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上新 | 蛋白互作研究經(jīng)典-酵母雙雜交定制服務(wù)

2023-11-24  閱讀(142)

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酵母雙雜交系統(tǒng)是一種鑒定蛋白質(zhì)相互作用的研究方法,是基于對酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的性質(zhì)研究之上。GAL4包括兩個功能結(jié)構(gòu)域:一是與DNA上游激活序列(Upstream activating sequence UAS)結(jié)合的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(binding domain, BD), 該結(jié)構(gòu)域位于N端1-174位氨基酸殘基區(qū)段;另一個是轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(activation domain, AD),該結(jié)構(gòu)域位于C端768-881位氨基酸殘基區(qū)段。這兩個功能結(jié)構(gòu)域是兩個結(jié)構(gòu)相互分離,功能又相互獨立。一般情況下,單獨的BD可以和UAS結(jié)合但并不引起轉(zhuǎn)錄,單獨的AD則不能與UAS結(jié)合,只有當(dāng)BD與AD分別表達(dá)的融合蛋白由于相互作用而導(dǎo)致兩者在物理空間上相互接近時,BD與AD才能與UAS結(jié)合從而引起啟動子下游基因的轉(zhuǎn)錄。

 


 
酵母雙雜交主要功能
 
  • 發(fā)現(xiàn)新的與已知蛋白質(zhì)互作的蛋白質(zhì);

  • 確認(rèn)兩個蛋白質(zhì)之間的相互作用;

  • 鑒定參與蛋白質(zhì)相互作用的區(qū)域;

 

 
酵母雙雜交技術(shù)優(yōu)勢
 
  • 真實:蛋白質(zhì)互作發(fā)生在酵母細(xì)胞內(nèi),反應(yīng)互作真實水平;

  • 靈敏:可檢測微弱和短暫的蛋白質(zhì)互作作用;

  • 操作簡單:無需蛋白質(zhì)抽提、純化等繁瑣步驟;

  • 通量大,可構(gòu)建文庫,一次性完成數(shù)萬蛋白質(zhì)相互作用的篩選;

  • 結(jié)果直觀:通過藍(lán)白斑篩選可以直觀地找出有互作蛋白的陽性克隆。

 

 
酵母雙雜交定制服務(wù)
 

 

文庫構(gòu)建(周期:4-6周)

 

項目流程:

 

樣本選擇:

樣品類型

樣品需求

保存條件(℃)

運輸條件

備注

動物組織

> 0.5 g

-80

干冰

樣本需標(biāo)準(zhǔn)清楚名稱,分類等信息。

貼壁/懸浮細(xì)胞

>1* 107細(xì)胞

-80

干冰

種子

> 1g

-80

干冰

植物組織

> 1g

-80

干冰

 

交付標(biāo)準(zhǔn):

產(chǎn)品名稱

交付標(biāo)準(zhǔn)

儲存條件

備注

酵母工作液甘油菌

>100管(1 m/管)

-80 ℃


篩選用載體套裝

1套

-20 ℃

擴(kuò)繁保存

篩庫用酵母菌株甘油菌

1套

-80 ℃

建庫項目報告

1份

-


 

文庫篩選(周期:4-6周)

 

項目流程:

 

交付標(biāo)準(zhǔn):

產(chǎn)品名稱

交付標(biāo)準(zhǔn)

儲存條件

備注

構(gòu)建好的BD載體

1管

-20 ℃

公司構(gòu)建

陽性克隆酵母菌液

根據(jù)具體項目結(jié)果進(jìn)行交付

-80 ℃


陽性克隆質(zhì)粒

根據(jù)具體項目結(jié)果進(jìn)行交付

-20 ℃


篩選項目報告

1份

--


 

互作驗證(周期:2-3周)

 

項目流程:

 

交付標(biāo)準(zhǔn):

產(chǎn)品名稱

交付標(biāo)準(zhǔn)

驗證結(jié)果報告

1份

 

 
翌圣酵母雙雜定制服務(wù)-技術(shù)優(yōu)勢
 
  • 利用mRNA來建庫。采取總RNA純化出mRNA的方式來建庫,排除了樣本中的核糖體RNA的污染,增加了篩選樣本的有效性;大多數(shù)公司是采用總RNA來擴(kuò)增建庫的;

     

  • 實驗設(shè)計嚴(yán)謹(jǐn),保證陽性率。全程設(shè)置了嚴(yán)格的陽性對照,過程控制達(dá)到陽性對照的標(biāo)準(zhǔn)才會繼續(xù)往下實驗,如果建庫過程達(dá)不到陽性對照水平是不收取建庫的費用的。在篩選的過程中,同時采用了從松弛型篩選到嚴(yán)謹(jǐn)型篩選和從嚴(yán)謹(jǐn)型篩選到松弛型篩選兩條路線盡最大的可能保證篩選到陽性結(jié)果。

     

  • 團(tuán)隊經(jīng)驗豐富。研發(fā)團(tuán)隊成員深耕酵母雜交技術(shù)領(lǐng)域十多年,擁有豐富的篩選經(jīng)驗;

     

  • 售前售中高效響應(yīng)。每個項目,由專業(yè)技術(shù)支持全程跟進(jìn),及時對接項目進(jìn)度及解答售前問題;

     

  • 貼心售后。贈送配套的篩庫載體菌株、篩庫完整方案和售后指導(dǎo)。根據(jù)客戶要求,提供CNS文章級別的結(jié)果圖片。

 

 
相關(guān)產(chǎn)品上新
 

 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

價格

酵母質(zhì)粒提取試劑盒

50T/100T

70201ES

300/520

核蛋白酵母雙雜交試劑盒

4T

70202ES

8775

 

 

上新優(yōu)惠活動

 

定制服務(wù):活動期間,訂購翌圣酵母雙雜定制服務(wù),即送訂單金額×5%的酵母質(zhì)粒提取試劑盒(70201ES)或相關(guān)分子試劑;

 

核蛋白酵母雙雜交建庫試劑盒(70202ES):活動期間,訂購該產(chǎn)品可享目錄價8折,再送50T 酵母質(zhì)粒提取試劑盒(70202ES)。

 

活動時間:即日起至2023年12月31日。

 

※該活動所有解釋權(quán)歸翌圣生物科技(上海)股份有限公司所有。

 

 
相關(guān)產(chǎn)品推薦
 

產(chǎn)品名稱

貨號

產(chǎn)品定位

TRIeasy™ LS Total RNA Extraction Reagent 液體總RNA提取試劑(同TRIzol LS)

19201ES

RNA提取

MolPure® TRIeasy Plus Total RNA Kit   總RNA提取試劑盒(帶離心柱)

19211ES

MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit  細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒

19221ES

MolPure® Plant RNA Kit  植物RNA提取試劑盒

19291ES

MolPure® Plant Plus RNA Kit  多糖多酚植物RNA提取試劑盒

19292ES

MolPure® Bacterial RNA Kit 細(xì)菌RNA提取試劑盒

19301ES

MolPure® Viral DNA/RNA Kit 病毒DNA/RNA提取試劑盒

19321ES

X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷

10903ES

篩選底物

Aureobasidin A(AbA) 金擔(dān)子素A

60231ES

篩選抗生素



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