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近年來，mRNA技術(shù)的發(fā)展應(yīng)用持續(xù)得到關(guān)注。mRNA藥物以安全、高效、周期短等的優(yōu)勢(shì)，目前已經(jīng)應(yīng)用在疫苗、腫瘤免疫、罕見病等多個(gè)領(lǐng)域。近期，默沙東（MSD）與Moderna將于8月啟動(dòng)癌癥疫苗mRNA-4157（V940）與PD-1療法Keytruda組合在高風(fēng)險(xiǎn)黑色素瘤（II-IV期）患者身上的3期臨床試驗(yàn)。mRNA藥物在申報(bào)和臨床上的不斷傳來的好消息，加強(qiáng)了研究者和患者對(duì)mRNA 藥物發(fā)展的信心。
圖1. mRNA疫苗的示意圖及其抗原表達(dá)的機(jī)制[4]
圖2. mRNA疫苗生產(chǎn)制備流程圖[5]
圖3. 體外轉(zhuǎn)錄（IVT）mRNA生產(chǎn)和裝配過程[6]
流程 | 定位 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) |
體外轉(zhuǎn)錄（試劑盒） | RNA體外轉(zhuǎn)錄 | Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit | 10623ES |
一步法mRNA 體外轉(zhuǎn)錄 | T7 High Yield RNA Synthesis Kit for Co-transcription | 10673ES | |
體外轉(zhuǎn)錄（單組分） | 限制性內(nèi)切酶 | BspQI GMP-grade (10 U/μL) | 10664ES |
BsaI GMP-grade (20 U/μL) | 10661ES | ||
10×Digestion buffer 3 GMP-grade | 10667ES | ||
T7 RNA 合成酶 | T7 RNA Polymerase GMP-grade（250 U/μL） | 10625ES | |
無機(jī)焦磷酸酶 | Pyrophosphatase,Inorganic GMP-grade(1 U/μL) | 10620ES | |
Pyrophosphatase, Inorganic GMP-grade (0.1 U/μL) | 10672ES | ||
RNA 抑制劑 | Murine RNase inhibitor GMP-grade (40 U/μL) | 10621ES | |
轉(zhuǎn)錄buffer | 10×Transcription Buffer GMP-grade(Mg2+ free) | 10669ES | |
10× Transcription Buffer 2 GMP-grade | 10670ES | ||
NTP | ATP Tris Solution GMP-grade (100 mM) | 10652ES | |
CTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) | 10653ES | ||
UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) | 10654ES | ||
GTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) | 10655ES | ||
Pseudo UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) | 10656ES | ||
N1-Me-Pseudo UTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) | 10657ES | ||
DNA消化 | 模板DNA 消化 | Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade | 10611ES |
RNA純化 | RNA純化 | Hieff NGS® RNA Cleaner | 12602ES |
mRNA修飾 | 二步法加帽技術(shù) | mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade | 10614ES |
mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase GMP-grade | 10612ES | ||
10× Capping Buffer GMP-grade | 10666ES | ||
Murine RNase inhibitor GMP-grade (40 U/μL) | 10621ES | ||
GTP Tris Solution GMP-grade (100 mM) | 10655ES | ||
S-adenosylmethionine (SAM)（32mM） | 10619ES | ||
共轉(zhuǎn)錄帽類似物 | Cap1-GAG m7(3'OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA)pG (100mM) | 10677ES | |
Cap1-GAG m7G(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG(100 mM) | 10678ES | ||
Cap AU-GAUm7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU GMP-grade (100 mM) | 10679ES | ||
加尾酶 | E.coli poly(A) Polymerase (5 U/μL） | 1481ES | |
mRNA標(biāo)準(zhǔn)品 | mRNA原液標(biāo)準(zhǔn)品 | Firefly Luciferase-mRNA(3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP) | 17101ES |
eGFP-mRNA(3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP) | 17102ES | ||
OVA -mRNA(3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP) | 17103ES | ||
mCherry-mRNA(3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP) | 17104ES60/80 | ||
環(huán)狀RNA | 線性RNA 去除 | RNase R (20U/μL) | 14606ES |
