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——無需基因組純化，一步完成基因型鑒定
背景
動物基因型鑒定或植物基因型分型等實驗，經(jīng)常需要通過抽提純化基因組DNA，以備后續(xù)進行PCR擴增目
的基因進而判定基因型。當大規(guī)模批量化進行多樣本基因型鑒定分析時，抽提基因組的步驟不但費時費力，而
且大大增加實驗成本。
產(chǎn)品介紹
翊圣生物開發(fā)出*的蛋白酶裂解緩沖體系，可zui大程度地釋放不同來源類型樣品的基因組DNA。通過改
造DNA聚合酶，優(yōu)化PCR反應體系，大大地提升了DNA聚合酶對PCR抑制物的抵抗力?；诖?，翊圣生物開發(fā)
出的直接PCR試劑盒系列產(chǎn)品，可快速的進行PCR反應。
翊圣主要提供4類Direct PCR Kit，包括動物直接PCR試劑盒、小鼠直接PCR試劑盒、植物直接PCR試劑盒
和血液直接PCR試劑盒。
工作原理
產(chǎn)品優(yōu)勢
★樣品需求量小 —— 少到5mg動物組織、1mg植物葉片即可進行實驗。
★操作簡便 —— 使用*的蛋白酶裂解體系，無需研磨、破碎等特殊處理，操作簡便。
★處理快速 —— 20min快速釋放質(zhì)量穩(wěn)定的基因組DNA。
★粗制樣品PCR —— 無需進行費時而昂貴的DNA純化。
★擴增性能強 —— 優(yōu)化的PCR體系，使PCR具有更高的特異性、更強的PCR反應抑制物耐受性。
產(chǎn)品應用
植物基因型分型、動物基因型鑒定、血液中微生物鑒定等。
產(chǎn)品選擇指南
產(chǎn)品特點 | Animal Tissue Direct PCR Kit
動物組織直接PCR試劑盒 | Mouse Tissue Direct PCR Kit
小鼠組織直接PCR試劑盒 | Plant Tissue Direct PCR kit
植物組織直接PCR試劑盒 | Animal Blood Dicrect PCR Kit
全血直接PCR試劑盒 |
適用生物類型 |
小鼠、兔子、鳥類、淡水魚 | 小鼠、大鼠 |
水稻、玉米、煙草、油菜、小麥、大豆等多糖多酚含量低的植物 |
人血、鼠血、雞血、鳥血、牛血、狗血 |
適用組織類型/材料類型 |
腦、心臟、肝臟、胰臟、腎臟、脾臟、睪丸、肌肉、羽毛末端 |
鼠尾、鼠耳、腳趾（帶肌肉）和其他臟器 |
葉片、幼苗 |
EDTA、Heparin 抗凝全血、血液的采集卡、冷凍血和抗凝血等 |
使用量（范圍） |
5-10mg |
5-10mg |
3-5mg（5-7mm） |
人血2-45%；鼠血2-20%；采集卡1-4mm |
裂解方式 |
蛋白酶裂解 |
無需裂解 | ||
裂解時間 |
65℃，10-30min |
65℃，10-30min |
95℃，10min | - |
裂解液保存時間 |
4℃，2天；-20℃，10-20天 | - | ||
PCR產(chǎn)物zui適長度 |
＜1kb |
＜1kb |
＜1kb |
＜1kb |
PCR產(chǎn)物是否加A |
裂解反應體系加A效率不定 | |||
50µL PCR反應體系中裂解產(chǎn)物使用量 |
0.5-5µL，不可超過10µL |
0.5-5µL，不可超過10µL |
5-10µL，不可超過15µL |
人血2-45%；鼠血2-20%；采集卡1-4mm |
實驗數(shù)據(jù)
FAQ
常見問題 |
可能原因 |
解決方法 |
陽性對照、待測樣本均無條帶。 |
PCR反應體系或反應條件不合適。 |
使用梯度PCR摸索PCR*反應條件。 |
PCR試劑保存不當失去活性。 |
2× PCR Mix應保存于-20℃，使用時避免反復凍融。若使用頻繁，可在4℃短時間存放。 | |
引物設計問題。 |
嘗試重新設計引物進行檢查。 | |
陽性對照有目的條帶，待測樣本無條帶或條帶弱。 |
不當儲存或長期儲存引起試劑活性喪失。 |
使用新鮮的試劑。 |
加入組織裂解液過量。 |
增大反應體系，或減少裂解液的用量。 | |
樣本裂解混合液保存不當或保存時間過久，DNA基因組已經(jīng)降解。 |
裂解混合液液可在4℃保存2-3天，盡量使用新制備的裂解液混合液進行PCR。 | |
模板加入量不適合。 |
在反應體系10-20%范圍內(nèi)優(yōu)化模板加入量。反應效性能較差時，可以降模板濃度調(diào)節(jié)到低于10%的范圍。 | |
PCR循環(huán)數(shù)不足。 |
增加PCR的循環(huán)數(shù)，推薦在35-40循環(huán)為佳。因為模板復雜，PCR反應要比用純化的DNA模板多5-10個循環(huán)為佳。 | |
非特異性擴增 |
PCR退火溫度太低，循環(huán)數(shù)、引物濃度或模板濃度太高。 |
增加PCR退火溫度，降低PCR循環(huán)數(shù)、引物濃度或模板濃度。 |
PCR引物錯配。 |
重新設計PCR引物。 | |
配制PCR反應體系時溫度太高或配制完成后放置時間太久。 |
PCR反應體系的配制在低溫下進行，配制完成后盡快進行PCR擴增反應。 | |
陰性對照出現(xiàn)目的條帶 |
操作工具或試劑污染。 |
實驗所有試劑或器材均應高壓滅菌。操作時應小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內(nèi)或濺出離心管外。 |
樣本間交叉污染。 |
每個取樣器只對一個樣本使用；或取完一個樣本后，將取樣器刃口浸入2%的次氯酸鈉溶液中，反復涮洗，然后用干凈的紙巾擦干殘液。 |
訂購信息
產(chǎn)品貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
價格（元） |
10180ES50 | Animal Tissue Direct PCR Kit 動物組織直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10180ES70 |
200T |
1236.00 | |
10181ES50 |
Mouse Tissue Direct PCR Kit 小鼠組織直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10181ES70 |
200T |
1236.00 | |
10182ES50 |
Animal Blood Direct PCR Kit 全血直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10182ES70 |
200T |
1236.00 | |
10183ES50 |
Plant Tissue PCR Kit 植物組織直接PCR試劑盒 |
50T |
326.00 |
10183ES70 |
200T |
1236.00 |
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規(guī)格 |
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10102ES03 |
2×HieffTM PCR Master Mix (With Dye) |
1mL |
40.00 |
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5×1mL |
150.00 |
