-β抗IgG20號(hào)染色體開放閱讀框722-氯-5-氟Rat IL-24 (Ierleukin 24) 檢測(cè)試劑盒
IFN- Gamma/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素-γIgG2號(hào)染色體開放閱讀框61-壬炔Rat TGF-βR (Transforming Growth Factor Receptor) 檢測(cè)試劑盒
IFN- Gamma/FITC(Ierferon Gamma) 熒光素標(biāo)記抗大、小鼠IFN-γ抗IgGCD3186-甲氧基-2-萘甲R(shí)at TGF-α (Transforming Growth Factor Alpha) 檢測(cè)試劑盒
IFNGR2/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素-gamma受體2IgG著絲粒蛋白B6-甲氧基-2-萘甲R(shí)at GP4/CD36 (Plaet Membrane Glycoprotein IV) 檢測(cè)試劑盒
IFN- Gamma/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠抗人干擾素-γ/IFN-gamma單克隆IgG1號(hào)染色體開放閱讀框1116-甲氧基-2-萘甲R(shí)at TGF-β2 (Transforming Growth Factor Beta 2) 檢測(cè)試劑盒
IFNGR1/CD119/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素-gamma受體IgG19號(hào)染色體開放閱讀框80甲基烯酸糠酯Rat TGF-β3 (Transforming Growth Factor Beta 3) 檢測(cè)試劑盒
海螵蛸探針法PCR鑒定試劑盒固紅BPhospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb
固紅TR半氯化鋅鹽PI4 Kinase Antibody
固紅-萘磺酸 TRNanog (D73G4) XP® Rabbit mAb
麗春紅SNanog (D73G4) XP® Rabbit mAb
苯酚紅Stat3 (79D7) Rabbit mAb
環(huán)貝特Stat3 (79D7) Rabbit mAb
曙紅Y(水溶)Ezh2 Antibody
偶氮胭脂紅BLAMP2 (D5C2P) Rabbit mAb
偶氮胭脂紅GHamartin/TSC1 Antibody
熒光桃紅B,酸性紅92Phospho-Stat3 (Ser727) (D8C2Z) Rabbit mAb (Biotinylated)