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參考價(jià) | ¥1435 |
- 14612ES 型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
10000 U | 1435元 | 99 件 可售 |
訪問(wèn)次數(shù):159更新時(shí)間:2024-05-23 12:43:25
- 聯(lián)系人:
- 曹女士
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- 地址:
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 兩周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Hifair® Super Reverse Transcriptase是通過(guò)ZymeEditor定向進(jìn)化平臺(tái)對(duì)M-MLV進(jìn)行定向改造獲得的新一代逆轉(zhuǎn)錄酶,該酶缺乏RNase H活性,其熱穩(wěn)定性大幅度提高,可耐受高達(dá)70℃的反應(yīng)溫度,非常適合具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)的RNA模板的高效逆轉(zhuǎn)錄。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 14612ES92 / 14612ES93 |
規(guī)格 | 10,000 U / 50,000 U |
單位定義 | 以Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物,在37℃,10 min內(nèi),將1 nmol的dTTP摻入為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。 |
組分信息
組分編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 14612ES92 | 14612ES93 |
14612 | Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
產(chǎn)品應(yīng)用
本產(chǎn)品適用于RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP、RNA-seq、cDNA合成等實(shí)驗(yàn),逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度最高可達(dá)70℃。
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存,有效期18個(gè)月。
使用說(shuō)明
第一鏈cDNA合成操作步驟
1. RNA變性(此步為可選步驟,RNA變性有助于打開(kāi)二級(jí)結(jié)構(gòu),可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產(chǎn)量。)
組分 | 使用量 |
RNase free ddH2O | to 13 μL |
Oligo (dT)18 (50 μM) or Random Primers (50 μM) or Gene Specific Primers (2 μM) | 1 μL or 1 μL or 1 μL |
模板RNA | Total RNA: 10 pg - 5 μg或mRNA: 10 pg - 500 ng |
65℃加熱5 min,迅速置于冰上冷卻2 min。簡(jiǎn)短離心收集反應(yīng)液后,加入下表中的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液,并輕輕吹打混勻。
2. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制(20 μL體系)
組分 | 使用量 |
上一步的反應(yīng)液 | 13 μL |
5×reaction Buffer | 4 μL |
dNTP Mix (10 mM) | 1 μL |
Hifair® Super Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 1 μL |
RNase inhibitor (40 U/µL) | 1 μL |
3. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置
溫度 | 時(shí)間 |
25℃* | 5 min |
50-70℃ | 15-30 min |
85℃** | 5 min |
*當(dāng)使用Random Primers時(shí),需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers,此步可省略。
**85℃加熱5 min,目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活,可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行設(shè)置。
逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng),也可-20℃短期保存,若需長(zhǎng)期保存,建議分裝后,于-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
1. 請(qǐng)保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈;操作時(shí)需穿戴干凈的手套、口罩;實(shí)驗(yàn)所用耗材均需保證RNase free,以防止RNase污染。
2. 所有操作均應(yīng)在冰上進(jìn)行,防止RNA降解。
3. 為保證高效率逆轉(zhuǎn)錄,建議使用高質(zhì)量的RNA樣本。
4. 本產(chǎn)品僅用作科研用途。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。