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廣州菲羅門(mén)科學(xué)儀器有限公司
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使用ACE方法開(kāi)發(fā)工具包(MDKs)進(jìn)行色譜柱篩選方法開(kāi)發(fā)的四個(gè)簡(jiǎn)化步驟?ACEMDKs包括了為互補(bǔ)選擇性而精心設(shè)計(jì)的3支色譜柱。?色譜柱篩選是一種簡(jiǎn)單而又功能強(qiáng)大的方法,可以快速識(shí)別合適的色譜柱。?通過(guò)篩選2種不同的流動(dòng)相有機(jī)改性劑可以使方法更全面。?以下的流程圖總結(jié)了如何通過(guò)4個(gè)簡(jiǎn)單步驟執(zhí)行方法開(kāi)發(fā)篩選。開(kāi)始步：選擇流動(dòng)相pH和緩沖液根據(jù)分析物性質(zhì)(即pKa,logP和logD數(shù)據(jù))進(jìn)行選擇。對(duì)于未知分析物，使用酸性流動(dòng)相作為起點(diǎn)。第二步：使用ACE方法包(3或6支色譜柱)梯度掃描以MeOH
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ACE EXCEL色譜柱 置換ACE產(chǎn)品的說(shuō)明
所有的ACE公司的UHPLC/HPLC固定相都是基于超惰性硅膠的特殊鍵合與封尾，以此小化的二級(jí)反應(yīng)從而獲得了優(yōu)異的峰形ACE的色譜柱采用了兩種柱管:ACE的色譜產(chǎn)品有采用HPLC級(jí)柱管填裝的，這種柱管的大耐壓是275bar，它適合3um與5um的色譜產(chǎn)品，所有的產(chǎn)品貨號(hào)是以“ACE-”開(kāi)頭；ACE的產(chǎn)品也有采用HPLC/UHPLC兼容柱管填裝的，這種柱管的耐壓上限是1000bar。它適合于1.7um,2um,3um以及5um等合種粒徑的產(chǎn)品，所有的產(chǎn)品是以貨號(hào)“EXL-”。兩種柱管的設(shè)計(jì)都確保了 -
ACE色譜柱保護(hù)柱安裝使用說(shuō)明ACE獨(dú)立式保護(hù)柱套是專為內(nèi)徑為1.0-4.6mm的ACEHPLC色譜柱而設(shè)計(jì)的，與ACE柱耦合器(C0001)配合使用。ACE色譜柱保護(hù)柱安裝使用說(shuō)明1.將保護(hù)柱芯放入柱套螺紋較短的那一半內(nèi)。保護(hù)柱芯是非定向的。2.用手將兩半的柱套擰緊直至感覺(jué)到阻力為止，然后再用扳手?jǐn)Q緊四分支一圈。3.將柱套螺旋紋較短的那一端與手?jǐn)Q柱耦合器(C0001)一起連接到分析柱上。這里請(qǐng)用手?jǐn)Q緊，千萬(wàn)不要用扳手。4.如果在加壓后，兩半柱套之間發(fā)現(xiàn)有滲漏的情況，請(qǐng)用扳手小心地將兩半稍稍擰緊
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超惰性固定相對(duì)生物分子反相HPLC的益處介紹Ⅲ - 增加PH范圍
ACE色譜柱超惰性固定相對(duì)生物分子反相HPLC的益處增加PH范圍大多數(shù)生物分子是帶電荷的。肽類和蛋白質(zhì)帶有多種電荷。從小分子的經(jīng)驗(yàn)來(lái)看，已流動(dòng)相pH可以成為改變保留值并因此而優(yōu)化帶電化合物分離度的有力工具。肽類也是如此。再次以使用血管緊張素II和III作為實(shí)例，下圖顯示在pH=2的條件下，ACE超惰性色譜柱或填充有更具活性固定相的色譜柱上這兩種肽未實(shí)現(xiàn)分離。通過(guò)將pH增加至7，這兩種色譜柱則均能提供良好的分離度。然而，盡管ACE超惰性色譜柱保持了良好的峰形，但填充低純度硅膠的色譜柱顯示其峰形較差 -
超惰性固定相對(duì)生物分子反相HPLC的益處介紹Ⅱ - 優(yōu)化選擇性
ACE色譜柱超惰性固定相對(duì)生物分子反相HPLC的益處優(yōu)化選擇性TFA和其他流動(dòng)相添加劑與肽類和蛋白質(zhì)的復(fù)合能力可用于調(diào)節(jié)選擇性并改善分離度。如下圖所示，將TFA濃度從0.1％降低至0.01％可使血管緊張素II和III實(shí)現(xiàn)分離。在超惰性ACE色譜柱的情況下，隨著分離度的顯著改善，峰形和靈敏度保持恒定。在Vydac色譜柱（填充有更具活性的固定相）的情況下，峰形被嚴(yán)重破壞。選擇性，隨TFA的濃度而變化色譜柱：250x4.6mm,5μmC18300?流動(dòng)相：A：TFA（溶于水中）B:80％TFA（溶于乙 -
超惰性固定相對(duì)生物分子反相HPLC的益處介紹Ⅰ - 提高靈敏度
ACE色譜柱超惰性固定相對(duì)生物分子反相HPLC的益處提高靈敏度將TFA（三fo乙酸）用作肽類和蛋白質(zhì)反相分離的流動(dòng)相添加劑。該添加劑通常被用于改善肽類和蛋白質(zhì)復(fù)雜混合物的峰形和分離度。如下圖所示，在流動(dòng)相中使用0.1％TFA可以使填充有活性固定相的色譜柱產(chǎn)生與由超惰性固定相制備的新一代色譜柱相當(dāng)?shù)姆鍖挕Ｈ欢?，隨著TFA濃度降低至0.01％以及終的0.005％，超惰性相上的峰寬保持不變，但活性固定相上的峰寬會(huì)發(fā)生變形。使用極低水平TFA分析肽類和蛋白質(zhì)的能力有利于采用質(zhì)譜法進(jìn)行高靈敏度檢測(cè)。TFA -
ACE毛細(xì)管和納米型色譜柱毛細(xì)管（500μm和300μm）和納米（100μm和75μm）尺寸多種多樣的鍵合相可用，包括ACEC18-AR和ACEC18-PFP100?和300?孔徑柱效高、壽命長(zhǎng)、可重現(xiàn)性好特別適用于LC-MS和LC-MS-MS除了從分析型（1.0-4.6mmID）到制備型（21.2-30mmID）廣泛范圍的色譜柱之外，ACE色譜柱也可提供毛細(xì)管（500μm和300μm）和納米（100μm和75μm）尺寸。ACE毛細(xì)管和納米型色譜柱提供所有ACE鍵合相，其孔徑為100?和300?
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ACE制備型HPLC色譜柱ACE制備型HPLC色譜柱載樣能力：高表面積和碳載量，以獲得大的樣品容量選擇性：9種鍵合相可用，以優(yōu)化分離度和實(shí)現(xiàn)樣品容量的大化。C18、C18-AR、C18-PFP、C18-HL、C8、C4、CN、苯基、AQ耐用性：可靠且持久的性能保證可重復(fù)性：如ACE分析柱一樣完整的色譜柱/批驗(yàn)證現(xiàn)在可以實(shí)現(xiàn)可重現(xiàn)性的高性能制備分離具有制備型HPLC經(jīng)驗(yàn)的色譜工作者知道什么才是重要的—分離度和載樣量。兩者息息相關(guān);分離度越大，樣品負(fù)載越高，獲得純化合物越快。在制備規(guī)模下優(yōu)化分離度的
