Thermo Scientific T4 DNA連接酶
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 賽默飛世爾科技（中國）有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/12/18 13:49:42
- 訪問次數(shù) 116
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賽默飛世爾科技賽默飛世爾科技（紐約證交所代碼：TMO）是科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的世界領(lǐng)導(dǎo)者。公司年銷售額超過250億美元。在全球擁有約70,000名員工。我們的使命是攜手客戶，讓世界更健康、更清潔、更安全。我們幫助客戶加速生命科學(xué)領(lǐng)域的研究、解決在分析領(lǐng)域所遇到的復(fù)雜問題與挑戰(zhàn)，促進(jìn)醫(yī)療診斷發(fā)展、加速藥物上市進(jìn)程、提高實驗室生產(chǎn)力。我們?nèi)虺^75,000名賽默飛員工將借助于一系列行業(yè)領(lǐng)先的品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific、Unity Lab Services和Patheon，為客戶提供另想的創(chuàng)新技術(shù)、便捷采購方案和全方位服務(wù)。
欲了解更多信息，請瀏覽公司網(wǎng)站：www.thermofisher.com 賽默飛世爾科技中國簡介賽默飛世爾科技進(jìn)入中國發(fā)展已超過35年，在中國的總部設(shè)于上海，并在北京、廣州、香港、成都、沈陽、西安、南京、武漢、昆明等地設(shè)立了分公司，員工人數(shù)約為5000名。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實驗室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等，提供實驗室綜合解決方案，為各行各業(yè)的客戶服務(wù)。為了滿足中國市場的需求，現(xiàn)有7家工廠分別在上海、北京、蘇州和廣州等地運營。我們在全國還設(shè)立了8個應(yīng)用開發(fā)中心以及示范實驗室，將世界級的前沿技術(shù)和產(chǎn)品帶給中國客戶，并提供應(yīng)用開發(fā)與培訓(xùn)等多項服務(wù)；擁位于上海的中國創(chuàng)新中心，擁有有100多位專業(yè)研究人員和工程師及70多項專利。創(chuàng)新中心專注于針對垂直市場的產(chǎn)品研究和開發(fā)，結(jié)合中國市場的需求和國外先進(jìn)技術(shù)，研發(fā)適合中國的技術(shù)和產(chǎn)品；我們擁有遍布全國的維修服務(wù)網(wǎng)點和特別成立的中國技術(shù)培訓(xùn)團隊，在全國有超過2600名專業(yè)人員直接為客戶提供服務(wù)。我們致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。
欲了解更多信息，請登錄網(wǎng)站：www.thermofisher.com 全國服務(wù)熱線：021-61621892公司電子郵箱：sales.china@thermofisher.com
欲了解更多信息，請瀏覽公司網(wǎng)站：www.thermofisher.com 賽默飛世爾科技中國簡介賽默飛世爾科技進(jìn)入中國發(fā)展已超過35年，在中國的總部設(shè)于上海，并在北京、廣州、香港、成都、沈陽、西安、南京、武漢、昆明等地設(shè)立了分公司，員工人數(shù)約為5000名。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實驗室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等，提供實驗室綜合解決方案，為各行各業(yè)的客戶服務(wù)。為了滿足中國市場的需求，現(xiàn)有7家工廠分別在上海、北京、蘇州和廣州等地運營。我們在全國還設(shè)立了8個應(yīng)用開發(fā)中心以及示范實驗室，將世界級的前沿技術(shù)和產(chǎn)品帶給中國客戶，并提供應(yīng)用開發(fā)與培訓(xùn)等多項服務(wù)；擁位于上海的中國創(chuàng)新中心，擁有有100多位專業(yè)研究人員和工程師及70多項專利。創(chuàng)新中心專注于針對垂直市場的產(chǎn)品研究和開發(fā)，結(jié)合中國市場的需求和國外先進(jìn)技術(shù)，研發(fā)適合中國的技術(shù)和產(chǎn)品；我們擁有遍布全國的維修服務(wù)網(wǎng)點和特別成立的中國技術(shù)培訓(xùn)團隊，在全國有超過2600名專業(yè)人員直接為客戶提供服務(wù)。我們致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。
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科學(xué)儀器
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T4 DNA Ligase催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'-磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。酶還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但是該酶對單鏈核酸無酶活性。T4 DNA Ligase需要輔因子ATP。
特點- 快速–室溫下10分鐘內(nèi)完成粘末端的連接反應(yīng)。
- 該酶在Thermo Scientific限制性內(nèi)切酶、PCR和RT緩沖液(添加ATP)中有活性。
- 配套提供聚乙二醇溶液，以高效進(jìn)行平末端連接。
應(yīng)用- 克隆酶切產(chǎn)生的DNA片段。
- 克隆PCR產(chǎn)物。
- 連接雙鏈寡聚核苷酸街頭或連接物。
- 定點誘變。
- 擴增片段長度多態(tài)性 (AFLP)。
- 連接酶介導(dǎo)的 RNA 檢測。
- 雙鏈DNA，RNA 或 DNA/RNA 復(fù)合體中缺口的修復(fù)。
- 線性DNA自身環(huán)化。
濃度1 Weiss u/µl = 200 CEU*/µl
5 Weiss u/µl = 1000 CEU*/µl
30 Weiss u/µl = 6000 CEU*/µl
* 一個粘性末端連接單位的是指在16°C 、30分鐘內(nèi)50%連接HindIII酶切的lamda DNA產(chǎn)物所需要的酶的量。來源含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌。分子量55.3 kDa，單體。活性單位定義1個活性單位是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中，37°C、20分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量。1個Weiss單位相當(dāng)于約200個粘性末端連接單位。酶活性分析混合物：66 mM Tris-HCl (pH 7.6), 6.6 mM MgCl2, 0.066 mM ATP, 10 mM DTT, 3.3 micro Mol [32PPi]
保存緩沖液保存緩沖液組分：
20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM DTT, 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA和50% (v/v)甘油。10X T4 DNA Ligase 緩沖液(#B69)400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP (pH 7.8, 25°C)。質(zhì)量控制相關(guān)測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。 功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力。抑制與失活- 抑制劑：當(dāng)反應(yīng)體系中NaCl或KCl的濃度超過200??mM時，可強烈抑制T4 DNA Ligase活性。
- 失活：65°C加熱10分鐘或者70°C加熱5分鐘。
備注
- 聚乙二醇(PEG) 極大地增加平末端連接效率 (5) 。反應(yīng)體系中的PEG 4000的建議濃度為5% (w/v)。
- T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率。為避免此現(xiàn)象，電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理方法如下：樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)與Fermentas公司6X DNA Loading Dye & SDS溶液(#R1151)混合；70°C加熱5分鐘或65°C加熱10分鐘后冰浴保存。
- 轉(zhuǎn)化時，連接產(chǎn)物的體積不能超過感受態(tài)細(xì)胞體積的10%。
- 電轉(zhuǎn)化之前，先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase。然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物。
訂購信息：貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 EL0014 T4 DNA Ligase (5 Weiss U/µL) 200 U EL0011 T4 DNA Ligase (5 Weiss U/µL) 1,000 U EL0012 T4 DNA Ligase (5 Weiss U/µL) 5 x 1,000 U EL0013 T4 DNA Ligase, HC (30 U/µL) 5000 U EL0016 T4 DNA Ligase, LC (1 U/µL) 2x500 U
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