詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 香加皮PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Cortex periplocae |
貨號 | FS-P99147 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
BPLS Agar Brillia-green phenol-red-lactose sucrose agar modified人表皮黑色素細(xì)胞-深色素裂解物吲哚-2-羧酸CaMK2b(calcium/calmodulin-depende protein kinase II beita) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原
亮綠酚紅乳糖蔗糖改良瓊脂人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒裂解物1,3-二CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原
Brain-heart broth 腦心肉湯人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒裂解物1,3-二CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原
Brain-heart agar 腦心瓊脂人真皮成纖維細(xì)胞-成人裂解物1,3-二TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長因子–β2前體肽
BRILA broth brillia green-bile-lactcose broth 亮綠乳糖膽鹽肉湯人毛細(xì)胞裂解物Fmoc-O-磷酸基-L-酪氨酸TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長因子–β3(抗原)
BROLAC Agar bromothymol-blue lactose agar 溴百里酚藍(lán)乳糖瓊脂人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞裂解物2-甲氧基-4-(2-氨基乙基)酚TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2(多肽抗原)
BROLACIN Agar(C.L.E.D agar) bromothymol-blue lactose cystine agar人外根殼細(xì)胞裂解物DL-阿拉伯糖Thymosin Alpha-1 胸腺肽 α-1 (胸腺肽-Thymosin alpha-1)
溴百里酚藍(lán)乳糖胱氨酸瓊脂人內(nèi)根殼細(xì)胞裂解物DL-阿拉伯糖Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽)
HLA-E/FITC 熒光素標(biāo)記人類白細(xì)胞抗原EIgG染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)3-氨基-2,6-二甲基吡啶Rat THP (Tamm–Horsfall Glycoprotein) 檢測試劑盒
HLA-G/FITC 熒光素標(biāo)記人類白細(xì)胞抗原G/組織相容性白細(xì)胞抗原GIgG磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl3-氨基-2,6-二甲基吡啶Rat TRACP-5b (Tartrate-Resista Acid Phosphatase 5b) 檢測試劑盒
HMGA1/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A1IgG磷酸化非受體酪氨酸激酶c-AblBOC-L-Α-氨基吲哚丁酸Rat TBP (Tata Binding Protein) 檢測試劑盒
HMGA2/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A2IgG磷酸化非受體酪氨酸激酶c-AblBOC-L-Α-氨基吲哚丁酸Rat TAF1 (Tata Box Binding Protein Associated Factor 1) 檢測試劑盒
HMGB1/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B1IgG酪蛋白激酶1γ24-氯-3-三氟甲Rat TAF4 (Tata Box Binding Protein Associated Factor 2) 檢測試劑盒
HMGB4/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B4IgG柯薩奇病蛋白受體B4-氯-3-三氟甲Rat MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau) 檢測試劑盒
HNF-1 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記肝細(xì)胞核因子1αIgG腫瘤抑制因子FBW73-氯-4-氟甲Rat TXLNA (Taxilin Alpha) 檢測試劑盒
HO-1/HSP32/FITC 熒光素標(biāo)記血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32IgG細(xì)胞粘附分子43-氯-4-氟甲Rat TXLNB (Taxilin Beta) 檢測試劑盒
香加皮PCR鑒定試劑盒Nα-BOC-D-精氨酸鹽酸鹽一水合物RecQL1 (Q1N3) Mouse mAb
Boc-Arg(Mts)-OH·CHAJAKMIP1 Antibody
BOC-硝基-L-精氨酸Cox1 Antibody
N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺酰基 -L-精氨酸 Cox2 Antibody
BOC-對磺酰-D-精氨酸Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰胺COX IV Antibody
BOC-L-天門冬酰胺 4-酯RANK Antibody
N-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基 -L-天門冬酰胺 DOCK180 (C4C12) Rabbit mAb
Boc-L-天冬氨酸 4-芐酯 Mre11 (31H4) Rabbit mAb
Boc-L-天冬氨酸 4-環(huán)己酯 Mre11 (31H4) Rabbit mAb