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——提升PCR成功率,大幅減少擴增時間
你還在擔(dān)心PCR擴增檢出率低嗎?
你還在擔(dān)心PCR擴增產(chǎn)量低嗎?
你還在擔(dān)心PCR擴增時間長嗎?
翌圣Hieff® Robust PCR Master Mix是一款高檢出率型PCR預(yù)混液,通過酶結(jié)構(gòu)的改造、篩選及Buffer的優(yōu)化,決了常規(guī)PCR Mix檢出率低、產(chǎn)量低的問題。另外,延伸速度提升至15-30 s/kb,可用于基因的快速克隆。
◎ 擴增速度達15-30 s/kb,極限速度5 s/kb
◎ 擴增長度1-4 kb
◎ 模板適用性廣
◎ 靶基因GC耐受范圍35-70%
基因快速克隆、菌落PCR、基因型鑒定、TA克隆等。
◎ 延伸速度30s/kb,極限延伸速度5s/kb
圖1:以小鼠基因組為模板,不同延伸速度(5 s/kb-60 s/kb)擴增2 kb大小的片段。PCR結(jié)束后取4 μL進行電泳檢測。a為Hieff® Robust PCR Mix,b-d為其他品牌普通型PCR Mix,e為快速型PCR Mix。Marker:1 kb DNA ladder。
◎ 擴增長度4kb,擴增時間更短
圖2:以小鼠基因組為模板,分別擴增1-4 kb的目的片段,PCR反應(yīng)條件使用各公司推薦的PCR反應(yīng)條件,PCR反應(yīng)結(jié)束后,取4 μL進行電泳檢測。Marker:1 kb DNA ladder。
◎ 適用于動植物基因組及菌落PCR實驗
圖3:以人gDNA(1)、擬南芥gDNA(2)、水稻gDNA(3)、小鼠gDNA(4)、菌液(5)、質(zhì)粒DNA(6)為模板,30s/kb延伸速度條件下分別擴增大小為0.5 kb、1 kb、2 kb、4 kb的片段,PCR結(jié)束后取4uL進行電泳檢測。Marker:1kb DNA ladder。
[1]. Shen P, Yang Y, Liu G, et al. CircCDK14 protects against Osteoarthritis by sponging miR-125a-5p and promoting the expression of Smad2[J]. Theranostics, 2020, 10(20): 9113.(IF8.579)
[2]. Zhang Q, Xie Z, Zhang R, et al. Blue light regulates secondary cell wall thickening via MYC2/MYC4 activation of the NST1-directed transcriptional network in Arabidopsis[J].The Plant Cell, 2018, 30(10): 2512-2528.(IF 8.228)
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產(chǎn)品保質(zhì)期、運輸問題
冰袋運輸。-20℃,保質(zhì)期2年。
該產(chǎn)品擴增的PCR產(chǎn)物可用于PAGE膠電泳嗎?
不可以。如有需要,請選擇本公司產(chǎn)品(貨號:10101)。
該產(chǎn)品可以用于擴增鼠尾、植物裂解液等粗制模板嗎?
推薦10108 Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye) 用于粗制模板的擴增。
出現(xiàn)非特異性擴增的解決方案?
理論上,采用該產(chǎn)品的建議擴增條件,可以解決大部分基因擴增。當(dāng)出現(xiàn)非特異性擴增時,可嘗試將退火溫度梯度上升2℃解決。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
2 × Hieff® Robust PCR Master Mix(With Dye) | 10106ES03 | 1 mL |
10106ES08 | 5×1 mL |
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Hieff® Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 | 10101ES80 | 1000U |
10101ES90 | 5×1000U | |
Hieff® PCR Master Mix(With dye) | 10102ES03 | 1 mL |
10102ES08 | 5 mL | |
Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye) | 10108ES08 | 5 mL |
Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶 | 10148ES10 | 10 U |
10148ES60 | 100 U | |
10148ES76 | 500 U | |
2 × Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液 | 10149ES01 | 100 μL |
10149ES03 | 1 mL | |
10149ES08 | 5×1 mL | |
YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) YeaRed 核酸染料(10,000× 水溶液) | 10202ES76 | 500 μL |
Agarose瓊脂糖 | 10208ES60 | 100 g |
HB210805