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CO-IP沒有條帶的常見原因和解決的辦法2021/9/13
CO-IP并不容易做，尤其是兩個蛋白豐度低，相互作用力較弱的時候。做CO-IP經(jīng)常會遇到?jīng)]有條帶的問題。這里談?wù)凜O-IP沒有條帶的常見原因和解決的辦法，更有獨門配方獻(xiàn)上。蛋白濃度過稀絕大多數(shù)情況下，...
染色質(zhì)免疫共沉淀值得注意的15個細(xì)節(jié)2021/9/13
染色質(zhì)免疫共沉淀，又叫Chip（ChromatinImmunoprecipitation）。Chip又正好是英語里面薯片的意思。為了有趣，就叫薯片實驗吧。做薯片做了幾個月，時間不長，但深刻體會到了魔鬼...
分享染色質(zhì)免疫共沉淀的方法2021/9/13
目前，不斷發(fā)展的DNA和蛋白質(zhì)相互作用的方法和技術(shù)已經(jīng)成為研究DNA復(fù)制、重組、修復(fù)和轉(zhuǎn)錄的核心。今天跟大家分享的是花樣百出、拽酷炫的染色質(zhì)免疫共沉淀的方法！染色質(zhì)免疫共沉淀(chromatinimm...
ELISA實驗操作中值得關(guān)注的細(xì)節(jié)大盤點2021/9/10
酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）因其具有敏感性高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于臨床檢測中的各種抗原和抗體的測定。盡管ELISA操作簡單，但是小實驗里也蘊含著大文章，ELISA操作各個環(huán)節(jié)對實驗的檢測效果...
ELISA實驗中常遇到的問題、產(chǎn)生的原因與解決辦法2021/9/10
酶聯(lián)免疫吸附實驗，簡稱為ELISA。ELISA實驗是一種非常經(jīng)典的免疫學(xué)實驗。雖然歷史非常悠久了，但是還是不斷地在臨床和基礎(chǔ)研究中得到應(yīng)用。其主要用于：免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位；研究抗酶抗體的合...
一句話知曉實驗方法怎么選？2021/9/8
在分子生物學(xué)實驗室里的玩法，無非就是用某種特定的刺激物（如細(xì)胞活素）去刺激一些細(xì)胞或組織，讓它們high起來，然后分析細(xì)胞對這些外源刺激物的反應(yīng)，檢測細(xì)胞內(nèi)哪條信號通路被激活或失活，或者什么蛋白被分泌...
免疫組化（IHC）的10大實戰(zhàn)經(jīng)驗（附臨床上常用免疫組化指標(biāo)）2021/9/8
1.把要做的切片先分好，做幾個抗體可分幾盒，不正常組織與正常組織要分開。其余做預(yù)實驗用。2.選擇實驗要做的抗體時，要結(jié)合他們的正常組織和癌組織的分別表達(dá)率。3.試劑盒的選擇可結(jié)合生物素強(qiáng)弱的情況。如：...
免疫組化之8大疑難解答2021/9/8
IHC常見的8大疑問Q1：冰凍切片和石蠟切片如何取材？Answer:冰凍切片取材可分為兩種情況：1）動物灌流固定：如小鼠心臟灌流，首先采用預(yù)冷的1×PBS灌流沖洗直至血液全部放出，隨后灌注4%PFA直...
免疫組化結(jié)果分析應(yīng)該注意的一些事項和技巧2021/9/8
很多時候，我們千辛萬苦地染出了一張張漂亮的免疫組化片子。但是卻不知道如何正確地分析，得出理想的結(jié)果。這實在是一件憾事。其實，免疫組化結(jié)果分析的protocol教科書和實驗手冊上面都有。今天主要談?wù)剳?yīng)該...
如何避免掉進(jìn)做免疫組化時導(dǎo)致非特異性染色的八大坑？2021/9/8
全國江山一片紅，這可不是閱兵日的朋友圈，而是在做免疫組化啊！好好的一張片子染得臟臟的。一下子整個人都不好了。這里，總結(jié)出了導(dǎo)致非特異性染色的八個大坑，以及避免掉坑里的一些做法。皆是獨門絕技，不要眨眼咯...
發(fā)高分 SCI，不會免疫組化（IHC）怎么行？2021/9/7
相信大家對IHC一定不陌生，世界那么大，實驗方法層出不窮，但是免疫組化卻是經(jīng)典中的經(jīng)典，想看看別的高大上的技術(shù)？不急，我們先來復(fù)習(xí)復(fù)習(xí)免疫組化。免疫組化，免疫組織化學(xué)技術(shù)（immunohistoche...
基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域的應(yīng)用前景2021/9/7
基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)方法具有的強(qiáng)大蛋白質(zhì)定性、定量和蛋白翻譯后修飾分析能力，其研究模式與方法已成為蛋白質(zhì)層面上研究腫瘤學(xué)研究的主流方案，并已取得了大量的研究成果。利用差異比較蛋白質(zhì)組學(xué)的方法對不同...
腫瘤相關(guān)蛋白翻譯后修飾研究中的應(yīng)用2021/9/7
腫瘤發(fā)生與發(fā)展過程中，除了表達(dá)差異，很多蛋白質(zhì)的功能受到翻譯后修飾的調(diào)控。利用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，可對腫瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的修飾進(jìn)行的定量及定性分析，為激酶信號通路、組蛋白修飾等研究提供基礎(chǔ)。Kim等在201...
在腫瘤相關(guān)蛋白定性研究中的應(yīng)用2021/9/7
利用shotgun的蛋白組技術(shù)，可以實現(xiàn)對復(fù)雜樣品中大量蛋白質(zhì)的定性分析，進(jìn)而為闡明腫瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的相互作用、信號通路組成及蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位提供依據(jù)。Dawson等人發(fā)表于2011年《Nature》上...
在腫瘤相關(guān)蛋白定量研究中的應(yīng)用2021/9/7
利用非標(biāo)記（2D，Labelfree）及標(biāo)記（DIGE、SILAC、iTRAQ）定量的蛋白組技術(shù)與方法，可以實現(xiàn)對不同樣品中的大量蛋白進(jìn)行大規(guī)模的相對定量研究，進(jìn)而為相關(guān)具體機(jī)制的深入闡明提供基礎(chǔ)和思...
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