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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生物試劑>60711ES B-27無血清添加劑,50X(非動物源)

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60711ES B-27無血清添加劑,50X(非動物源)

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
產(chǎn)品標(biāo)簽

B-2750X非動物源

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企業(yè)簡介

翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動,聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料,從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè),通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑,成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?;a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè),產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。



主營業(yè)務(wù)


公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗,構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來,公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種,涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類的生物試劑,能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。

發(fā)展歷程



榮譽(yù)資質(zhì)


翌圣生物通過申請商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場競爭力,不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日,公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(其中發(fā)明14項、實用新型1項、外觀設(shè)計3項)和45項與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán),擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊商標(biāo)權(quán)37項以及4項境外注冊商標(biāo),是國家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。

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創(chuàng)新平臺


經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新,翌圣生物積極開展“產(chǎn)學(xué)研”合作,與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國家重點實驗室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點研究基地的江南大學(xué)展開合作,優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ),建立了六大核心技術(shù)平臺——雙向分子酶理性設(shè)計與定向進(jìn)化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺,目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項核心技術(shù),打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑,覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。


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工業(yè)化生產(chǎn)


翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營的工業(yè)化生產(chǎn)基地,配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時,公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證,從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲運(yùn)輸?shù)葘ιa(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督,保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性,竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。

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客戶服務(wù)


翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可,為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實驗室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系,公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。

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公司企業(yè)文化



使命

幫助客戶創(chuàng)造價值,讓世界更健康更快樂

愿景

成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
具備驅(qū)動產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍


價值觀


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翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值,讓世界更健康更快樂”的使命,專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級,不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域,為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù),助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時,翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國際化戰(zhàn)略,繼續(xù)布局和拓展海外市場,為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。










分子生物學(xué)試劑,細(xì)胞生物學(xué)試劑,免疫學(xué)試劑,蛋白組學(xué)試劑等

供貨周期 兩周 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品簡介

 

B-27是一種最常被引用的神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,是一種優(yōu)化的無血清添加劑,用于支持胚胎、出生后和成年海馬神經(jīng)元和其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)神經(jīng)元的生長和活性維持。B-27無血清添加劑以50倍工作液提供,可以與基礎(chǔ)培養(yǎng)基(Neuronal)培養(yǎng)基組合使用,用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)而需再添加飼養(yǎng)層細(xì)胞。在神經(jīng)元基礎(chǔ)培養(yǎng)基中使用B-27添加劑,用于培養(yǎng)產(chǎn)前和胚胎神經(jīng)元,以獲得優(yōu)化的活性和長期的存活率。

B-27添加劑適用于大多數(shù)神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)無血清細(xì)胞培養(yǎng),可用于神經(jīng)細(xì)胞生長及維持,干細(xì)胞增殖與分化。

60711ES是B-27 supplement, serum free,50X B-27無血清添加劑,50X(非動物源)。

60712ES是B-27 supplement without Vitamin A, serum free,50X B-27無血清添加劑,去除維生素A,50X (非動物源)。60712ES去除了維生素A,可防止神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號

60711ES10

規(guī)格

10 mL 

外觀

液體

 

組分信息

 

●.Catalase

●.T3

●.Putrescine   

●.Glutathione

●.l-carnitine

●.Putrescine

●.Insulin

●.D(+)Galactose

●.Corticoseterone

●.Linoleic Acid

●.DL-a-Tocopherol(Vitamin E)

●.Oleic acid

●.Lipoic acid

●.Retinol acetate

●.Linolenic Acid

●.DL-a-Tocopherol Acetate

●.Biotin

●.Superoxide Dismutase

 

●.Progesterone

●.Pipecolic acid

●.Human HOLO-Transferrin

●.Ethanolamine

 

儲存條件

 

-25~-15避光保存,有效期2年。

 

使用說明

 

B27細(xì)胞培養(yǎng)添加劑是50×濃度。使用前請用基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如Neurobasal)稀釋到1×。如準(zhǔn)備50 mL培養(yǎng)基:將1 mL的B27細(xì)胞培養(yǎng)添加劑(50×)加入到49 mL的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。配置好的培養(yǎng)基,可于2~8℃避光保存1周。

