詳細(xì)介紹
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 椿皮染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Cortex ailanthi |
貨號 | FS-P99115 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時定量檢測。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個拷貝,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
改良胰蛋白胨大豆肉湯(mTSB)小鼠腹脊髓神經(jīng)元海馬神經(jīng)應(yīng)細(xì)胞CD19(B-lymphocyte aigen CD19) CD19
TPY瓊脂培養(yǎng)基小鼠背脊髓神經(jīng)元腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA
嗜冷菌計(jì)數(shù)瓊脂小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞腦成纖維細(xì)胞Clenbuterol Hydrochloride/KLH 鹽酸克侖特羅偶聯(lián)血藍(lán)蛋白KLH
緩沖蛋白胨水(BPW)小鼠雪旺細(xì)胞神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞Estradiol/BSA 雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白
緩沖蛋白胨水(BPW)小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞雪旺氏細(xì)胞DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原(N端)
膽硫乳瓊脂(DHL)小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原
膽硫乳瓊脂(DHL)小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞肺血管平滑肌細(xì)胞Ractopamine/BSA 萊克多巴胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物
三糖鐵瓊脂(TSI)小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞Ractopamine/KLH 萊克多巴胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物
Gab2/FITC 熒光素標(biāo)記接頭蛋白Gab 2IgG間隙連接蛋白456-羧基熒光素Rat NPY (Neuropeptide Y) 檢測試劑盒
Phospho-Gab1 (Tyr627) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化接頭蛋白Gab 1IgG細(xì)胞表面趨化因子受體16-羧基熒光素Rat RK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) 檢測試劑盒
Phospho-Gab1 (Tyr659) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化接頭蛋白Gab 1IgG細(xì)胞色素P450單氧化酶丁位壬內(nèi)酯Rat RK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) 檢測試劑盒
GABA-AR Alpha1/FITC 熒光素標(biāo)記γ1氨基丁酸受體α1IgG細(xì)胞色素CD-亮氨酰-L-酪氨酸水合物Rat -3 (Neurotrophin 3) 檢測試劑盒
GABA-B-R1/FITC 熒光素標(biāo)記抗g-氨基丁酸B1受體IgG細(xì)胞角蛋白1D-亮氨酰-L-酪氨酸水合物Rat -4 (Neurotrophin 4) 檢測試劑盒
GABA /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗γ1氨基丁酸IgG巨細(xì)胞病PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白L-氨酰-L-亮氨酸Rat NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) 檢測試劑盒
GABAB2/FITC 熒光素標(biāo)記抗g-氨基丁酸B2受體IgG周期素C2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶Rat NAP-2 (Neutrophil Activating Protein-2) 檢測試劑盒
phospho-GAB2(Ser623) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化接頭蛋白Gab2體IgG周期素B12-氯-4-(三氟甲基)嘧啶Rat NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) 檢測試劑盒
椿皮染料法PCR鑒定試劑盒甘氨酸甲酯鹽酸鹽Phospho-MYPT1 (Thr853) Antibody
L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽Phospho-MYPT1 (Thr853) Antibody
L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽PDGF Receptor β (C82A3) Rabbit mAb
L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽Dynamin-I (3G4B6) Mouse mAb
L-苯氨酸甲酯鹽酸鹽TBR1 (D6C6X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽Axl (C44G1) Rabbit mAb
L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽Fumarase (D9C5) Rabbit mAb
L-色氨酸甲酯鹽酸鹽Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr980) (C14A11) Rabbit mAb
L-酪氨酸甲酯Phospho-Cortactin (Tyr421) Antibody
L-半胱氨酸乙酯鹽酸鹽TNK1 (C44F9) Rabbit mAb