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在腫瘤相關(guān)蛋白定性研究中的應(yīng)用2021/9/7
利用shotgun的蛋白組技術(shù),可以實現(xiàn)對復(fù)雜樣品中大量蛋白質(zhì)的定性分析,進(jìn)而為闡明腫瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的相互作用、信號通路組成及蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位提供依據(jù)。Dawson等人發(fā)表于2011年《Nature》上...
在腫瘤相關(guān)蛋白定量研究中的應(yīng)用2021/9/7
利用非標(biāo)記(2D,Labelfree)及標(biāo)記(DIGE、SILAC、iTRAQ)定量的蛋白組技術(shù)與方法,可以實現(xiàn)對不同樣品中的大量蛋白進(jìn)行大規(guī)模的相對定量研究,進(jìn)而為相關(guān)具體機(jī)制的深入闡明提供基礎(chǔ)和思...
蛋白質(zhì)組學(xué)生物信息學(xué)的作用和影響2021/9/6
蛋白質(zhì)組學(xué)本身是一門大科學(xué),其產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量是十分龐大。如何將大量的蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行儲存和加工,使之轉(zhuǎn)變成可以理解的具有生物學(xué)意義的結(jié)果比如蛋白質(zhì)名稱,多肽序列,蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)差異等;如何使蛋白質(zhì)...
認(rèn)識蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定技術(shù)2021/9/6
在蛋白質(zhì)組學(xué)研究流程中,蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)是最關(guān)鍵的部分。在蛋白質(zhì)組分離技術(shù)方面還有凝膠電泳技術(shù)和色譜技術(shù)的選擇,而蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)方面卻只是生物質(zhì)譜技術(shù)(BioMassSpectrometry)一枝獨苗。...
【蛋白技術(shù)】蛋白標(biāo)簽TAG是什么高大上的東西?2021/9/3
首先,蛋白標(biāo)簽(proteintag)是什么?蛋白標(biāo)簽(proteintag)是指利用DNA體外重組技術(shù),與目的蛋白一起融合表達(dá)的一種多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表達(dá)、檢測、示蹤和純化等。蛋白標(biāo)簽大...
酵母雜交實驗——從一無所知到略知一二2021/9/3
低分文章要想逆襲,實現(xiàn)向高分文章的跳躍,就一定少不了要將細(xì)胞豪門中分子間錯綜復(fù)雜的關(guān)系屢屢清楚。為了找尋能讓自家目的蛋白榮登科研“頭條榜”的“花邊新聞”,一眾科研者可謂是操碎了心。慶幸的是,酵母雙雜交...
Get到這幾招,方可輕松搞定SDS-PAGE電泳實驗!2021/9/3
SDS-PAGE作為一個老生常談的實驗,早已廣為科研者所知。然而該實驗雖然基礎(chǔ),但是細(xì)節(jié)繁瑣,耗時長久,光是配制試劑就要花費2個小時左右。而這還只是Westernblot(WB)的第一步,也使得完成W...
【技術(shù)】提升蛋白質(zhì)樣品質(zhì)量,三招就足夠!2021/9/3
在制備中丟失的蛋白質(zhì)是永遠(yuǎn)不可能在后面的實驗中彌補回來的。蛋白質(zhì)樣品制備是許多實驗重要的第一步。為什么要進(jìn)行樣品的制備?電泳的目的不就是分離嗎?剛剛接觸時有這樣的疑問。然并卵,由于雙向電泳一般只能分辨...
真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作方法2021/9/3
一些真核蛋白在原核宿主細(xì)胞中的表達(dá)不但行之有效而且成本低廉,然而許多在細(xì)菌中合成的真核蛋白或因折疊方式不正確,或因折疊效率低下,結(jié)果使得蛋白活性低或無活性。不僅如此,真核生物蛋白的活性往往需要翻譯后加...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作方法及各方法比較2021/9/2
轉(zhuǎn)染,是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍...
尋找轉(zhuǎn)錄因子與基因啟動子的結(jié)合點2021/9/2
經(jīng)過EMSA、DNase1足跡實驗、甲基化干擾實驗、體內(nèi)足跡實驗、Chip-on-chip等方式,終于落實了轉(zhuǎn)錄因子跟基因的關(guān)系,繼續(xù)探索轉(zhuǎn)錄因子跟該基因的啟動子的結(jié)合位點在哪里?第一步,要確定到啟動...
關(guān)于lncRNA,你必須知道的秘密(內(nèi)附彩蛋)2021/9/2
lncRNA一開始被認(rèn)為是由RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄形成的轉(zhuǎn)錄副產(chǎn)物,并沒有生物學(xué)功能,只是一種轉(zhuǎn)錄噪音(遺傳噪音)。然后,現(xiàn)在越來越多的研究發(fā)現(xiàn)lncRNA有及其重要的生理功能,這些功能包括:遺傳印記(...
IncRNA系列:lncRNA的生物學(xué)功能介紹2021/9/2
(一)lncRNA對于細(xì)胞周期及凋亡的調(diào)控作用有研究報道,lncRNA可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和凋亡的方式,來影響細(xì)胞的增殖。例如,Gas5(growtharrest-specific5,非編碼RNA)在...
【專欄】一文總結(jié)LncRNA研究思路2021/9/2
lncRNA參與了X染色體沉默,基因組印記以及染色質(zhì)修飾,轉(zhuǎn)錄激活,轉(zhuǎn)錄干擾,核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過程,很多人看到lncRNA的熱點還沒有過去,經(jīng)常會問如果沒有相關(guān)的工作基礎(chǔ),如何開始lncRNA...
詳解miRNA的誕生之旅2021/9/1
miRNA是由內(nèi)源性發(fā)卡結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物衍生而來的一種長為19-25nt左右的單鏈RNA。第一,miRNA基因最先被RNApolymeraseII轉(zhuǎn)錄生成5'蓋帽和3‘加尾的初級轉(zhuǎn)錄體,稱為pri-miR...

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