詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 絡(luò)石藤探針法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Caulis trachelospermi |
貨號(hào) | FS-P99110 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
LB瓊脂人肺間充質(zhì)干細(xì)胞腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞ABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原
玉米粉瓊脂培養(yǎng)基人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TFPI/LACI 組織因子途徑抑制劑
高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基人微血管內(nèi)皮細(xì)胞腎小管上皮細(xì)胞GLUT12 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12
L型細(xì)菌高滲糖增菌培養(yǎng)基人上皮細(xì)胞腎小球內(nèi)皮細(xì)胞EGFRvIII 表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗原
L型細(xì)菌高滲鹽增菌培養(yǎng)基人成纖維細(xì)胞子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞CD26 CD26抗原
疊氮鈉葡萄糖肉湯人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞卵巢顆粒細(xì)胞ABCG1 peptide 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原
乙基紫疊氮鈉肉湯人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞Cardiac Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基人臍靜脈平滑肌細(xì)胞淋巴成纖維細(xì)胞BACE( ASP2 ) β分泌酶(抗原)
Fibulin 1/FITC 熒光素標(biāo)記抗“衰老關(guān)鍵蛋白”IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白1522-溴-4-(三氟甲基)甲酸Rat MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ(Major Histocompatibility ComplexⅡ) 檢測(cè)試劑盒
Phospho-FHIT (Tyr114) /FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化脆性組氨酸三聯(lián)體IgG甘油二酯膽堿磷酸轉(zhuǎn)移酶2,5-雙(三氟甲基)胺Rat MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ(Major Histocompatibility ComplexⅢ) 檢測(cè)試劑盒
Fibulin-5/FITC 熒光素標(biāo)記抗“衰老關(guān)鍵蛋白”IgG嗜鉻粒素B2,5-雙(三氟甲基)胺Rat RE (Resistin) 檢測(cè)試劑盒
FLG/FITC 熒光素標(biāo)記絲聚蛋白/中間絲蛋白IgG血管加壓素激活鈣啟動(dòng)受體蛋白12,5-雙(三氟甲基)胺Rat CA15-3 (Carbohydrate Aigen 15-3) 檢測(cè)試劑盒
FLIP S/L /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡調(diào)節(jié)基因之一IgG細(xì)胞色素P450Ⅱj3谷氨酸利塞膦酸鹽半五水合物Rat MAT (Matrilysin) 檢測(cè)試劑盒
FLIPS/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡調(diào)節(jié)基因之一(短型)IgG鈣激活氯離子通道4三羥甲基烷*基烯酸酯Rat MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) 檢測(cè)試劑盒
FN /FITC 熒光素標(biāo)記纖維連結(jié)蛋白IgG周期素依賴性激酶6三羥甲基烷*基烯酸酯Rat MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) 檢測(cè)試劑盒
FN/RBITC 紅色熒光素標(biāo)記纖維連接蛋白IgG周期素依賴性激酶73,4,5-TrimethoxybenzhydrazideRat MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) 檢測(cè)試劑盒
絡(luò)石藤探針法PCR鑒定試劑盒L-精氨酸對(duì)硝基酰苯胺二鹽酸Pan-Keratin (C11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
羧甲司坦;S-羧甲基-L-半胱氨酸FMRP (G468) Antibody
S-芐基-L-半胱氨酸Mouse Anti-rabbit IgG (Light-Chain Specific) (D4W3E) mAb
L-谷氨酸鹽酸鹽Phospho-ATM (Ser1981) (10H11.E12) Mouse mAb
L-精氨酰胺Phospho-ATM (Ser1981) (10H11.E12) Mouse mAb
Nω-(4-甲氧基-2,3,6-三磺?;?-L-精氨酸Phospho-ATM (Ser1981) (10H11.E12) Mouse mAb
N'-硝基-L-精氨酸(L-NNA)Pan-Keratin (C11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
Nα-苯甲酰-L-精氨酸MED12 Antibody
L-天冬酰胺,無水物(標(biāo)準(zhǔn)品)Notch2 (D67C8) XP® Rabbit mAb
L-天冬素/L-天冬酰胺Notch2 (D67C8) XP® Rabbit mAb