詳細(xì)介紹
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 首烏藤染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Caulis polygoni multiflori |
貨號 | FS-P99103 |
優(yōu)點:
(1)操作簡單,LAMP核酸擴增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因為不需要預(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實時定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設(shè)計的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴增模板可達(dá)幾個拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
MEE肉湯人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞破骨細(xì)胞mouse IgA 小鼠IgA
葡萄糖瓊脂人前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)
乳桿菌選擇性培養(yǎng)基(LBs瓊脂)人前列腺上皮細(xì)胞腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Insulin (from porcine pancreas) 胰島素
馬鈴薯瓊脂人前列腺平滑肌細(xì)胞腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動蛋白(抗原)
酪胨-卵磷脂-吐溫20液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)人前列腺成纖維細(xì)胞腦動脈血管平滑肌細(xì)胞rHBsAg 重組乙肝病表面抗原
腸球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(疊氮鈉-結(jié)晶紫-七葉苷瓊脂)人顱骨成骨細(xì)胞腦膜細(xì)胞AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪細(xì)胞增強結(jié)合蛋白1
擬桿菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(改良GAM瓊脂基礎(chǔ))人股骨成骨細(xì)胞神經(jīng)元細(xì)胞Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚胺
去氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂人軟骨細(xì)胞神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞SP-B peptide 肺表面活性蛋白B抗原
Ezrin/Radixin/FITC 熒光素標(biāo)記埃茲蛋白IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白615-硝基吲哚啉Rat FIL1d (Ierleukin 1Delta) 檢測試劑盒
Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化埃茲蛋白IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83-氯-5-氟Rat FIL1h (Ierleukin 1 Eta) 檢測試劑盒
Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化埃茲蛋白IgG神經(jīng)酰胺激酶CERK3-氯-5-氟Rat IL-1ra (Ierleukin 1 Receptor Aagonist) 檢測試劑盒
Fabp2 /FITC 熒光素標(biāo)記脂肪酸結(jié)合蛋白2IgG細(xì)胞分裂周期樣激酶23,5-二(三氟甲基)甲Rat LCAT (Lecithin-Cholesterol Acyltransferase) 檢測試劑盒
FABP(brain)/FITC 熒光素標(biāo)記腦型脂肪酸結(jié)合蛋白IgG細(xì)胞分裂周期樣激酶33,5-二(三氟甲基)甲Rat ALD (Aldosterone) 檢測試劑盒
factor V/FITC 熒光素標(biāo)記凝血因子5IgG17號染色體開放閱讀框493,5-二(三氟甲基)甲Rat IL-2Rα (Ierleukin-2 Receptor-α) 檢測試劑盒
factor VIII/FITC 熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原IgG17號染色體開放閱讀框53氧化釕(IV) 水合物Rat IL-3 (Ierleukin 3) 檢測試劑盒
factor VIII/FITC 熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原IgG17號染色體開放閱讀框57氧化釕(IV) 水合物Rat FE (Ferritin) 檢測試劑盒
首烏藤染料法PCR鑒定試劑盒STAB;十八烷基*基溴化銨Ran Antibody
十烷基*基溴化銨Hop Antibody
EHDAB;十六烷基二甲基乙基溴化銨Keratin 7 (D1E4) XP® Rabbit mAb
十二烷基二甲基乙基溴化銨Keratin 7 (D1E4) XP® Rabbit mAb
十四烷基二甲基芐基氯化銨XCR1 (D2F8T) Rabbit mAb
HDBAC;十六烷基二甲基芐基氯化銨β3-Tubulin (TU-20) Mouse mAb
十烷基*基氯化銨Bif-1 Antibody
辛基*基氯化銨;八烷基*基氯化銨200 mM HEPES
2-溴乙基*基溴化銨Human T Cell Co-inhibitory and Co-stimulatory Receptor IHC Antibody Sampler Kit
3-溴基*基溴化銨(BPTAB)RagD Antibody