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蛋白提取系列專題
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背景介紹
蛋白質(zhì)種類很多，在理化特性方面差異較大，因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質(zhì)的分離。動物蛋白提取一般遵循如下原則：盡可能提高蛋白的溶解度，抽提大量的總蛋白，減少蛋白質(zhì)的損失；減少對蛋白質(zhì)的人為修飾；破壞蛋白與其他生物大分子的相互作用，并使蛋白質(zhì)處于*變性狀態(tài)。
產(chǎn)品信息
1、裂解液形式：
RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer，放射免疫沉淀法裂解緩沖液）是一種傳統(tǒng)的可用于裂解細胞或組織的快速裂解液，其原理為利用表面活性劑等裂解細胞膜（包括核膜），從組織或動物細胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常規(guī)的WB、IP、co-IP等實驗。
貨號 | 20101 | 20114 | 20115 | 20118 |
名稱 | RIPA裂解液（強） | RIPA裂解液（弱） | RIPA裂解液（中） | 免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液 |
主要用途 | WB IP | WB IP Co-IP | WB IP | WB IP Co-IP |
有效裂解成分 | 1%Triton X-100， 1% Sodium Deoxycholate， 0.1% SDS | 1% NP-40， 0.25% Sodium Deoxycholate | 1% NP-40， 0.5% Sodium Deoxycholate， 0.1% SDS | 1%Triton X-100 |
裂解強度 | 強 | 溫和 | 中 | 溫和 |
提取膜蛋白 | 很好 | 一般 | 較好 | 一般 |
提取胞漿蛋白 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
提取核蛋白 | 很好 | 較好 | 較好 | 較好 |
提取胞漿磷酸化蛋白 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
提取細胞核轉(zhuǎn)錄因子 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
含蛋白酶抑制劑 | 是 | 是 | 是 | 是 |
含磷酸酯酶抑制劑 | 是 | 是 | 是 | 是 |
2、Kit形式：
蛋白提取實驗是蛋白功能研究，客戶可購買商品化的蛋白提取試劑盒。圖1簡單的介紹了不同部位蛋白提取所利用的提取試劑盒，并且需要注意以下事項：
（1）所要研究的樣本種屬----動物 、植物、細菌、真菌、昆蟲、酵母等；
（2）蛋白獲得的部位----總蛋白、膜蛋白、核蛋白、跨膜蛋白等；
（3）下游的實驗---考慮提取得到蛋白的活性等；
圖1 細胞不同組織部位蛋白提取
產(chǎn)品特點
FAQ
1.如何選擇合適的RIPA裂解液？
如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP，我們建議您使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)，該裂解液在裂解細胞或組織后一般不會形成粘滯的透明狀DNA團塊，不必采用超聲處理就可進行下一步操作。同時，該裂解液還適用于磷酸化蛋白的WB檢測。
如果使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)的效果不是很好，那您的蛋白可能比較特殊，我們建議您可以嘗試另外幾種裂解液。如果您的蛋白是難溶性的蛋白，建議您可以嘗試使用裂解強度更高的裂解液，如RIPA裂解液(強/中)；如果您在做IP實驗的時候發(fā)現(xiàn)背景很高，即有很多非特異性蛋白被IP下來，這時候您需使用裂解強度較強的裂解液，比如RIPA裂解液(強/中)。反之，如果您發(fā)現(xiàn)目的蛋白無法IP下來，則說明您使用的裂解液強度過強，此時需使用裂解強度較弱的裂解液，比如RIPA裂解液(弱)。
2. RIPA裂解液可以獲得細胞中的不同蛋白嗎？
RIPA裂解液提取的是全蛋白，包括核蛋白、漿蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白（如：核蛋白、膜蛋白）則可利用專門提這類蛋白的試劑盒進行提取。
文獻引用
[1] Yang Zhang, Zhixue Fang, Xiong Guo, et al. lncRNA B4GALT1‐AS1 promotes colon cancer cell stemness and migration by recruiting YAP to the nucleus and enhancing YAP transcriptional activity[J]. Journal of Cellular Physiology, 2019,234(10): 18524-18534.
20126ES50 和20101ES60 IF:4.522
[2] Li Z, Han S, Jia Y, et al. MCPIP1 regulates RORα expression to protect against liver injury induced by lipopolysaccharide via modulation of miR‐155[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(9): 16562-16572.
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[3] Wang Q, li Wu Z, Yuan X, et al. Bilobetin induces kidney injury by influencing cGMP-mediated AQP-2 trafficking and podocyte cell cycle arrest[J]. Phytomedicine, 2019, 64: 153073.
20127ES50 IF:4.18
[4] Wang Y, Li X, Gong X, et al. MicroRNA-322 Regulates Self-renewal of Mouse Spermatogonial Stem Cells through Rassf8[J]. International journal of biological sciences, 2019, 15(4): 857.
RIPA IF: 4.067
[5] Liu X Y, Li D, Li T, et al. Effects of intranasal oxytocin on pup deprivation-evoked aberrant maternal behavior and hypogalactia in rat dams and the underlying mechanism[J]. Frontiers in neuroscience, 2019, 13: 122.
RIPA IF: 3.648
[6] Han S, Li Z, Han F, et al. ROR alpha protects against LPS-induced inflammation by down-regulating SIRT1/NF-kappa B pathway[J]. Archives of biochemistry and biophysics, 2019, 668: 1-8.
20126ES50 IF: 3.559
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液（強） | 20101ES60 | 100 mL | 228 |
RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液（弱） | 20114ES60 | 100 mL | 228 |
RIPA Lysis Buffer (Medium) RIPA裂解液（中） | 20115ES60 | 100 mL | 228 |
Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液 | 20118ES60 | 100 mL | 228 |
細胞核/細胞漿蛋白抽提試劑盒 | 20126ES50/60 | 50 T/100T | 935/1545 |
細胞膜/細胞漿蛋白抽提試劑盒 | 20127ES50/60 | 50 T/100T | 835/1435 |
組織/細胞線粒體分離試劑盒 | 20128ES50/60 | 50 T/100T | 786/1365 |
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