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RNA體外合成原來也可以這么方便
隨著生物科技的發(fā)展，細(xì)胞治療和基因治療業(yè)已成為重要的前沿疾病治療技術(shù)，利用RNA體外合成技術(shù)制備的mRNA疫苗在2020年突發(fā)的CO///VID-19傳染病上產(chǎn)生了巨大的影響。很多公司如美國Moderna、德國CureVac、BioNTech等均已經(jīng)開展了其他疾病如腫瘤、傳染病、慢性病等治療性mRNA疫苗和藥物開發(fā)。
圖：基于mRNA（癌癥）疫苗開發(fā)中的開創(chuàng)性階段和里程碑[1]
表1：國內(nèi)外主要的mRNA疫苗公司概況
公司名稱 | 成立時期 | 注冊地 | 研究技術(shù)平臺 |
Argos Therapeutics | 1997 | 美國 | 擁有*免疫療法技術(shù)Arcelis平臺 |
CureVac | 2000 | 德國 | 擁有RNActive、RNArt、RNAntibody、RNAdjuvant 技術(shù)平臺 |
BioNTech | 2008 | 德國 | 擁有mRNA藥物/疫苗、細(xì)胞治療、抗體藥物等藥物研發(fā)平臺 |
Moderna | 2010 | 美國 | 擁有mRNA技術(shù)、交付技術(shù)和制造流程mRNA轉(zhuǎn)化藥物平臺 |
eTheRNA Immunotherapies | 2013 | 比利時 | 擁有基于APC激活mRNA平臺開發(fā)新的免疫腫瘤療法 |
斯微生物 | 2016 | 中國 | 擁有中國領(lǐng)///先的mRNA藥物平臺和產(chǎn)品管線 |
注：以上信息均來自對應(yīng)公司官///網(wǎng)信息
體外合成RNA（IVT）主要是以DNA為模板通過體外轉(zhuǎn)錄得到，常用的是以線性化質(zhì)粒DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物為模板利用RNA聚合酶在體外轉(zhuǎn)錄合成。主要過程是利用含有T7啟動子（TAATACGACTCACTATAGGG）或SP6啟動子（ATTTAGGTGACACTATAG）序列的DNA為模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的條件下，以NTP為底物合成與模板DNA中一條鏈互補(bǔ)的mRNA，簡單快速獲得大量的mRNA分子，通過在5’端加上帽子結(jié)構(gòu)和3’端加ployA尾加強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性。
圖：體外轉(zhuǎn)錄（IVT）mRNA生產(chǎn)和裝配過程[2]
體外合成RNA應(yīng)用
體外合成RNA你是否有以下困惑
（1）如何獲得轉(zhuǎn)錄模板？
（2）為什么自己配置反應(yīng)體系無論如何優(yōu)化都無法獲得足夠高的產(chǎn)率？
（3）有沒有一款包含全套反應(yīng)試劑的Kit，讓我不在為體系配置而煩惱？
（4）需要一款性價比高的T7 Kit，讓研究經(jīng)費(fèi)不在是我科研路上的攔路虎？
（5）有沒有一款試劑盒適用于多種類型RNA的合成？
……
翊圣生物經(jīng)過匠心研發(fā)，開發(fā)出的高性價比的T7高產(chǎn)量體外合成試劑盒包含一整套的RNA合成所需試劑，并配有詳細(xì)的教程。本試劑盒可以合成長轉(zhuǎn)錄本以及短轉(zhuǎn)錄本，以1μg的模板投入量可以產(chǎn)生100-200 μg的RNA，適用于單鏈 RNA合成（包括siRNA等各類RNA前體及RNA探針）和以Cap analog為引物合成Capped mRNA。
Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit測試數(shù)據(jù)
圖：不同長度轉(zhuǎn)錄-時間梯度電泳圖
短片段：2-4h可有效轉(zhuǎn)錄 長片段：1-2h可有效轉(zhuǎn)錄
圖：不同目的片段的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量
不同長度RNA轉(zhuǎn)錄 RNA轉(zhuǎn)錄品質(zhì)測定（安捷倫2100）
圖：不同長度RNA轉(zhuǎn)錄及品質(zhì)測試
翊圣生物提供您高品質(zhì)、高性價比的T7合成試劑盒，助力您的科學(xué)研究和藥物及疫苗的開發(fā)，共同為人類的未來健康事業(yè)奉獻(xiàn)一份力量。
產(chǎn)品訂購
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit | 10623ES50/60 | 50/100T |
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
GTP Solution(100 mM) 鳥苷三磷酸溶液（100 mM） | 10132ES03 | 1ml |
NTP Set Solution(ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each） | 10133ES03 | 1 Set (4 vial) |
Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas 脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺 | 10607ES15/81 | 1/10*15KU |
Murine RNase Inhibitor(200 U/μL) 鼠源RNase抑制劑 | 10610ES05/10 | 2/10KU |
mRNA Vaccinia Capping Enzyme | 10615ES76/84 | 500/2000U |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase | 10616ES84/92 | 2000/10000U |
T7 RNA Polymerase （1 KU/μl） | 10617ES92/97 | 10/50KU |
S-adenosylmethionine (SAM) | 10619ES02 | 0.5ml |
Murine RNase inhibitor (200U/μl , Glycerol-free) 鼠源RNase抑制劑 | 10703ES05/10 | 2/10KU |
【1】Verbeke, Rein & Lentacker, Ine & De Smedt, Stefaan & Dewitte, Heleen. (2019). Three decades of messenger RNA vaccine development. Nano Today. 100766. 10.1016/j.nantod.2019.100766.
【2】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tailoring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response,Trends in Molecular Medicine,Volume 26, Issue 3,2020,Pages 311-323,
關(guān)于翊圣生物
上海翊圣生物科技有限公司（Yeasen Biotech Co., Ltd）成立于2009年，是國家高新技術(shù)型企業(yè)，長期專注于分子酶原料及建庫試劑盒等產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)。
我們的目標(biāo)讓下游企業(yè)節(jié)省更多的成本，為中國精///準(zhǔn)醫(yī)療的發(fā)展貢獻(xiàn)自己的力量。
翊圣生物擁有*分子酶雙向技術(shù)平臺、大規(guī)模蛋白發(fā)酵純化技術(shù)平臺、高效抗體篩選技術(shù)平臺，目前已成功開發(fā)各類診斷分子酶、二代測序建庫酶等40余種，并實(shí)現(xiàn)工業(yè)放大。翊圣生物開發(fā)的PCR類、NGS類、體外診斷（IVD）和相關(guān)酶原料等產(chǎn)品獲得了廣大客戶的認(rèn)可。此外，我們還為工業(yè)客戶提供定制化開發(fā)服務(wù)，以滿足個性化需求
