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——效率高不高,一轉(zhuǎn)便知道
關鍵詞:liposomal ; transfection ; lipo2000 ; lipo3000
轉(zhuǎn)染效率低,細胞毒性大,操作步驟太繁瑣?怎么辦?
你需要有一種超能力的轉(zhuǎn)染試劑來成就你的轉(zhuǎn)染實驗
轉(zhuǎn)染能夠讓我們更好的研究目的基因是如何在細胞中進行表達和調(diào)控。目前常見的轉(zhuǎn)染方法有:磷酸鈣共
沉淀法、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、機械法(如顯微注射和基因槍法)、陽離子脂質(zhì)體試劑,其中
陽離子脂質(zhì)體試劑轉(zhuǎn)染是目前zui常用的轉(zhuǎn)染方法。
Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑作為一款陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,與應用的Lipo2000相比,
具有更高的轉(zhuǎn)化效率和更加便捷的操作。目前已經(jīng)在多種細胞系中得以驗證,如常見的細胞系293T,Hela,
MCF-7以及相對應用比較少的Raw264.7,COS-7和Hep3B等細胞。其中常見細胞系的轉(zhuǎn)染效率達90%以上,
遠遠可以滿足我們對于轉(zhuǎn)染實驗的需求。
作用原理:
陽離子能夠通過表面所帶正電荷的靜電作用將核酸包裹,形成核酸-脂質(zhì)體復合體。細胞膜表面帶負電
荷,能夠?qū)⒃搹秃象w吸附,被吸附后的復合體能夠通過膜的融合作用或者細胞內(nèi)吞的方式形成包涵體進入細
胞。有小部分的DNA 能夠從包涵體中被釋放,并進入細胞質(zhì)中,再進一步進入細胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達。
圖1:脂質(zhì)體介導的轉(zhuǎn)染和內(nèi)吞過程
產(chǎn)品特點:
性: 可對大多數(shù)真核細胞進行轉(zhuǎn)染,并且對于常見細胞系轉(zhuǎn)染效率達90%以上。
低毒性:轉(zhuǎn)染細胞形態(tài)良好并產(chǎn)生大量的轉(zhuǎn)染基因蛋白
操作簡便:可以直接將脂質(zhì)體復合物加入到含血清的培養(yǎng)基中。
多樣性:適合瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。
操作流程:
圖2:細胞轉(zhuǎn)染實驗流程
產(chǎn)品數(shù)據(jù):
客戶提供部分細胞系轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)(僅供參考)
細胞 |
培養(yǎng)板 |
細胞密度 |
DNA |
Hieff Trans |
效率 |
293T |
6孔 |
80% |
1μg |
2μl |
90% |
293FT |
24孔 |
85% |
1μg |
4μl |
90% |
Hela |
12孔 |
90% |
0.2μg |
0.6μl |
90% |
Raw264.7 |
35mm皿 |
80% |
1μg |
2μl |
90% |
Hek293 |
6孔 |
95% |
2μg |
10μl |
80-90% |
NCI-H1975 |
6孔 |
80% |
4μg |
10μl |
80% |
3t3 |
12孔 |
90% |
1μg |
5μl |
50% |
驗證過的細胞系
293T |
293FT |
HEK293 |
HEK 293T |
Caco2 |
COS-7 |
DF-1 |
Lenti X-293T |
HeLa |
HepG2 |
LM3 |
MCF-7 |
MDA-MB-231 |
MEF |
NCI-H1975 |
NIH-3T3 |
PC12 |
Raw264.7 |
Vero |
H9c2 |
Hepa1-6 |
MCF10A |
CHO |
5-8F |
BV-2 |
A549 |
3t3 |
H520 |
HUVEC |
C6 |
HaCaT |
N2A |
SGC-7901 |
H9 |
MKN-28 |
Hep 3B |
SMCC7721 |
RKO |
C2C12 |
More… |
客戶反饋結(jié)果展示
Hieff TransTM Liposomal 轉(zhuǎn)染應用 | |
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細菌蛋白激活細胞自噬體形成
細胞:Hela 轉(zhuǎn)染質(zhì)粒:細菌效應蛋白A LC3II:自噬體標記蛋白 |
細胞分裂紡錘體結(jié)構(gòu)
細胞:Hela 轉(zhuǎn)染質(zhì)粒:Flag-tubulin 細胞核染色:Hoechst33342 |
DNA轉(zhuǎn)染 |
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DNA轉(zhuǎn)染 | ||
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Hieff Trans |
Lipo3000 |
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Hieff Trans |
Lipo2000 |
圖片來源:復旦大學 細胞系:Hek293 核酸類型:DNA |
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圖片來源:長春應化所 細胞系:Hela 核酸類型:DNA |
價格比較:
單次反應各公司價格對比
常見問題:
Q1:配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復合物時能否有血清的存在?
