詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 兒茶PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Catechu |
貨號(hào) | FS-P99090 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
EIF2C1-Specific aibody97 kDa Q9UL18Human, Mouse, Rat資源名稱高溫單孢菌屬分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1
EIF2C3-Specific aibody95 kDa Q9H9G7Human, Mouse, Rat資源名稱假刺孢鏈霉菌提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no
EIF2S1 aibody36 kDa P05198Human, Mouse, Rat資源名稱諾卡氏菌屬菌株分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1
EIF2S2 aibody50 kDa P20042Human, Mouse 資源名稱曲霉屬分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1
EIF2S3 aibody45 kDaP41091Human, Rat資源名稱大腸埃希氏菌DH5α/pET28a-akt1提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
EIF3B aibodyP55884Human, Mouse, Rat資源名稱副流感嗜血桿菌提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):2模式菌株:no
EIF3C aibody105 kDaQ99613Human, Mouse, Rat資源名稱蟾蜍分枝桿菌提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:yes
米根霉CAS 號(hào):V 英文名字:Chloramphenicol solution, 50mg/ml,sterile產(chǎn)品描述霉素(Chloramphenicol)是由David Gottlieb從Streptomyces venezuae分離出來的抑菌性廣譜抗生素,可在肽鍵轉(zhuǎn)移酶催化形成肽鍵的過程中抑制50S核糖體上mRNA的翻譯,從而抑制革蘭氏陰性和革蘭氏陽性細(xì)菌的生長(zhǎng)。此外霉素還具有立克次體屬微生物抗性以及鸚鵡熱-淋巴肉芽腫類衣原體抗性等,因此霉素可用于細(xì)菌篩選。對(duì)霉素酰轉(zhuǎn)移酶基因(即CAT gene)進(jìn)行?;傻种泼顾氐目剐浴;谠撛?,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,霉素可作為一種篩選藥物用于篩選含有霉素抗性基因的轉(zhuǎn)化細(xì)胞。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
淡紫色擬青霉CAS 號(hào):V英文名字:Geamicin sulfate solution,50mg/ml, sterile產(chǎn)品描述慶大霉素(Geamicin)是由中國科學(xué)家王岳發(fā)明,具有很好熱穩(wěn)定的一種氨基糖苷類抗生素。慶大霉素作用原理在于與細(xì)菌核糖體亞基的L6蛋白結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成。臨床上,主要用于治療多種細(xì)菌感染,尤其適用于革蘭氏陰性菌。硫慶大霉素(Geamicin sulfate salt)是一種廣譜氨基糖苷類抗生素,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性細(xì)菌及革蘭氏陽性細(xì)菌具有良好抗菌能力,甚至包括某些β-內(nèi)酰胺敏感的抗萬古霉素(VRE)腸球菌,和耐糖肽抗生素的一些“超級(jí)細(xì)菌”。其抑菌機(jī)理在于通過與細(xì)菌核糖體30S亞基結(jié)合導(dǎo)致密碼子錯(cuò)誤,阻斷肽酰-tRNA從A位點(diǎn)到P位點(diǎn)的轉(zhuǎn)運(yùn),從而抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。
光孢短柄帚霉CAS 號(hào):V英文名字:Carbenicillin solution,sterile產(chǎn)品描述羧芐青霉素溶液是一種β-內(nèi)酰胺類抗生素,干擾肽聚糖的交聯(lián)從而抑制細(xì)胞壁的合成,是廣譜青霉素類抗生素。羧芐青霉素溶液(Carbenicillin, 100mg/ml)經(jīng)過濾除菌,一般工作濃度為50~100μg/ml。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
香蕉炭疽盤長(zhǎng)孢菌CAS 號(hào):V英文名字:Cefotaxime Sodium solution, 100mg/ml,sterile產(chǎn)品描述頭孢噻肟鈉(Cefotaxime sodium)為第三代半合成頭孢菌素,對(duì)革蘭氏陰性菌有強(qiáng)大的殺菌活性,對(duì)大腸桿菌、流感桿菌、肺炎桿菌、奇異變形桿菌、沙門菌屬的抗菌作用較頭孢哌強(qiáng)。頭孢噻肟鈉是一種β-半乳糖苷酶抑制型抗菌素,能抑制肽聚糖的交聯(lián),從而抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成。植物組織培養(yǎng)中用于抑制農(nóng)桿菌。
許旺酵母CAS 號(hào):V英文名字:Ampicillin solution, sterile產(chǎn)品描述氨芐青霉素鈉,英文名為Ampicillinsodiumsalt,分子式為C16H18N3O4SNa,分子量為371.39。細(xì)菌培養(yǎng)常用抗生素,用于配制含氨芐的LB或LB平板等,也可在細(xì)胞培養(yǎng)過程中起到抗菌作用。產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
兒茶PCR鑒定試劑盒乙酰輔酶A三鋰鹽REG4 Antibody
尿素酶,脲酶(巨豆)Rat (LTF-2) mAb IgG2b Isotype Control (PE-Cy7® Conjugate)
蛋白酶VIIIPbx1 Antibody
曲安奈德Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjugate)
曲安奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb (HRP Conjugate)
β-NADH;還原性輔酶I二鈉鹽Phospho-STING (Ser366) (D8K6H) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
蘇拉明鈉Phospho-Syk (Tyr525/526) (C87C1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
彈性蛋白酶Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
脂肪酶Phospho-Mnk1 (Thr197/Thr202) Antibody
木聚糖酶CHD1 (D8C2) Rabbit mAb