  1. 培養(yǎng)基制備
    1)置于4°C解凍本產(chǎn)品。
    2)在使用前無菌添加2%本產(chǎn)品和0.5 mM L-  酰胺至神經(jīng)元基礎(chǔ)培養(yǎng)基,配置成神經(jīng)元  培養(yǎng)基(注:下文中出現(xiàn)的“神經(jīng)元 培養(yǎng)基”即指此種添加了B-27添加劑和L-  酰胺的神經(jīng)元基礎(chǔ)培養(yǎng)基)。注意:剩余的本產(chǎn)品可以等分成工作體積,并儲存在-25~-20℃。在以后的試驗中根據(jù)需要解凍相應(yīng)體積的本產(chǎn)品。避免反復(fù)凍融。
    3)對于原代海馬神經(jīng)元培養(yǎng),神經(jīng)元 培養(yǎng)基(由前述步驟制備)需要額外補(bǔ)充25 μM的L- ,在培養(yǎng)的第4天以后的換液中應(yīng)不再添加酸。配置好的 培養(yǎng)基,可于2~8℃的避光保存1周。
    2. 細(xì)胞培養(yǎng)步驟
    下列步驟已在大鼠胎兒原代海馬和皮層神經(jīng)元,以及神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中測試。
    1)用無菌的冷的0.05 mg/mL多聚賴氨酸水溶液包被培養(yǎng)表面(玻璃或細(xì)胞培養(yǎng)級塑料),每平方厘米表面使用0.15 mL,在室溫下保溫1 h。
    2)去除多聚賴氨酸溶液,并用無菌蒸餾水沖洗兩次(須 清洗,因為多聚賴氨酸對細(xì)胞有毒性)。在超凈工作臺中打開培養(yǎng)板的蓋子通風(fēng),直到每個孔都 干燥。培養(yǎng)板干燥后可以立即使用或在4°C最多保存2周。
    3)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)實驗室程序或隨細(xì)胞提供的說明書分離原代的大鼠神經(jīng)元或解凍凍存的原代大鼠神經(jīng)元。
    4)在預(yù)熱的(37°C)神經(jīng)元 培養(yǎng)基中(如前所述的方法制備)接種細(xì)胞,建議的細(xì)胞密度為160個細(xì)胞/mm2,或必要時使用自行優(yōu)化的細(xì)胞密度。注意:對于海馬神經(jīng)元,培養(yǎng)基中須添加25 μM L-  酸,參見“ 培養(yǎng)基的制備”。
    5)在36~38°C,含5%二氧化碳的潮濕環(huán)境中培養(yǎng)(使用自然空氣也是可接受的,但推薦含9%氧氣和5%二氧化碳的氣體環(huán)境)。
    6)培養(yǎng)4~24 h后,更換一半體積的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
    7)對海馬神經(jīng)元以外的細(xì)胞:在接種4天后,更換一半體積的新鮮的 培養(yǎng)基,之后每三天重復(fù)一次。對海馬神經(jīng)元:接種三天后,用不含L- 酸的新鮮培養(yǎng)基更換一半體積的培養(yǎng)基,之后每三天重復(fù)一次。注意:在 培養(yǎng)基中添加25 µM  ,可改善海馬神經(jīng)元的長期存活率。
    3. 分離原代大鼠胚胎神經(jīng)元
    下列程序推薦用于培養(yǎng)受精18天的大鼠胚胎海馬神經(jīng)元和大腦皮層神經(jīng)元。
    1)從受精18天的大鼠胚胎中分離大腦皮層和雙側(cè)海馬。
    2)在預(yù)置了 培養(yǎng)基的錐形管中收集所有的組織。放置,直到所有的組織都已解體。
    3)使組織沉積在管的底部,然后小心地去除上清液,只留下剛好可覆蓋組織的最少量的培養(yǎng)基。
    4) 在不含鈣離子的培養(yǎng)基中,使用2 mg/mL過濾滅菌的木瓜蛋白酶溶液,在30°C酶解組織大約30 min,其間每5 min輕搖錐形管以幫助降解。每對海馬組織使用2 mL酶溶液。
