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RNA轉(zhuǎn)錄的實驗方法選擇和步驟2021/8/27
正規(guī)化管理的實驗室都會給新人進(jìn)行相關(guān)技能體系的培訓(xùn)，但是被老板散養(yǎng)的研究僧或者無奈從0開始做科研的臨床醫(yī)生也不在少數(shù)。他們在初始接觸分子實驗時，手持《現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗指導(dǎo)》這本寶典，很容易被五花繚亂...
新型RNAi載體——saiRNA，更為安全的高效RNA干擾載體！2021/8/27
RNAi技術(shù)的前世今生造物真的很神奇。生物體有很多機會被來自病毒、細(xì)菌等外源性基因隨機整合到宿主細(xì)胞基因組內(nèi)。但宿主會說，“你有張良計我有過墻梯”，這個過墻梯就是RNAi：宿主細(xì)胞會對這些外源性基因d...
【RNAi與siRNA技術(shù)】基因敲除鼠的實驗建議2021/8/27
如果是在做動物實驗，而且是基因敲除鼠的實驗，那么就會做大批量的小鼠基因型鑒定試驗，來確定自己小鼠的基因型，然而，再做實驗的過程中往往會出現(xiàn)一些意想不到的結(jié)果，在這里為大家提一點點小建議。提取DNA1、...
一篇就夠了，帶你了解高通量測序！2021/8/27
說到近十年來發(fā)展最迅猛的生物技術(shù)，首先想到了高通量測序,我們研究基因組學(xué)都離不開它。目前，高通量測序已經(jīng)深入到生命科學(xué)的各個領(lǐng)域，不僅有力地推動了基礎(chǔ)研究的發(fā)展，也在逐漸征服臨床應(yīng)用。所謂的高通量測序...
避免踩坑，注意別踩DNA測序里的大坑！2021/8/27
DNA測序技術(shù)自從發(fā)明以來，作為一種重要的分子生物學(xué)手段，正在科研和臨床上得到了越來越廣泛的應(yīng)用。下面，介紹一下DNA測序里的大坑。給大家一個前車之鑒吧?？右唬盒盘査p/中斷測序信號衰減和中斷，是測序...
DNA 甲基化測序常用方法2021/8/26
隨著高通量測序技術(shù)（NGS）技術(shù)的發(fā)展，使我們能夠從全基因組水平來分析5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件，由此能夠發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)的基因組學(xué)研究所不能發(fā)現(xiàn)的東西，這就是所謂的“DNA甲基化測序”！DNA甲基...
電泳中的異?，F(xiàn)象及其原因分析2021/8/26
跑電泳是分子生物學(xué)實驗的一項基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實驗，可能或多或少，或早或晚都要跑跑電泳。有時候，跑電泳跑著跑著也會出現(xiàn)一些奇奇怪怪的現(xiàn)象。下面，談一談跑電泳的過程中可能會發(fā)生的異?，F(xiàn)象，...
【DNA 電泳】教你做果凍：瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧分享2021/8/26
果凍晶瑩剔透，口感QQ的，其實果凍的原料瓊脂糖，也是我們平時用來跑電泳的材料，瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收，DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質(zhì)粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳...
【教程】構(gòu)建載體其實一點也不難！2021/8/26
我們在研究基因的功能時，逃脫不掉的就是為了我們的實驗?zāi)康?，可能需要?gòu)建各種載體，比如表達(dá)載體，克隆載體，基因打靶載體等等。很多人在構(gòu)建載體的時候都感覺很困難，特別是對于一個剛進(jìn)入實驗室的新人來說那更是...
表達(dá)融合蛋白時，如何把兩個基因拼接起來？2021/8/26
A君：我要表達(dá)一個ras加GFP融合蛋白，怎么設(shè)計引物？安培君：你的GFP標(biāo)簽蛋白在載體里還是要你自己插進(jìn)去？A君：是我自己插進(jìn)去。安培君：你打算怎樣融合？A君：是不是這樣？酶切A基因，酶切質(zhì)粒，把A...
教你如何做分子構(gòu)建，從此邁向科研達(dá)人！2021/8/25
做過分子實驗的人都知道，要想做的有效率有質(zhì)量是很苦逼的，1個月做100個克隆那都是小case，沒點看家的本事怎么行。如果再遇到比較稀有的基因，周旋個把月，那也是家常便飯。下面就和大家分享一些載體構(gòu)建的...
學(xué)學(xué)序列拼接，想節(jié)省費用的千萬別錯過！2021/8/25
相信大家PCR之后一般要進(jìn)行測序以保證擴增序列的正確性吧？由于測序能力的限制，目前好的公司也只能保證一個反應(yīng)800bp測準(zhǔn)。如果大家的克隆片斷大于1k，那么勢必要同時測兩個反應(yīng)，然后將兩個反應(yīng)得到的序...
你真的了解 TA 克隆嗎？2021/8/25
首先，TA克隆是用于PCR產(chǎn)物的克隆和測序。原理是利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以快速地、一步到位地把PCR產(chǎn)物...
上圖！教你秒懂重組 DNA 技術(shù)常用工具酶！2021/8/25
1分子剪刀——限制性內(nèi)切酶：作用：識別特異序列，切割DNA限制酶的命名是根據(jù)細(xì)菌種類而定，以EcoRI為例：2膠水——DNA連接酶作用：跟限制性內(nèi)切酶對著干，催化DNA中相鄰核苷酸間形成磷酸二酯鍵，使...
如何解決酶切切過頭的問題？2021/8/25
之前談到了酶切切不動的問題。這一次，我們探討一下酶切的另外一端：酶切切過頭的問題。還是按照一貫的做法和思路，發(fā)現(xiàn)主要是兩個原因?qū)е碌?，解決辦法也是有的。一、酶切時間過長酶切時間過長的確有時候會對目的條...
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