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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生物試劑>60210ES 嘌呤霉素鹽酸鹽

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60210ES 嘌呤霉素鹽酸鹽

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企業(yè)簡介

翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動(dòng),聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料,從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè),通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑,成為國內(nèi)少數(shù)同時(shí)覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?;a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè),產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。



主營業(yè)務(wù)


公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗(yàn),構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來,公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種,涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類的生物試劑,能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報(bào)告基因檢測系列等多個(gè)品類的生物試劑,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。

發(fā)展歷程



榮譽(yù)資質(zhì)


翌圣生物通過申請商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場競爭力,不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日,公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(xiàng)(其中發(fā)明14項(xiàng)、實(shí)用新型1項(xiàng)、外觀設(shè)計(jì)3項(xiàng))和45項(xiàng)與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán),擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊商標(biāo)權(quán)37項(xiàng)以及4項(xiàng)境外注冊商標(biāo),是國家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。

榮譽(yù)風(fēng).jpg


創(chuàng)新平臺(tái)


經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新,翌圣生物積極開展“產(chǎn)學(xué)研”合作,與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點(diǎn)研究基地的江南大學(xué)展開合作,優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ),建立了六大核心技術(shù)平臺(tái)——雙向分子酶理性設(shè)計(jì)與定向進(jìn)化平臺(tái)、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺(tái)、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺(tái)、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺(tái)、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺(tái)和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺(tái),目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項(xiàng)核心技術(shù),打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑,覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。


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工業(yè)化生產(chǎn)


翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營的工業(yè)化生產(chǎn)基地,配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動(dòng)包裝線。同時(shí),公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證,從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲(chǔ)運(yùn)輸?shù)葘ιa(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督,保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性,竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。

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客戶服務(wù)


翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時(shí)的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可,為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系,公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。

圖片222.jpg

公司企業(yè)文化



使命

幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值,讓世界更健康更快樂

愿景

成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
具備驅(qū)動(dòng)產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍


價(jià)值觀


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翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值,讓世界更健康更快樂”的使命,專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級,不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域,為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù),助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時(shí),翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國際化戰(zhàn)略,繼續(xù)布局和拓展海外市場,為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。










分子生物學(xué)試劑,細(xì)胞生物學(xué)試劑,免疫學(xué)試劑,蛋白組學(xué)試劑等

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,制藥

產(chǎn)品簡介

 

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素,通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死革蘭氏陽性菌,各種動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。作用機(jī)制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3′末端的類似物,能夠與核糖體的A位點(diǎn)結(jié)合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素同A位點(diǎn)結(jié)合后,不會(huì)參與隨后的任何反應(yīng),從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素產(chǎn)生菌Streptomyces alboniger內(nèi)發(fā)現(xiàn)的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAC),賦予機(jī)體對嘌呤霉素產(chǎn)生抗性。這一特性如今普遍應(yīng)用于篩選特定攜帶pac基因質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

嘌呤霉素在細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選中的普遍應(yīng)用與慢病毒載體的特性有關(guān),現(xiàn)在商業(yè)化的慢病毒載體多數(shù)都攜帶pac基因。在某些特定情況下,嘌呤霉素亦可以用來篩選轉(zhuǎn)化攜帶pac基因質(zhì)粒的大腸桿菌菌株。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號

60210ES25/60210ES60/60210ES72/60210ES76/60210ES80

規(guī)格

25 mg/100 mg/250 mg/500 mg/1 g

CAS號(CAS NO.)

58-58-2

分子式(Molecular Fomular)

C22H29N7O5·2HCl

分子量(Molecular Weight)

544.43 g/mol

純度(Purity)

≥98%

外觀(Appearance)

白色至米白色粉末

結(jié)構(gòu)(Structure)

 

組分信息

 

組分名稱

60210ES25

60210ES60

60210ES72

60210ES76

60210ES80

規(guī)格

25 mg 

100 mg

250 mg

500 mg

1 g

 

儲(chǔ)存條件

 

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用說明

 

1. 建議使用濃度

哺乳動(dòng)物細(xì)胞:1-10 μg/mL,最佳濃度需要?dú)缜€來確定。

大腸桿菌:LB瓊脂培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化pac基因的大腸桿菌,使用濃度為125 μg/mL。

【注】:使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩(wěn)轉(zhuǎn)株需要精確的pH值調(diào)節(jié),而且受宿主細(xì)胞本身的影響。

2.溶解方法

用蒸餾水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/mL的母液,經(jīng)0.22 μm濾膜過濾除菌后分裝于-25~-15℃凍存;也可溶于甲醇,配制成10 mg/mL的儲(chǔ)存液。

3. 嘌呤霉素殺滅曲線的確定(以shRNA轉(zhuǎn)染或者慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)為例)

嘌呤霉素有效篩選濃度跟細(xì)胞類型、生長狀態(tài)、細(xì)胞密度、細(xì)胞代謝情況及細(xì)胞所處細(xì)胞周期位置等有關(guān)。為了篩選到穩(wěn)定表達(dá)的shRNA細(xì)胞株,確定殺死未轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的濃度嘌呤霉素至關(guān)重要。建議初次做實(shí)驗(yàn)的客戶一定要建立適合自身實(shí)驗(yàn)體系的殺死曲線(kill curve)。

1)Day 1:24孔板內(nèi)5~8×104 cells/孔的密度鋪板,鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn)。37℃細(xì)胞孵育過夜。

2)Day 2:①準(zhǔn)備篩選培養(yǎng)基:含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基(如0-15 μg/mL,至少5個(gè)梯度);②往孵育過夜后的細(xì)胞內(nèi)更換新鮮配制的篩選培養(yǎng)基;之后37℃孵育細(xì)胞。

3)Day 4:更換新鮮的篩選培養(yǎng)基,并觀察細(xì)胞存活率。

4)根據(jù)細(xì)胞的生長狀態(tài),約2-3天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。

5)每日監(jiān)測細(xì)胞,觀察存活細(xì)胞率,從而確定抗生素篩選開始4-6天內(nèi)有效殺死非轉(zhuǎn)染或所有非轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的藥物濃度。

4. 哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的篩選

等轉(zhuǎn)染含有pac基因的質(zhì)粒后,細(xì)胞在含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基中增殖,以篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子。

1)細(xì)胞轉(zhuǎn)染48 h后,將細(xì)胞(原樣或稀釋)置于含有適當(dāng)濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

【注】:當(dāng)細(xì)胞處于分裂活躍期時(shí),抗生素作用。細(xì)胞過于密集,抗生素產(chǎn)生的效力會(huì)明顯下降。最好進(jìn)行細(xì)胞分盤使其密度不超過25%。

2)每隔2-3天,移除和更換含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基。

3)篩選7天后評估細(xì)胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時(shí)間,這依賴于宿主細(xì)胞系和轉(zhuǎn)染篩選效率。

【注】:每日進(jìn)行細(xì)胞生長狀態(tài)的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48 h,有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。

4)轉(zhuǎn)移和放置5-10個(gè)抗性克隆到一個(gè)35 mm的培養(yǎng)皿中,用選擇培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)7天。此次富集培養(yǎng)是為日后的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。

 

注意事項(xiàng)

 

1.嘌呤霉素為有毒化合物,操作時(shí)請小心拿放。

2.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3.本產(chǎn)品僅用于科研用途,禁止用于人身上。

 




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