答:血清的存在會影響脂質(zhì)體的形成,建議配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復合物時采用無血清培養(yǎng)基(一般推薦MEM培養(yǎng)
基)。
Q2:轉(zhuǎn)染實驗過程中是否需要更換成無血清培養(yǎng)基?
答:不需要,我們的轉(zhuǎn)染試劑可以在含血清的介質(zhì)中進行轉(zhuǎn)染的過程。
Q3:轉(zhuǎn)染后需要進行終止嗎?
答:不需要。脂質(zhì)體復合物可以穩(wěn)定存在6個小時。如果在進行轉(zhuǎn)染前沒有進行細胞換液,為了保證細胞正常
生長所需的營養(yǎng),需要在4~6小時后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉(zhuǎn)染之前已進行過換液則在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后不需要
進行再次換液。
Q4:轉(zhuǎn)染試劑的保存及使用過程中的注意事項?
答:本試劑一定要4℃保存,要注意避免反復多次長時間開蓋,長時間開蓋會導致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效
率。
Q5:若想提高轉(zhuǎn)染效率,應該注意什么?
答:a:轉(zhuǎn)染時細胞的密度,90%-95%。
b:轉(zhuǎn)染時,核酸和脂質(zhì)體稀釋液要用MEM無血清培養(yǎng)基。
c:轉(zhuǎn)染后4-6h可選擇換液。
參考文獻:
Su D N, Wu S P, Chen H T, et al. HOTAIR, a long non-coding RNA driver of malignancy whose
expression is activated by FOXC1, negatively regulates miRNA-1 in hepatocellular carcinoma[J].
Oncology Letters, 2016, 12(5):4061.
我們的回報——有買有送
產(chǎn)品信息:
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 | 價格(元) | *(元) |
40802ES03 |
Hieff TransTM 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
1.0mL |
|
868.00 |
購買/支 |
贈送/支 |
5 |
3 |
15 |
15 |
30 |
40 |
50 |
70 |
活動條款:
1.活動時間:2017.4.10-2017.6.30
2.本活動可與“整裝待發(fā) 翊起GO”活動疊加參與;
3.本活動zui終解釋權(quán)歸上海翊圣生物所有。
產(chǎn)品訂購:
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品編號 |
規(guī)格 |
價格(元) |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40802ES02 |
0.5 mL |
738.00 |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40802ES03 |
1.0 mL |
1308.00 |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40802ES08 |
5×1 mL |
4878.00 |
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規(guī)格 |
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Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細胞轉(zhuǎn)染試劑 |
40803ES70 |
200 T |
298.00 |
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/mL) |
40804ES76 |
500 μL |
180.00 |
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/mL) |
40804ES86 |
5×500μL |
500.00 |
Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40805ES01 |
100μL |
228.00 |
Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40805ES02 |
0.5 mL |
948.00 |
Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40805ES03 |
1.0 mL |
1678.00 |
Hieff TransTM懸浮細胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 |
40805ES08 |
5×1 mL |
5268.00 |