詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 百合染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Bulbus lilii |
貨號(hào) | FS-P99082 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
EEF1A2 aibody50-53kdQ05639Human, Mouse, Rat資源名稱油菜葉桿菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
EEF1B2 aibody33 kDaP24534Human, Mouse, Rat資源名稱亨氏柄桿菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
EEF1B2 aibody34 kDa P24534Human, Mouse, Rat資源名稱腐殖質(zhì)類芽孢桿菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
EEF1B2 aibody32 kDa P24534Human資源名稱中間蒼白桿菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
EEF1D aibody38 kDaP29692Human, Mouse, Rat資源名稱解聚糖類芽孢桿菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
EEF1D aibody40 kDa P29692Human, Mouse 資源名稱固氮鞘氨醇單胞菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
EEF1D aibody40 kDa P29692Human, Mouse 資源名稱光村短波單胞菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
產(chǎn)朊假絲酵母CAS號(hào):148080-7英文名字:Quartzsand分子式:SiO2分子量:60.08物理性狀及指標(biāo):
紅法夫酵母CAS號(hào):13381英文名字:Span*60分子式:C24H46O6分子量:430.62物理性狀及指標(biāo):
阿舒多囊霉CAS號(hào):108-19-0英文名字:Biuret分子式:C2H5N3O2分子量:103.08物理性狀及指標(biāo):
型溶血性鏈球菌CAS號(hào):574547英文名字:Cobalt(II)carbonate,hydrate分子式:CoCO3.H2O分子量:136.96物理性狀及指標(biāo):
奇異變形桿菌CAS號(hào):554-13-2英文名字:Lithiumcarbonate分子式:Li2CO3分子量:73.89性狀:白色粉末。輕質(zhì)。有堿性。1G溶于78ml冷水和140ml沸水,溶于稀,幾乎不溶于醇。相對(duì)密度2.11。熔點(diǎn)618℃。沸點(diǎn)735℃。低,半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)0.71G/kG。有刺激性。
百合染料法PCR鑒定試劑盒D-山梨Fer (5D2) Mouse mAbHPV18 E6 monoclonal 人類狀瘤病毒18 E6單克隆抗體
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)Ron (1B5) Mouse mAbHPV18 E6 人類狀瘤病毒18 E6抗體
L-核糖Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) AntibodyHPV16-E7 人類狀瘤病毒16-E7抗體
L-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)THEM2 AntibodyHPV16-E7 人類狀瘤病毒16-E7抗體
2-脫氧-L-核糖WASP (D9C8) Rabbit mAbHPV16-E6 人類狀瘤病毒16抗體
4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷Cytochrome c AntibodyHPV16 L2 人瘤病毒16型L2抗體
2-脫氧-D-核糖Cytochrome c AntibodyHPV16 E7 protein 人瘤病毒16型E7抗體
D-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb (PE Conjugate)HPV16 E6 + HPV18 E6 人類狀瘤病毒16/18 E6抗體
D-半乳糖ATP2A1/SERCA1 (A988) AntibodyHpt/Haptoglobin 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體
鹽酸肼;雙鹽酸肼Granzyme B Antibody