HTRF HUMAN IL8 KIT-Revvity

檢測原理：
細(xì)胞上清液、樣本或標(biāo)準(zhǔn)品直接分配到檢測板中，通過 HTRF® 試劑進(jìn)行檢測（384 孔低體積白色板或 Revvity 低體積 96 孔板，20 微升）。用 HTRF 供體和受體標(biāo)記的抗體預(yù)先混合，并在一個(gè)分配步驟中加入，以進(jìn)一步簡化檢測程序。通過簡單地按比例調(diào)整每次添加的體積，該檢測可以擴(kuò)展到 1536 孔格式。

檢測數(shù)據(jù)分析：
四參數(shù)邏輯（4PL）曲線通常被推薦用于擬合 ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線。這種回歸能夠在比線性分析更寬的濃度范圍內(nèi)準(zhǔn)確測量未知樣本，使其非常適合用于分析細(xì)胞因子釋放等生物系統(tǒng)。

Revvity 還與 Myassays 合作，以幫助你進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

檢測細(xì)節(jié)：
人 IL8 試劑盒的技術(shù)規(guī)格

分析性能：
批內(nèi)和批間

稀釋線性：
從這些實(shí)驗(yàn)中獲得的出色的回收率百分比顯示了該檢測的良好線性。

加標(biāo)回收：
將相同量的重組細(xì)胞因子添加到兩種不同的血清樣本中，并將從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得的一組響應(yīng)與計(jì)算出的預(yù)期值進(jìn)行比較。發(fā)現(xiàn)約 100% 的回收率驗(yàn)證了用于該檢測的樣本基質(zhì)。

檢測驗(yàn)證：
用 JTE607 抑制 THP1 細(xì)胞中 IL8 的分泌：
以每孔 100,000 個(gè)細(xì)胞的密度接種 THP1 細(xì)胞，用不斷增加濃度的 JTE607 孵育 18 小時(shí)，然后用 2 µg/mL 的 LPS 刺激 3 小時(shí)。然后將 16 µL 的上清液轉(zhuǎn)移到白色檢測板（384 孔低體積）中，用人 IL8 檢測進(jìn)行分析。

LPS 刺激的外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）中 IL8 的分泌：

以每孔 50,000、100,000、200,000 和 400,000 個(gè)細(xì)胞的密度接種 PBMC，用不斷增加濃度的 LPS（0、0.02、0.2、2 µg/mL）刺激 3 小時(shí)。然后將 16 µL 的上清液轉(zhuǎn)移到白色檢測板（384 孔低體積）中，用人 IL8 檢測進(jìn)行分析。