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細(xì)胞共培養(yǎng)實驗步驟、技巧，Transwell or Millicell?2024/4/23
實驗?zāi)康模貉芯績煞N或三種細(xì)胞之間的相互作用實驗簡介：共培養(yǎng)是通過分別在插入式細(xì)胞培養(yǎng)小室內(nèi)外培養(yǎng)兩種或以上細(xì)胞，來研究細(xì)胞之間的相互作用，例如不同CD亞型的免疫細(xì)胞、免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞、飼養(yǎng)層和干細(xì)胞...
原位雜交實驗流程2024/4/23
原位雜交組織（或細(xì)胞）化學(xué)簡稱原位雜交，屬于固相分子雜交的范疇，它是用標(biāo)記的DNA或RNA為探針，在原位檢測組織細(xì)胞內(nèi)特定核酸序列的方法。一、合成RNA探針1、設(shè)計探針引物RNA探針長度500bp最為...
Lipofectamine ™ RNAiMAX轉(zhuǎn)染2024/4/23
轉(zhuǎn)染是實驗過程中常用的技術(shù)操作，通俗來說，常見的轉(zhuǎn)染即為把某種功能性質(zhì)粒轉(zhuǎn)到細(xì)胞中去，通過轉(zhuǎn)染試劑的作用在經(jīng)過一段時間后，收集細(xì)胞通過WB、qpcr等來檢測質(zhì)粒是否正常發(fā)揮作用來達(dá)到我們實驗的某種需求...
如何提高DNA濃度/純度測定的準(zhǔn)確性？2024/4/23
分子生物學(xué)實驗中經(jīng)常需要對樣品進(jìn)行濃度和純度的測定，它相當(dāng)于一種質(zhì)控，以此來確保下游實驗的結(jié)果可靠。常用的DNA濃度/純度測定設(shè)備是紫外分光光度計，它的原理是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)...
原代細(xì)胞培養(yǎng)入門2024/4/22
大家好！這篇文章是關(guān)于原代培養(yǎng)的入門知識，向剛?cè)腴T的同學(xué)科普這個實驗的基礎(chǔ)。包括以下內(nèi)容：原代培養(yǎng)的概念和流程分離組織的操作和注意事項解離組織獲取細(xì)胞的三種常見方法原代培養(yǎng)是指細(xì)胞分離之后至第一次傳代...
流式細(xì)胞術(shù)實驗常見問題分析2024/4/22
流式細(xì)胞技術(shù)（FlowCytometry,簡稱FCM）是一種高效的方法，用于分析和收集細(xì)胞懸液中的單個細(xì)胞。FCM的優(yōu)勢在于其速度快、結(jié)果客觀，并且具有重要的統(tǒng)計意義。它能夠處理復(fù)雜的樣本，同時收集多...
何時用瓶皿培養(yǎng)，何時用孔板培養(yǎng)2024/4/18
細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要依附在人工附著物上，大多數(shù)脊椎動物細(xì)胞在人工附著物上會呈現(xiàn)為單層生長的狀態(tài)。所謂的人工附著物，就是常見的多孔板、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿。用什么類型的附著物來培養(yǎng)細(xì)胞，是有什么依據(jù)的呢？這一期...
ELISA實驗經(jīng)驗總結(jié)2024/4/18
前置知識ELISA（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種常用的實驗技術(shù)，用于檢測和定量分析樣品中特定抗原或抗體的存在。ELISA是基于免疫學(xué)原理的一...
要做好CCK-8實驗，這三個重要環(huán)節(jié)請注意2024/4/17
在做細(xì)胞基礎(chǔ)實驗時，必要的一步就是需要探究清楚細(xì)胞的增殖變化和毒性耐藥變化情況，為下一步實驗做準(zhǔn)備。我們在做CCK-8增殖和毒性實驗中常常會遇到一下幾個問題：1.細(xì)胞鋪板問題2.給CCK-8的方式問題...
細(xì)胞凍存的實驗步驟＆注意事項2024/4/17
細(xì)胞凍存實驗用于保護(hù)細(xì)胞免受損傷，以便在需要的時候重新復(fù)蘇和使用，對于保存少有的細(xì)胞資源、制備細(xì)胞庫、研究細(xì)胞生物學(xué)等方面具有重要意義。實驗步驟：1.細(xì)胞凍存液提前配置：凍存液配置比例根據(jù)實驗習(xí)慣即可...
三羧酸循環(huán)與銅死亡2024/4/15
銅死亡背景2022年3月在Science期刊發(fā)表的CopperinducescelldeathbytargetinglipoylatedTCAcycleproteins揭示了銅離子過載會導(dǎo)致細(xì)胞死亡，...
細(xì)胞消化和傳代經(jīng)驗分享2024/4/10
一、準(zhǔn)備工作試劑準(zhǔn)備：培養(yǎng)細(xì)胞所需的培養(yǎng)基、胰酶、胎牛血清（簡稱FBS）、雙抗（簡稱P/S）、PBS緩沖液等從4°C的冰箱中取出，于室溫條件下放置至恢復(fù)室溫。耗材準(zhǔn)備：50ml離心管、15ml離心管及...
Dot blot法鑒定分泌型蛋白表達(dá)2024/4/10
實驗原理：Dotblot是一種半定量的蛋白質(zhì)或核酸檢測方法，其原理是將待測物直接滴于固相載體上，然后通過特異性抗體或探針與待測物結(jié)合，最終通過可視化方法來檢測目標(biāo)分子的存在與否。溶液配置：操作步驟：（...
CHO-K1倉鼠卵巢細(xì)胞株的培養(yǎng)方法2024/4/10
中國倉鼠卵巢（Chinesehamsterovary,CHO）細(xì)胞是第一個被美國FDA、歐盟EMA和中國CFDA認(rèn)可的用于生物制藥領(lǐng)域的生產(chǎn)細(xì)胞，已廣泛應(yīng)用于各種治療性蛋白質(zhì)藥物的大規(guī)模制備，包括重組...
小鼠脾臟native CD4+ T細(xì)胞的分離和原代培養(yǎng)2024/4/9
在生物醫(yī)學(xué)實驗中，細(xì)胞培養(yǎng)是基礎(chǔ)中的基礎(chǔ)，大部分實驗只需要用到相關(guān)細(xì)胞系的培養(yǎng)，但對實驗動物原代細(xì)胞的培養(yǎng)也是非常重要的。脾臟T細(xì)胞的分離和培養(yǎng)就是免疫學(xué)領(lǐng)域的一種非常基礎(chǔ)和重要實驗方法。本文將詳細(xì)探...
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