D-熒光素鉀鹽應用全解析，生物活體成像實驗更清晰！

D-Luciferin potassium salt中文名為D-螢光素鉀鹽，是受歡迎和通用的生物發(fā)光底物。螢光素酶/螢光素生物發(fā)光系統(tǒng)在螢火蟲(Photinus pyralis)和其他幾種甲蟲中被發(fā)現(xiàn)。熒光素酶通過二氧酮中間體氧化ATP活化的熒光素。螢火蟲熒光素酶通過ATP依賴的氧化熒光素產(chǎn)生光。該反應產(chǎn)生的 560nm 化學發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達到峰值，當熒光素和ATP過量時，光輸出與熒光素酶活性成正比。螢火蟲熒光素酶長期以來一直被偶聯(lián)到抗體和使用熒光素作為檢測底物的免疫分析標簽。與辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶相比，熒光素酶對化學修飾的耐受性較差。在科研領域，D-Luciferin廣泛應用于基于螢火蟲螢光素酶的報告基因檢測和動物的活體成像實驗。此外，熒光素酶的另一個重要用途是衛(wèi)生監(jiān)測領域。熒光素酶/熒光素系統(tǒng)可用于檢測污染，因為所有生物體中都存在ATP來產(chǎn)生發(fā)光。這種類型的ATP生物發(fā)光的主要應用是通過測試食品加工廠的表面來確定設備或產(chǎn)品是否受到污染來保證質(zhì)量。

體外實驗方法
1.100×螢火蟲熒光素酶底物收到后，若需要多次實驗請分裝，避光保存在-20℃，避免反復凍融；

2.準備過程：在預熱過的培養(yǎng)基中制備0.5-1 mM的D-熒光素工作溶液；

3.細胞實驗：正常培養(yǎng)的細胞棄去培養(yǎng)基，加入熒光素工作溶液，37°C下孵育細胞5-10分鐘進行成像實驗。

體內(nèi)成像實驗

1.在DPBS中制備15 mg/mL的熒光素原液，0.22 μm膜過濾保存，現(xiàn)配先用，若保存需避光保存在-20℃，避免反復凍融。

2.腹腔注射用量：根據(jù)動物體重參考用量為150 mg/kg（或10 μL/g上述制備的原液），參考時間為10-15 min后進行成像。實際操作建議應該對每個動物模型進行熒光素的動力學研究，以確定峰值信號時間。

逐典D-螢光素鉀鹽優(yōu)勢

1.高純度（HPLC驗證純度≥99%)

2.優(yōu)異的生物發(fā)光性能

3.高溶解度（>40mg/ml)

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