詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 荷葉PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Folium nelumbinis |
貨號(hào) | FS-P99220 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
MRS 肉湯 (CM0359)川楝素3-溴咔唑Pokemon (POK Erythroid Myeloid Oogenic factor) “蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白
MRS 瓊脂 (CM0361)川芎3-溴咔唑Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊腎蛋白1抗原
GC 瓊脂基礎(chǔ) (CM0367)鹽酸川芎Everolimus (RAD001)Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊腎蛋白2
腦心浸出液瓊脂 (CM0375)異鼠李素2-(Boc-Amino)-5-Bromopyridinephospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 磷酸化蛋白激酶B抗原(絲氨酸磷酸化位點(diǎn):473)
Slanetz and Bartley 培養(yǎng)基 (腸球菌瓊脂) (CM0377)D-(+)-木糖銠(II)二聚體RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗原
賴氨酸鐵瓊脂 (CM0381)積雪草苷銠(II)二聚體pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病pre-X蛋白抗原(N端)
巰基醋酸鹽肉湯 (另一USP配方) (CM0391)羥基積雪草苷3-(三氟甲氧基)甲酰溴pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病pre-X蛋白抗原(C端)
D.C.L.S. 瓊脂 (脫氧膽酸鹽乳糖蔗糖) (CM0393)積雪草酸2-氟-3-氨基吡啶PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) 脯氨酸羥化酶(多肽)
碳酸酐酶12三氟磺酸亞銅(I)聯(lián)合體 (2:1)Porcine MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) 檢測(cè)試劑盒
泛素載體蛋白R23,5-DifluoroanilinePorcine GDF6 (Growth Differeiation Factor 6) 檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞粘附分子33,5-DifluoroanilinePorcine LRP6 (Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein) 檢測(cè)試劑盒
整合素相關(guān)蛋白CD473,5-DifluoroanilinePorcine ApoM (Apolipoprotein M) 檢測(cè)試劑盒
磷酸化細(xì)胞角蛋白82-甲硫基甲酸Porcine TR (Thrombin Receptor) 檢測(cè)試劑盒
鈣結(jié)合蛋白D28K3-氟吡啶Porcine ASPN (Asporin) 檢測(cè)試劑盒
磷酸化接頭蛋白CrkL3-氟吡啶Porcine UGT2B4 (Uridine Dipho-sphate Glucuronosyltransferase 2 Family Polypeptide B4) 檢測(cè)試劑盒
磷酸化接頭蛋白CrkL3-氟吡啶Porcine SERT (Serotonin Transporter ) 檢測(cè)試劑盒
荷葉PCR鑒定試劑盒無活菌素SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers
曲古柳菌素AJIP4/SPAG9 (D72F4) XP® Rabbit mAb
達(dá)非那新14-3-3 η (D23B7) Rabbit mAb
達(dá)非那新(標(biāo)準(zhǔn)品)14-3-3 η (D23B7) Rabbit mAb
羅布麻寧;夾竹桃麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)14-3-3 γ (D15B7) Rabbit mAb
羅布麻寧;夾竹桃麻素DUSP16/MKP7 (D5F4) Rabbit mAb
虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆苷PITSLRE/CDK11 (D88B3) Rabbit mAb
虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
十八烷,1-十八(標(biāo)準(zhǔn)品)PIP4K2A (D83C1) Rabbit mAb
十八烷,1-十八NRCAM Antibody