神經(jīng)元尼氏染色實(shí)驗(yàn)操作流程

神經(jīng)元尼氏染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:

Franna Nissl (1860-1919) 1892年創(chuàng)立了Nissl染色法，以發(fā)現(xiàn)Nissl小體和Niss變性而聞名。常用的堿性染料有CresyI violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫) ; thionine (硫堇); tolridine blue (甲苯胺藍(lán))等。尼氏體為嗜堿性物質(zhì)，又稱(chēng)嗜染質(zhì)，光鏡下呈斑塊狀或細(xì)粒狀散在均勻分布。在一些大型的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,尼氏體大而多，宛如虎皮花紋，又稱(chēng)“虎斑"。電鏡下，尼氏體由大量平行排列的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和其間的游離核糖體組成。尼氏體是神經(jīng)元胞體細(xì)胞質(zhì)的特征性結(jié)構(gòu)之一，神經(jīng)元胞質(zhì)另外一 特征性結(jié)構(gòu)為神經(jīng)原纖維。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理:

正常的神經(jīng)細(xì)胞都含有一定數(shù)量的尼氏體， 它們主要分布于神經(jīng)細(xì)胞的漿中，形狀有大有小，如三角形，有的為橢圓形。這些物質(zhì)能被大部分的藍(lán)色染料所染色，這些染料如焦油堅(jiān)牢紫(Cresyl fast violet)亞甲藍(lán)(methylene blue)甲苯胺藍(lán)(toluidine blue)硫董(thionin) 等鈄其染為藍(lán)色。但是，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞受傷后，胞質(zhì)內(nèi)的尼氏體更可發(fā)生變化，嚴(yán)重的可消失。

實(shí)驗(yàn)操作流程:

1、切片脫蠟至水

2、用焦油堅(jiān)牢紫水溶液浸染20-30分鐘

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

神經(jīng)細(xì)胞單位:紫-藍(lán)色細(xì)胞核:紫藍(lán)色尼氏體:紫深藍(lán)色

實(shí)驗(yàn)操作流程:

1、切片脫蠟至水

2、用焦油堅(jiān)牢紫水溶液浸染20-30分鐘

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

客戶(hù)提供:

1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;

2、培養(yǎng)細(xì)胞:通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2x106個(gè)細(xì)胞于EP管，加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，混溝后保存于冰箱(-80°C, 避免反復(fù)凍融) ;

3、血液細(xì)胞標(biāo)本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5m生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,保存(-80°C可長(zhǎng)期保存,避免反復(fù)凍融) ;

4、血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存(49C可保存15-20天，-80°C可長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融) ;

5、石蠟切片，冰凍切片以及細(xì)胞爬片，涂片等。

6、樣本運(yùn)輸:可選擇以下任何-種方式寄送標(biāo)本

組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后，加冰袋寄送;

細(xì)胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;

血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠(yuǎn)近2 -3天可到達(dá))。

交付標(biāo)準(zhǔn):

1、圖片;

2、完整項(xiàng)目報(bào)告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)結(jié)果)。

其他:

1、應(yīng)用酒精分化切片，要迅速，防止過(guò)度分化，將切片上的顏色全部脫掉。

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：