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原代細胞培養(yǎng)入門2024/4/22
大家好！這篇文章是關(guān)于原代培養(yǎng)的入門知識，向剛?cè)腴T的同學科普這個實驗的基礎(chǔ)。包括以下內(nèi)容：原代培養(yǎng)的概念和流程分離組織的操作和注意事項解離組織獲取細胞的三種常見方法原代培養(yǎng)是指細胞分離之后至第一次傳代...
流式細胞術(shù)實驗常見問題分析2024/4/22
流式細胞技術(shù)（FlowCytometry,簡稱FCM）是一種高效的方法，用于分析和收集細胞懸液中的單個細胞。FCM的優(yōu)勢在于其速度快、結(jié)果客觀，并且具有重要的統(tǒng)計意義。它能夠處理復雜的樣本，同時收集多...
何時用瓶皿培養(yǎng)，何時用孔板培養(yǎng)2024/4/18
細胞的體外培養(yǎng)需要依附在人工附著物上，大多數(shù)脊椎動物細胞在人工附著物上會呈現(xiàn)為單層生長的狀態(tài)。所謂的人工附著物，就是常見的多孔板、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿。用什么類型的附著物來培養(yǎng)細胞，是有什么依據(jù)的呢？這一期...
ELISA實驗經(jīng)驗總結(jié)2024/4/18
前置知識ELISA（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種常用的實驗技術(shù)，用于檢測和定量分析樣品中特定抗原或抗體的存在。ELISA是基于免疫學原理的一...
要做好CCK-8實驗，這三個重要環(huán)節(jié)請注意2024/4/17
在做細胞基礎(chǔ)實驗時，必要的一步就是需要探究清楚細胞的增殖變化和毒性耐藥變化情況，為下一步實驗做準備。我們在做CCK-8增殖和毒性實驗中常常會遇到一下幾個問題：1.細胞鋪板問題2.給CCK-8的方式問題...
細胞凍存的實驗步驟＆注意事項2024/4/17
細胞凍存實驗用于保護細胞免受損傷，以便在需要的時候重新復蘇和使用，對于保存少有的細胞資源、制備細胞庫、研究細胞生物學等方面具有重要意義。實驗步驟：1.細胞凍存液提前配置：凍存液配置比例根據(jù)實驗習慣即可...
三羧酸循環(huán)與銅死亡2024/4/15
銅死亡背景2022年3月在Science期刊發(fā)表的CopperinducescelldeathbytargetinglipoylatedTCAcycleproteins揭示了銅離子過載會導致細胞死亡，...
細胞消化和傳代經(jīng)驗分享2024/4/10
一、準備工作試劑準備：培養(yǎng)細胞所需的培養(yǎng)基、胰酶、胎牛血清（簡稱FBS）、雙抗（簡稱P/S）、PBS緩沖液等從4°C的冰箱中取出，于室溫條件下放置至恢復室溫。耗材準備：50ml離心管、15ml離心管及...
Dot blot法鑒定分泌型蛋白表達2024/4/10
實驗原理：Dotblot是一種半定量的蛋白質(zhì)或核酸檢測方法，其原理是將待測物直接滴于固相載體上，然后通過特異性抗體或探針與待測物結(jié)合，最終通過可視化方法來檢測目標分子的存在與否。溶液配置：操作步驟：（...
CHO-K1倉鼠卵巢細胞株的培養(yǎng)方法2024/4/10
中國倉鼠卵巢（Chinesehamsterovary,CHO）細胞是第一個被美國FDA、歐盟EMA和中國CFDA認可的用于生物制藥領(lǐng)域的生產(chǎn)細胞，已廣泛應用于各種治療性蛋白質(zhì)藥物的大規(guī)模制備，包括重組...
小鼠脾臟native CD4+ T細胞的分離和原代培養(yǎng)2024/4/9
在生物醫(yī)學實驗中，細胞培養(yǎng)是基礎(chǔ)中的基礎(chǔ)，大部分實驗只需要用到相關(guān)細胞系的培養(yǎng)，但對實驗動物原代細胞的培養(yǎng)也是非常重要的。脾臟T細胞的分離和培養(yǎng)就是免疫學領(lǐng)域的一種非?；A(chǔ)和重要實驗方法。本文將詳細探...
馬松染色的實驗步驟和注意事項2024/4/1
馬松（Masson）染色是一種用于可視化組織纖維和炎性因子的染色方法。該技術(shù)充分利用了不同組織成分對陰離子燃料滲透性的差異。此法多用于觀察病變組織中纖維結(jié)締組織的增生和分布,纖維素腫瘤與肌源性腫瘤的鑒...
克隆形成實驗的原理及實驗步驟2024/3/27
一、背景介紹克隆形成實驗是研究細胞存活率并探討單個細胞增殖潛能的有效方法之一。即在體外培養(yǎng)環(huán)境下，通過使單個細胞經(jīng)過連續(xù)分裂增殖至少6代，形成的細胞集群被稱為克隆或集落。每個克隆的尺寸通常在0.3-1...
神奇的生物素biotin2024/3/26
1.什么是生物素？物素分子量為244.31，分子中有兩個環(huán)狀結(jié)構(gòu)，其中I環(huán)為咪唑酮環(huán)，是與親合素結(jié)合的主要部位；II環(huán)為噻唑環(huán)，上有一戊酸側(cè)鏈，其末端羧基是結(jié)合抗體和其他生物大分子的結(jié)構(gòu)。利用生物素的...
TRIzol提取細胞RNA的經(jīng)驗分享2024/3/26
一、TRIzol法提取RNA的原理Trizol是一種廣泛適用于多種樣品總RNA提取的試劑，例如人、動物、植物和細菌、血液等。一般提取的總RNA沒有DNA和蛋白質(zhì)污染，常用于RT-qPCR、mRNA純化...
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