    5)加入兩倍體積的 培養(yǎng)基以恢復(fù)二價陽離子的濃度,停止酶解。
    6)使未解離的組織沉降至管底(約2 min),然后把上清液轉(zhuǎn)移到15 mL離心管中,以150×g離心5 min。
    7)在1 mL神經(jīng)元 培養(yǎng)基中重懸沉淀物,取一小份(例如10 μL)進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。后續(xù)的操作按照“復(fù)蘇和培養(yǎng)凍存的神經(jīng)元”的第8-10步驟進(jìn)行。
    4. 復(fù)蘇和培養(yǎng)凍存的神經(jīng)元
    重要提示:原代神經(jīng)元細(xì)胞將會貼附在裸露的塑料或玻璃表面,建議事先用神經(jīng)元 培養(yǎng)基沖洗所有的塑料和玻璃器皿的內(nèi)表面,以獲得最高的回收率和產(chǎn)量。由于細(xì)胞從凍存狀態(tài)復(fù)蘇時極其脆弱,請在整個操作過程中不要震蕩或離心細(xì)胞。我們建議每次只解凍一管細(xì)胞。務(wù)必減少從液氮中轉(zhuǎn)移凍存管到37°C水浴中的操作時間。細(xì)胞從液氮罐到水浴的運(yùn)輸過程中,可在冰桶中放少量液氮,將細(xì)胞置于這個冰桶中來進(jìn)行。
    1)在解凍細(xì)胞之前,用神經(jīng)元 培養(yǎng)基沖洗無菌的15 mL錐形管,然后在超凈工作臺中通風(fēng)晾干。
    2)從液氮中取出凍存管時可稍微擰松管帽以釋放壓力,然后再擰緊。
    3) 在37°C水浴中輕柔攪拌凍存管以快速解凍細(xì)胞(小于2 min)。當(dāng)觀察到凍存管中只有很少量的冰晶存在時(觸摸凍存管仍然感覺是冷的)從水浴中取出。
    4)在超凈工作臺中用70%的異丙醇消毒凍存管。在工作臺臺面上輕敲凍存管以使管內(nèi)液體沉降到管底。
    5) 使用事先用神經(jīng)元 培養(yǎng)基沖洗并干燥過的1 mL吸頭極其輕柔地將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到事先沖洗并干燥的15 mL錐形管中。
    6)用1 mL預(yù)熱的神經(jīng)元 培養(yǎng)基沖洗沖洗凍存管,以每秒一滴的速度極其緩慢地加入到15 mL錐形管中的細(xì)胞里。每加一滴都輕柔地轉(zhuǎn)動錐形管一次。不要一次即把全部培養(yǎng)基加到錐形管中。
    7)慢慢地逐滴加入另外2 mL預(yù)熱的 培養(yǎng)基,使管內(nèi)的液體體積為4 mL。用1 mL吸頭輕柔地混合液體,注意不要造成任何氣泡。
    8)用一個事先沖洗干燥過的吸頭吸取10 μL細(xì)胞懸液加入到含有10 μL 0.4%臺盼藍(lán)的微量離心管中,輕敲管壁以混勻溶液。使用手動的細(xì)胞計數(shù)方法測定活細(xì)胞密度。解凍的細(xì)胞的活率應(yīng)超過50%。
    9)在已經(jīng)事先用多聚賴氨酸包被(參見“細(xì)胞培養(yǎng)步驟”)的48孔板中每孔中接種大約1×105個細(xì)胞或按所需的細(xì)胞密度接種。加入預(yù)熱的神經(jīng)元 培養(yǎng)基將細(xì)胞懸液稀釋到每孔500 μL。
    10)按照“細(xì)胞培養(yǎng)步驟”中的5-6步驟進(jìn)行神經(jīng)元的培養(yǎng)。在36~38°C,含5%二氧化碳的潮濕環(huán)境中培養(yǎng)(使用自然空氣也是可接受的,但推薦含9%氧氣和5%二氧化碳的氣體環(huán)境)。

 

注意事項

 

1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2. 避免反復(fù)凍融,應(yīng)及時分裝,最好在4℃下過夜融化,稀釋時要求在無菌環(huán)境中進(jìn)行。




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