詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 凌霄花染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Flos campsis |
貨號(hào) | FS-P99169 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
SIM medium SIM培養(yǎng)基人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟cDNA瑞替加濱cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原
SIMMONS citrate agar simmons檸檬酸鹽瓊脂人前脂肪細(xì)胞-皮下cDNAN-Alpha-T-Butyloxycarbonyl-N-Gamma-(9-Fluorenylmethyloxycarbonyl)-L-OrnithineCX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原
Sodium-chloride peptone broth(buffered) 蛋白胨肉湯(緩沖)人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAN-Alpha-T-Butyloxycarbonyl-N-Gamma-(9-Fluorenylmethyloxycarbonyl)-L-OrnithineCyclin A 周期素A抗原
Sorbitol-MacCONKEY agar(SMAC agar)SMAC瓊脂/山梨麥康凱瓊脂人間充質(zhì)干細(xì)胞(脂肪)cDNA對(duì)叔丁基磺酰氯Cyclin B1 周期素B1抗原
SPS agar ANGELOTTI perfringens selective agar SPS瓊脂/ANGELOTTI人間充質(zhì)干細(xì)胞(肝臟)cDNA對(duì)叔丁基磺酰氯Cyclin D2 周期素D2抗原
產(chǎn)氣莢膜菌選擇瓊脂梭人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞cDNA托品酰胺Cyclin D3(C-term) 周期素D3抗原
SS agar Salmonella-Shigella agar SS瓊脂/沙門氏菌-志賀氏菌瓊脂人肺間充質(zhì)干細(xì)胞cDNA托品酰胺CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 細(xì)胞色素P450 3A4抗原
SSDC agar(Salmonella-Shigella agar with sodium dexoycholate and calcium chloride) SSDC 瓊脂/沙門氏菌-志賀氏菌瓊脂(含脫氧膽鹽氯化鈣)上皮細(xì)胞cDNA鹽酸替羅非班Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗原
IL-28B/IL-28C/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素28BIgG9號(hào)染色體開放閱讀框86間三氟乙酮Rat Aβ40 (Amyloid Beta 40) 檢測(cè)試劑盒
IL-29/IFNL1/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素29IgG鈣粘附分子18間三氟乙酮Rat Aβ42 (Amyloid Beta 42) 檢測(cè)試劑盒
IL-31/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素31IgGCD2765-氯-2-磺酰氯Rat CYP7A1 (Cholesterol 7-Alpha-Hydroxylase) 檢測(cè)試劑盒
IL-31RA/CRL3/FITC 熒光素標(biāo)記白介素31受體aIgG21號(hào)染色體開放閱讀框257-甲氧基-1-茚酮Rat α-CTx (Alpha Crosslaps) 檢測(cè)試劑盒
IL-32/NK4/FITC 熒光素標(biāo)記白介素32IgG22號(hào)染色體開放閱讀框364-(三氟甲基)芐Rat β-CTx (Beta Crosslaps) 檢測(cè)試劑盒
IL-33/NFHEV/FITC 熒光素標(biāo)記白介素33IgG補(bǔ)體組分1q子成分樣蛋白14-(三氟甲基)芐Rat GALR1 (Galanin Receptor1) 檢測(cè)試劑盒
IL-33/FITC 熒光素標(biāo)記白介素33IgGCD444-(三氟甲基)芐Rat GALR2 (Galanin Receptor2) 檢測(cè)試劑盒
ILK-1/FITC 熒光素標(biāo)記整合素連接激酶-1IgG9號(hào)染色體開放閱讀框1143-氟-4-羥基甲酸Rat GALR3 (Galanin Receptor3) 檢測(cè)試劑盒
凌霄花染料法PCR鑒定試劑盒β-萘酚,異萘酚MEF2C (D80C1) XP® Rabbit mAb
3-氨基酚MEF2C (D80C1) XP® Rabbit mAb
鄰苯二酚EPLIN (D1A7A) Rabbit mAb
間苯二酚Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)
對(duì)叔丁基鄰苯二酚Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb
4-(2-噻唑基偶氮)間苯二酚Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb
鈷試劑(1-亞硝基-2-萘酚)DNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb
氯磺酚SDNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb
三苯酚ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb
1-萘酚ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb