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Hieff TransTM脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,讓您對轉(zhuǎn)染自信滿滿

2017-5-5  閱讀(2449)

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——效率高不高,一轉(zhuǎn)便知道

 

關鍵詞:liposomal ; transfection ; lipo2000 ; lipo3000

 

轉(zhuǎn)染效率低,細胞毒性大,操作步驟太繁瑣?怎么辦?

 

你需要有一種超能力的轉(zhuǎn)染試劑來成就你的轉(zhuǎn)染實驗

 

    轉(zhuǎn)染能夠讓我們更好的研究目的基因是如何在細胞中進行表達和調(diào)控。目前常見的轉(zhuǎn)染方法有:磷酸鈣共

 

沉淀法、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、機械法(如顯微注射和基因槍法)、陽離子脂質(zhì)體試劑,其中

 

陽離子脂質(zhì)體試劑轉(zhuǎn)染是目前zui常用的轉(zhuǎn)染方法。

 

       Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑作為一款陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,與應用的Lipo2000相比,

 

具有更高的轉(zhuǎn)化效率和更加便捷的操作。目前已經(jīng)在多種細胞系中得以驗證,如常見的細胞系293T,Hela,

 

MCF-7以及相對應用比較少的Raw264.7,COS-7Hep3B等細胞。其中常見細胞系的轉(zhuǎn)染效率達90%以上,

 

遠遠可以滿足我們對于轉(zhuǎn)染實驗的需求。

 

作用原理:

 

    陽離子能夠通過表面所帶正電荷的靜電作用將核酸包裹,形成核酸-脂質(zhì)體復合體。細胞膜表面帶負電

 

荷,能夠?qū)⒃搹秃象w吸附,被吸附后的復合體能夠通過膜的融合作用或者細胞內(nèi)吞的方式形成包涵體進入細

 

胞。有小部分的DNA 能夠從包涵體中被釋放,并進入細胞質(zhì)中,再進一步進入細胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達。

 

 

 

1:脂質(zhì)體介導的轉(zhuǎn)染和內(nèi)吞過程

 

產(chǎn)品特點:

 

性: 可對大多數(shù)真核細胞進行轉(zhuǎn)染,并且對于常見細胞系轉(zhuǎn)染效率達90%以上。

 

低毒性:轉(zhuǎn)染細胞形態(tài)良好并產(chǎn)生大量的轉(zhuǎn)染基因蛋白

 

操作簡便:可以直接將脂質(zhì)體復合物加入到含血清的培養(yǎng)基中。

 

多樣性:適合瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

 

 

 

操作流程:

 

 

 

 

 

2:細胞轉(zhuǎn)染實驗流程

 

產(chǎn)品數(shù)據(jù):

 

客戶提供部分細胞系轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)(僅供參考)

 

 

細胞

 

培養(yǎng)板

 

細胞密度

 

DNA

 

Hieff Trans

 

效率

 

293T

 

6

 

80%

 

1μg

 

2μl

 

90%

 

293FT

 

24

 

85%

 

1μg

 

4μl

 

90%

 

Hela

 

12

 

90%

 

0.2μg

 

0.6μl

 

90%

 

Raw264.7

 

35mm

 

80%

 

1μg

 

2μl

 

90%

 

Hek293

 

6

 

95%

 

2μg

 

10μl

 

80-90%

 

NCI-H1975

 

6

 

80%

 

4μg

 

10μl

 

80%

 

3t3

 

12

 

90%

 

1μg

 

5μl

 

50%

 

 

驗證過的細胞系

 

 

293T

 

293FT

 

HEK293

 

HEK 293T

 

Caco2

 

COS-7

 

DF-1

 

Lenti X-293T

 

HeLa

 

HepG2

 

LM3

 

MCF-7

 

MDA-MB-231

 

MEF

 

NCI-H1975

 

NIH-3T3

 

PC12

 

Raw264.7

 

Vero

 

H9c2

 

Hepa1-6

 

MCF10A

 

CHO

 

5-8F

 

BV-2

 

A549

 

3t3

 

H520

 

HUVEC

 

C6

 

HaCaT

 

N2A

 

SGC-7901

 

H9

 

MKN-28

 

Hep 3B

 

SMCC7721

 

RKO

 

C2C12

 

More…

 

客戶反饋結(jié)果展示

 

 

 

 

