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膠原酶解離組織2022/12/7
原理切碎的組織放于含有膠原酶的完-全培養(yǎng)基中孵育，組織分解后，通過離心去除膠原酶，高濃度接種、培養(yǎng)。材料與儀器膠原酶DBSS培養(yǎng)基移液器皮氏平皿培養(yǎng)瓶離心管手術(shù)刀離心機(jī)步驟1.將組織移人新鮮、無菌的D...
角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)實驗2022/12/7
原理將角膜組織置于膠原蛋白上，使其附著。然后，在涂有纖連蛋白和膠原蛋白的培養(yǎng)皿擴(kuò)增培養(yǎng)。材料與儀器D-PBSA無血清角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培養(yǎng)板步驟一、材料滅菌無血清角質(zhì)...
過濾裝置的滅菌2022/12/6
材料與儀器過濾器外殼架子預(yù)過濾器玻璃纖維尼龍袋高壓滅菌無菌指示膠帶消毒鍋步驟1.用清潔劑完-全淸洗后，用水沖洗過濾裝置，然后用去離子水沖洗，并晾干。2.在過濾器中插入濾板，然后將過濾膜放到濾板上，如果...
放射自顯影術(shù)實驗2022/12/6
簡介培養(yǎng)細(xì)胞的放射自顯影術(shù)射性既可以研究細(xì)胞本身的物質(zhì)代謝之外，還可用來分析細(xì)胞的動態(tài)活動、細(xì)胞周期等。原理培養(yǎng)細(xì)胞放射自顯影術(shù)原理是將培養(yǎng)細(xì)胞的放射性同位素釋放射線，作用于感光乳膠，使感光乳膠中的鹵...
非肌肉肌動蛋白的純化2022/12/6
材料與儀器非肌肉肌動蛋白DNA酶Ⅰ緩沖液DEAE柱步驟1.準(zhǔn)備貯存液和材料。2xDNA酶Ⅰ緩沖液：20mmol/LTris-HCl，pH8.01mmol/LDTT0.4mmol/LCaCI20.4mm...
復(fù)蘇凍存細(xì)胞實驗2022/12/6
原理快速復(fù)蘇細(xì)胞，緩慢稀釋，以高細(xì)胞密度重新接種。材料與儀器步驟材料無菌培養(yǎng)瓶（如果需要離心時）生長培養(yǎng)基吸量管，1ml，10ml注射器和19號針頭（如果你使用玻璃凍存管）非滅菌保護(hù)性手套和面罩37℃...
脂質(zhì)體介導(dǎo)的瞬時轉(zhuǎn)染2022/12/6
材料與儀器L8057-Y10細(xì)胞D-PBSA培養(yǎng)瓶培養(yǎng)板F12FB培養(yǎng)基G418(Invitrogen)選擇性培養(yǎng)基電穿孔電穿孔專用杯電穿孔儀II電穿孔儀-II配套的效能擴(kuò)增器-Plus步驟表達(dá)載體與...
倒置顯微鏡的使用2022/12/5
原理將培養(yǎng)物放在顯微鏡的載物臺上，打開電源，選擇合適的鏡頭，聚焦于標(biāo)本。如果必要的話，將聚光器和相差環(huán)調(diào)節(jié)在中心。材料與儀器倒置顯微鏡擦鏡紙步驟確保顯微鏡（配有相差10×、20×或40×的物鏡及聚光器...
單層細(xì)胞的傳代2022/12/5
原理去除培養(yǎng)基，加人胰蛋白酶短暫作用，孵育，以培養(yǎng)基分散細(xì)胞，計數(shù)，稀釋并再接種。材料與儀器A549細(xì)胞WI-38MRC-5胰蛋白酶D-PBS70%乙醇噴壺生長培養(yǎng)基吸管離心管培養(yǎng)瓶移液器吸耳球吸水紙...
大鼠肝細(xì)胞分離實驗2022/12/5
原理經(jīng)肝門靜脈或肝門靜脈分支插管，用無鈣緩沖液灌洗肝15min，再用酶溶液灌洗15min。收集和洗滌細(xì)胞，計數(shù)有活力的肝細(xì)胞。材料與儀器L-15Leibovitz培養(yǎng)液HamF12培養(yǎng)液胞培養(yǎng)液HMM...
蛋白質(zhì)合成實驗2022/12/5
材料與儀器步驟材料無菌細(xì)胞培養(yǎng)，如1X104～1X106個細(xì)胞，24孔板3H-亮氨酸。無血淸培養(yǎng)基中2MBq/ml(～50uCi/ml)(特異活性并不重要，因為它將由培養(yǎng)基中的亮氨酸濃度決定）非無菌S...
分離ARVM細(xì)胞2022/12/5
材料與儀器鼠KH緩沖液混合氣體對流工作臺或?qū)恿魇匠瑑襞_乙酉迷罩冷凝器循環(huán)水浴和水浴搖床圈型架蠕動泵臺式醫(yī)用離心機(jī)無菌燒杯ColorpHastpH試紙步驟一、ARVM細(xì)胞分離的準(zhǔn)備工作1.準(zhǔn)備如下設(shè)備及...
分離雞胚背根神經(jīng)節(jié)2022/12/2
材料與儀器酶溶液DRG離心管培養(yǎng)皿解剖顯微鏡步驟解剖前在15ml離心管中配制酶溶液，置37℃水浴特用。2.解剖胚胎，解剖全過程保持組織濕潤。(1)殺死胚胎，去腿，放于100mm培養(yǎng)皿。(2)用鈍頭剪刀...
分離培養(yǎng)細(xì)胞2022/12/2
原理骨豁肌源性成肌細(xì)胞能夠培養(yǎng)從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細(xì)胞。在培養(yǎng)條件下，成肌細(xì)胞仍繼續(xù)表達(dá)一些分化特征。成肌細(xì)胞稱衛(wèi)星細(xì)胞，分化早期的步驟與骨骼肌很相似。成肌細(xì)胞在培養(yǎng)底物上增殖和遷移，然后成...
E玫瑰花環(huán)形成試驗2022/12/2
原理正常人外周血中T細(xì)胞在體外能直接和綿羊紅細(xì)胞（SRBC）結(jié)合形成玫瑰花樣細(xì)胞團(tuán)。這是因為人的T細(xì)胞膜上具有能和SRBC膜上的糖蛋白相結(jié)合的受體，稱為E受體。已證實E受體是人T細(xì)胞所*的表面標(biāo)志，因...
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