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免疫組化之8大疑難解答2021/9/8
IHC常見的8大疑問Q1：冰凍切片和石蠟切片如何取材？Answer:冰凍切片取材可分為兩種情況：1）動物灌流固定：如小鼠心臟灌流，首先采用預冷的1×PBS灌流沖洗直至血液全部放出，隨后灌注4%PFA直...
免疫組化結果分析應該注意的一些事項和技巧2021/9/8
很多時候，我們千辛萬苦地染出了一張張漂亮的免疫組化片子。但是卻不知道如何正確地分析，得出理想的結果。這實在是一件憾事。其實，免疫組化結果分析的protocol教科書和實驗手冊上面都有。今天主要談談應該...
如何避免掉進做免疫組化時導致非特異性染色的八大坑？2021/9/8
全國江山一片紅，這可不是閱兵日的朋友圈，而是在做免疫組化??！好好的一張片子染得臟臟的。一下子整個人都不好了。這里，總結出了導致非特異性染色的八個大坑，以及避免掉坑里的一些做法。皆是獨門絕技，不要眨眼咯...
發(fā)高分 SCI，不會免疫組化（IHC）怎么行？2021/9/7
相信大家對IHC一定不陌生，世界那么大，實驗方法層出不窮，但是免疫組化卻是經(jīng)典中的經(jīng)典，想看看別的高大上的技術？不急，我們先來復習復習免疫組化。免疫組化，免疫組織化學技術（immunohistoche...
基于質譜技術的蛋白質組學在基礎醫(yī)學科研領域的應用前景2021/9/7
基于質譜技術的蛋白質組學方法具有的強大蛋白質定性、定量和蛋白翻譯后修飾分析能力，其研究模式與方法已成為蛋白質層面上研究腫瘤學研究的主流方案，并已取得了大量的研究成果。利用差異比較蛋白質組學的方法對不同...
腫瘤相關蛋白翻譯后修飾研究中的應用2021/9/7
腫瘤發(fā)生與發(fā)展過程中，除了表達差異，很多蛋白質的功能受到翻譯后修飾的調(diào)控。利用蛋白質組學的方法，可對腫瘤相關蛋白質的修飾進行的定量及定性分析，為激酶信號通路、組蛋白修飾等研究提供基礎。Kim等在201...
在腫瘤相關蛋白定性研究中的應用2021/9/7
利用shotgun的蛋白組技術，可以實現(xiàn)對復雜樣品中大量蛋白質的定性分析，進而為闡明腫瘤相關蛋白質的相互作用、信號通路組成及蛋白質亞細胞定位提供依據(jù)。Dawson等人發(fā)表于2011年《Nature》上...
在腫瘤相關蛋白定量研究中的應用2021/9/7
利用非標記（2D，Labelfree）及標記（DIGE、SILAC、iTRAQ）定量的蛋白組技術與方法，可以實現(xiàn)對不同樣品中的大量蛋白進行大規(guī)模的相對定量研究，進而為相關具體機制的深入闡明提供基礎和思...
蛋白質組學生物信息學的作用和影響2021/9/6
蛋白質組學本身是一門大科學，其產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量是十分龐大。如何將大量的蛋白質組學數(shù)據(jù)進行儲存和加工，使之轉變成可以理解的具有生物學意義的結果比如蛋白質名稱，多肽序列，蛋白質結構，蛋白質差異等；如何使蛋白質...
認識蛋白質組學鑒定技術2021/9/6
在蛋白質組學研究流程中，蛋白質鑒定技術是最關鍵的部分。在蛋白質組分離技術方面還有凝膠電泳技術和色譜技術的選擇，而蛋白質鑒定技術方面卻只是生物質譜技術（BioMassSpectrometry）一枝獨苗。...
【蛋白技術】蛋白標簽TAG是什么高大上的東西？2021/9/3
首先，蛋白標簽（proteintag）是什么？蛋白標簽（proteintag）是指利用DNA體外重組技術，與目的蛋白一起融合表達的一種多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表達、檢測、示蹤和純化等。蛋白標簽大...
酵母雜交實驗——從一無所知到略知一二2021/9/3
低分文章要想逆襲，實現(xiàn)向高分文章的跳躍，就一定少不了要將細胞豪門中分子間錯綜復雜的關系屢屢清楚。為了找尋能讓自家目的蛋白榮登科研“頭條榜”的“花邊新聞”，一眾科研者可謂是操碎了心。慶幸的是，酵母雙雜交...
Get到這幾招，方可輕松搞定SDS-PAGE電泳實驗！2021/9/3
SDS-PAGE作為一個老生常談的實驗，早已廣為科研者所知。然而該實驗雖然基礎，但是細節(jié)繁瑣，耗時長久，光是配制試劑就要花費2個小時左右。而這還只是Westernblot（WB）的第一步，也使得完成W...
【技術】提升蛋白質樣品質量，三招就足夠！2021/9/3
在制備中丟失的蛋白質是永遠不可能在后面的實驗中彌補回來的。蛋白質樣品制備是許多實驗重要的第一步。為什么要進行樣品的制備？電泳的目的不就是分離嗎？剛剛接觸時有這樣的疑問。然并卵，由于雙向電泳一般只能分辨...
真核細胞轉染操作方法2021/9/3
一些真核蛋白在原核宿主細胞中的表達不但行之有效而且成本低廉，然而許多在細菌中合成的真核蛋白或因折疊方式不正確，或因折疊效率低下，結果使得蛋白活性低或無活性。不僅如此，真核生物蛋白的活性往往需要翻譯后加...
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