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哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件

2022-4-11  閱讀(273)

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   哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)廣泛地應(yīng)用于基因產(chǎn)物的快速表達(dá)及蛋白質(zhì)的小規(guī)模制備等方面。細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)能夠快速靈活的制備重組蛋白,細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后合適時(shí)機(jī)即能可收獲并進(jìn)行分析.在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中,重組DNA導(dǎo)入感染性強(qiáng)的細(xì)胞系以獲得目的基因暫時(shí)高水平的表達(dá)。轉(zhuǎn)染的DNA不必整合進(jìn)宿主染色體,當(dāng)有大量樣品需要在短時(shí)間內(nèi)分析時(shí),尤其是在轉(zhuǎn)染后1到4天內(nèi)收獲細(xì)胞,所得溶解產(chǎn)物用于檢測(cè)目的基因的表達(dá)時(shí),可以采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的方式。
  哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)適用于生成具有天然結(jié)構(gòu)和活性的哺乳動(dòng)物蛋白的選用表達(dá)平臺(tái),可以實(shí)現(xiàn)高水平的翻譯后加工,使蛋白質(zhì)獲得最佳功能活性,適合在最類(lèi)似生理學(xué)的環(huán)境中研究特定蛋白質(zhì)的功能。它常用于抗體和治療性蛋白質(zhì)以及人類(lèi)功能細(xì)胞分析的蛋白質(zhì)表達(dá)。結(jié)構(gòu)和性質(zhì)更穩(wěn)定:基于CHO和HEK293細(xì)胞的高密度表達(dá)。雙重驗(yàn)證:常規(guī)和高密度瞬時(shí)表達(dá)組合鑒定。適用于高難度和低表達(dá)水平蛋白。表達(dá)水平提高:產(chǎn)量提高可達(dá) 100倍,重組抗體可高達(dá) 3g/L。生產(chǎn)周期快:從序列到蛋白/抗體僅需10周。
  哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件:
  遺傳穩(wěn)定性:外源基因多次傳代后不至于丟失,易于長(zhǎng)期保存。
  細(xì)胞系特征:喪失細(xì)胞接觸抑制和錨地依賴特征,便于大規(guī)模培養(yǎng)。
  安全性能好:不合成分泌致病物質(zhì),不致癌。
  合適的標(biāo)記:便于轉(zhuǎn)化株的篩選和維持。
  生長(zhǎng)快且齊:分裂周期短,生長(zhǎng)均一,便于控制。

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