詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 合歡皮PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Cortex albiziae |
貨號(hào) | FS-P99117 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
V-P半固體瓊脂小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CD133 造血干細(xì)胞抗原CD133
吲哚培養(yǎng)基(又名色氨酸肉湯)小鼠顆粒細(xì)胞大隱靜脈平滑肌細(xì)胞CD133 造血干細(xì)胞抗原(多肽抗原)
二酸鈉培養(yǎng)基小鼠海馬趾神經(jīng)元冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞H5N1-H5 H5亞型全病
衛(wèi)矛半固體瓊脂小鼠雪旺細(xì)胞食管上皮細(xì)胞Newcastle disease virus 雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合?。?/span>
GN增菌液小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞食管平滑肌細(xì)胞SDF-1/CXCL12 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1
GN增菌液小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞腸平滑肌細(xì)胞Bacillus ahraci 炭疽桿菌菌體蛋白
木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽培養(yǎng)基(XLD)小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞腸粘膜上皮細(xì)胞ADCY1 peptide 腺苷酸環(huán)化酶1多肽抗原
40%尿素水小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)
GADD153/FITC 熒光素標(biāo)記生長抑制DNA損傷基因153IgG巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ多肽試劑TCTURat NF-κB p65(Nuclear Factor-κB P65) 檢測試劑盒
Galanin/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)節(jié)肽“甘肽”IgG神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1阿伐那非Rat NRIP1 (Nuclear Receptor Ieracting Protein 1) 檢測試劑盒
Galectin /FITC 熒光素標(biāo)記半乳糖凝集素IgG8號(hào)染色體開放閱讀框30a阿伐那非Rat NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) 檢測試劑盒
GAI3/FITC 熒光素標(biāo)記抑制型G蛋白α3IgG細(xì)胞色素P450 11A1雙甲脒Rat NUP107 (Nucleoporin 107kDa) 檢測試劑盒
Galectin-3/FITC 熒光素標(biāo)記半乳糖凝集素-3IgG肉堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1ADL-叔亮氨酸Rat NUP153 (Nucleoporin 153kDa) 檢測試劑盒
GAP-43 /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43()IgG細(xì)胞分化周期CDC42蛋白DL-叔亮氨酸Rat NUP155 (Nucleoporin 155kDa) 檢測試劑盒
GAPDH /FITC 熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油脫氫酶IgG磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白DL-叔亮氨酸Rat NUP160 (Nucleoporin 160kDa) 檢測試劑盒
GAPDH(human)/FITC 熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油脫氫酶(人)IgG環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2*Rat NUP188 (Nucleoporin 188kDa) 檢測試劑盒
合歡皮PCR鑒定試劑盒S-乙酰半胱氨酸鹽酸SDH5 (D1S8D) Rabbit mAb
O-叔丁基-L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽Phospho-Bim (Ser69) (D7E11) Rabbit mAb
L-氨酸異酯鹽酸鹽Ku70 (D10A7) Rabbit mAb
L-精氨酸叔丁酯GATA-1 (D24E4) XP® Rabbit mAb
L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽DR3 (D5Q2R) Rabbit mAb
L-天冬氨酸二叔丁基酯鹽酸鹽Insulin Antibody
L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽GATA-1 Antibody
L-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽Bik Antibody
N-芐基甘氨酸鹽酸鹽Bik Antibody
甘氨酸芐酯鹽酸鹽C-Peptide Antibody