10108ES03 2×Hieff® HotStart PCR Genotyping Master
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào) 10108ES03
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/7 13:15:39
- 訪問次數(shù) 512
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 mL |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 10108ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 本產(chǎn)品主要應(yīng)用于小鼠基因型鑒定。 |
產(chǎn)品描述
2×Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)是即用型的PCR預(yù)混合溶液,含有Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase,dNTP以及優(yōu)化的緩沖體系,只需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)的操作步驟,可以高通量操作并提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase是經(jīng)過配體修飾的熱穩(wěn)定 Taq DNA Polymerase,該配體可以隨溫度變化來(lái)調(diào)節(jié) DNA 聚合酶活性。在室溫下酶活性被 封閉,經(jīng)95°C加熱后活性才被釋放。Hieff® HotStart DNA Polymerase 的激活時(shí)間只需要 2-3 min,兼容現(xiàn)有的 PCR 程序。本產(chǎn)品防止了在樣品準(zhǔn)備及反應(yīng)升溫階段產(chǎn)生非特異擴(kuò)增,可以有效地進(jìn)行基因分型實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品應(yīng)用
本產(chǎn)品主要應(yīng)用于小鼠基因型鑒定。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測(cè):20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII,37°C下孵育4 h,DNA的電泳譜帶無(wú)變化。
核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè):20 μL本品和1 μg λDNA,37°C溫育4 h,DNA的電泳譜帶無(wú)變化。
大腸桿菌殘留DNA檢測(cè): 50 μL體系中,加入25 μL本品,以無(wú)菌ddH2O為模板,擴(kuò)增E.coil 16s rDNA 基因。30個(gè)循環(huán)后擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1% 瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,無(wú)擴(kuò)增條帶。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20°C保存,有效期2年。
注意事項(xiàng)
1)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!
PCR反應(yīng)體系(50 μL)
組分 | 體積 | 終濃度 |
ddH2O | to 50 μL | - |
模板DNA | 適量 | - |
Primer正向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
2×Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye) | 25 μL | 1× |
【注】:針對(duì)不同模板的最佳反應(yīng)濃度有所不同,下表為50 μL反應(yīng)體系推薦模板使用量,僅供參考。
模板種類 | 模板使用量 |
基因組DNA | 50 ng-100 ng |
質(zhì)粒DNA | 100 pg-20 ng |
cDNA | 1-5 μL (不超過反應(yīng)體系的1/10) |
PCR擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95°C | 5 min | 1 |
變性 | 95°C | 30 sec | 35 |
退火 | 50-60°C | 30 sec | |
延伸 | 72°C | 30 sec/kb | |
終延伸 | 72°C | 10 min | 1 |
【注】:
1)退火溫度和時(shí)間:退火溫度推薦使用50-60°C。退火時(shí)間推薦設(shè)置為30 sec,可以在20-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)??筛鶕?jù)需要,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度和時(shí)間。
2)延伸溫度和時(shí)間:溫度推薦使用72°C。時(shí)間推薦使用30-60 sec/kb。
3)擴(kuò)增產(chǎn)物:請(qǐng)將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物放置于-20°C保存,防止DNA發(fā)生降解。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Hieff® Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 | 10101ES80/90 | 1000/5×1000 U |
2×Hieff® PCR Master Mix (With Dye) HOT | 10102ES03/08 | 1/5×1 mL |
2×Hieff® PCR Master Mix (No Dye) | 10103ES03/08 | 1/5×1 mL |
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye) HOT | 10106ES03/08 | 1/5×1 mL |
2×Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液 | 10136ES03/08 | 1/5×1 mL |
HB211220