詳細介紹
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 石韋探針法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Folium pyrrosiae |
貨號 | FS-P99228 |
優(yōu)點:
(1)操作簡單,LAMP核酸擴增是在等溫條件下進行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因為不需要預(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴增至109倍,達0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達到實時定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設(shè)計的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進行核酸擴增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴增模板可達幾個拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
GBS 瓊脂基礎(chǔ) (Islam) (CM0755)刺五加皂苷B3,5-二溴甲SOD1(superoxide-dimutase-1) 超氧化物歧化酶1抗原
Raka Ray 瓊脂基礎(chǔ)(CM0777)紫丁香酚甙(刺五加甙B)3,5-二溴甲SOD2 (superoxide-dimutase-2) 超氧化物歧化酶2抗原
GAPDH(3E12) 3-磷酸甘油脫氫酶單克隆(內(nèi)參)刺五加甙E4,5-雙(二基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽Somatostatin/GRIH 生長抑素抗原
GAPDH 兔抗3-磷酸甘油脫氫酶單克隆(內(nèi)參)竹節(jié)香附素A4,5-雙(二基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽Sox2 胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白
Beta-Actin β-肌動蛋白(內(nèi)參)注:(刺五加葉中)4,5-雙(二基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽TSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原
14-3-3 14-3-3蛋白柴胡皂苷A4--3-三氟SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗原
phospho-14-3-3 (Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ柴胡皂苷C5-甲氧基-2-胺(易制爆)SRF(Serum response factor) 血清應(yīng)答因子抗原
14-3-3 family protein 蘋果14-3-3蛋白(植物)柴胡皂苷D5-甲氧基-2-胺(易制爆)SREBP-1(Sterol Regulatory Eleme Binding Protein-1) 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗原
磷酸化β 連環(huán)素蛋白(R)-(+)-1,2-環(huán)氧丁烷Porcine MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) 檢測試劑盒
葉綠體蛋白酶(植物)己基溴化鎂溶液Porcine REG1β (Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta) 檢測試劑盒
磷酸化后期促進復(fù)合蛋白34-吡唑甲酸乙酯Porcine TAP (Trypsinogen Activation Peptide) 檢測試劑盒
磷酸化絲切蛋白4-吡唑甲酸乙酯Porcine ACA-IgG (Ai-Cardiolipin Aibody IgG) 檢測試劑盒
磷酸化絲切蛋白4-吡唑甲酸乙酯Porcine AGA (Ai-Glycolipid Aibody) 檢測試劑盒
磷酸化細胞周期檢測點激酶22,4,6-三氯嘧啶Porcine PAH (Phenylalanine Hydroxylase) 檢測試劑盒
磷酸化細胞分裂周期蛋白252,4,6-三氯嘧啶Porcine DNM1 (Dynamin 1) 檢測試劑盒
磷酸化細胞分裂周期蛋白252,4,6-三氯嘧啶Porcine TAGLN (Transgelin) 檢測試劑盒
石韋探針法PCR鑒定試劑盒星孢菌素mGluR5 (D6E7B) Rabbit mAb
苯唑西林鈉CD4 (RPA-T4) Mouse mAb (PE Conjugate)
苯唑西林鈉(標準品)SH3BP4 (D3D9I) Rabbit mAb
維E煙酸酯(標準品)Troponin T (Cardiac) Antibody
偶氮NADK Antibody
(R)-1-氨基-3-甲基丁基酸蒎烷二酯鹽酸鹽 SGK2 Antibody
熒光素-5-馬來酰亞胺Anti-biotin (D5A7) Rabbit mAb
Veliparib (ABT-888)Syndecan 1 (D4Y7H) Rabbit mAb (PE Conjugate)
萘夫西林鈉Phospho-SGK1 (Ser78) (D36D11) Rabbit mAb
萘夫西林鈉(標準品)hnRNP A0 (D26A2) Rabbit mAb