Hieff TransTM Liposomal 轉(zhuǎn)染應用

           

           

 

細菌蛋白激活細胞自噬體形成

 

細胞:Hela   轉(zhuǎn)染質(zhì)粒:細菌效應蛋白A   LC3II:自噬體標記蛋白

 

細胞分裂紡錘體結(jié)構(gòu)

 

細胞Hela   轉(zhuǎn)染質(zhì)粒:Flag-tubulin   細胞核染色:Hoechst33342

 

 

 

DNA轉(zhuǎn)染

 

 

DNA轉(zhuǎn)染

     

 

          

         

 

Hieff Trans

 

Lipo3000

 

 

Hieff Trans

 

Lipo2000

 

圖片來源:復旦大學 細胞系:Hek293 核酸類型:DNA

 

 

圖片來源:長春應化所 細胞系:Hela 核酸類型:DNA

 

 

價格比較:

  

       

 

單次反應各公司價格對比

 

常見問題:

 

Q1:配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復合物時能否有血清的存在?

 

答:血清的存在會影響脂質(zhì)體的形成,建議配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復合物時采用無血清培養(yǎng)基(一般推薦MEM培養(yǎng)

基)。

 

Q2:轉(zhuǎn)染實驗過程中是否需要更換成無血清培養(yǎng)基?

 

答:不需要,我們的轉(zhuǎn)染試劑可以在含血清的介質(zhì)中進行轉(zhuǎn)染的過程。

 

Q3:轉(zhuǎn)染后需要進行終止嗎?

 

答:不需要。脂質(zhì)體復合物可以穩(wěn)定存在6個小時。如果在進行轉(zhuǎn)染前沒有進行細胞換液,為了保證細胞正常

生長所需的營養(yǎng),需要在46小時后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉(zhuǎn)染之前已進行過換液則在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后不需要

進行再次換液。

 

Q4:轉(zhuǎn)染試劑的保存及使用過程中的注意事項?

 

答:本試劑一定要4℃保存,要注意避免反復多次長時間開蓋,長時間開蓋會導致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效

率。

 

Q5:若想提高轉(zhuǎn)染效率,應該注意什么?

 

答:a:轉(zhuǎn)染時細胞的密度,90%-95%。

 

b:轉(zhuǎn)染時,核酸和脂質(zhì)體稀釋液要用MEM無血清培養(yǎng)基。

 

c:轉(zhuǎn)染后4-6h可選擇換液。

 

參考文獻:

 

Su D N, Wu S P, Chen H T, et al. HOTAIR, a long non-coding RNA driver of malignancy whose

expression is activated by FOXC1, negatively regulates miRNA-1 in hepatocellular carcinoma[J].

Oncology Letters, 2016, 12(5):4061.

 

我們的回報——有買有

 

產(chǎn)品信息:

 

 

貨號

 

名稱

 

規(guī)格

價格(元)

*(元)

 

40802ES03

 

Hieff TransTM 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

1.0mL

 

1308.00

 

868.00

 

購買/

 

贈送/

 

5

 

3

 

15

 

15

 

30

 

40

 

50

 

70

 

活動條款:

 

1.活動時間:2017.4.10-2017.6.30

 

2.本活動可與“整裝待發(fā) 翊起GO”活動疊加參與;

 

3.本活動zui終解釋權(quán)歸上海翊圣生物所有。

 

產(chǎn)品訂購:

 

 

產(chǎn)品名稱

 

產(chǎn)品編號

 

規(guī)格

 

價格(元)

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

40802ES02

 

0.5 mL

 

738.00

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

40802ES03

 

1.0 mL

 

1308.00

 

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

40802ES08

 

5×1 mL

 

4878.00

 

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產(chǎn)品名稱

 

產(chǎn)品編號

 

規(guī)格

 

價格(元)

 

Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細胞轉(zhuǎn)染試劑

 

40803ES70

 

200 T

 

298.00

 

Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/mL

 

40804ES76

 

500 μL

 

180.00

 

Polybrene (hexadimethrine bromide)  聚凝胺(10 mg/mL

 

40804ES86

 

5×500μL

 

500.00

 

Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

40805ES01

 

100μL

 

228.00

 

Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

40805ES02

 

0.5 mL

 

948.00

 

Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

40805ES03

 

1.0 mL

 

1678.00

 

Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑

 

40805ES08

 

5×1 mL

 

5268.00

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