詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 佛手染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus citri sarcodactylis |
貨號(hào) | FS-P99257 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
AT1R/AGTR1 血管緊張素Ⅱ-1型受體利血平2-氨基-4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三OAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源)
ATF1 活化轉(zhuǎn)錄因子12-氯-4-胺3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(大、小鼠同源:人源見(jiàn)bs-0606P)
ATF2 活化復(fù)制因子2氯普噻噸3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑OAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3(抗原)
phospho-ATF2(Ser490/498) 磷酸化活化復(fù)制因子2馬來(lái)酸麥角新堿3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原)
phospho-ATF2(Thr69/71) 磷酸化活化復(fù)制因子2咪唑吲哚-5-羧酸Oct-4 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)
ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3吡喹酮吲哚-5-羧酸OPN(osteopoin) 骨橋蛋白(抗原)
ATG1/ULK1 自噬相關(guān)蛋白1馬來(lái)酸氯那敏吲哚-5-羧酸P16/CDKN2A (Cyclin-depende kinase inhibitor-2A) 抑癌基因p16(抗原)
Phospho-ULK1 (Ser467) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白1東莨菪堿()順-4-羥基環(huán)己氨酸特丁酯p21/WAF1/CIP1 p21 核分裂抑制因子之一(抗原)
豬瘟病3-甲氧基肼鹽酸鹽Porcine ABCG1 (ATP Binding Cassette Transporter G1) 檢測(cè)試劑盒
豬瘟病3-甲氧基肼鹽酸鹽Porcine GUSβ (β-glucuronidase) 檢測(cè)試劑盒
嗜鉻粒蛋白C1-Boc-3-(甲氨基)哌啶Porcine PKP1 (Plakophilin 1) 檢測(cè)試劑盒
煙堿型乙酰膽堿受體α10/AChRα101-Boc-3-(甲氨基)哌啶Porcine GP-73 (Golgi Protein 73) 檢測(cè)試劑盒
煙堿型乙酰膽堿受體α6/AChRα61-Boc-3-(甲氨基)哌啶Porcine CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) 檢測(cè)試劑盒
煙堿型乙酰膽堿受體α9/AChRα9(-)-10-樟腦磺酰氯Porcine ITLN1 (Ielectin 1/Omein) 檢測(cè)試劑盒
煙堿型乙酰膽堿受體δ/AChRδ(-)-10-樟腦磺酰氯Porcine SDF-1/CXCL12 (Stromal Cell Derived Factor 1) 檢測(cè)試劑盒
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8(-)-10-樟腦磺酰氯Porcine ERN1 (Endoplasmic Reticulum to Nucleus Signalling 1) 檢測(cè)試劑盒
佛手染料法PCR鑒定試劑盒巴利森苷A;派立辛SP1 Antibody
山楂酸,馬斯里酸DJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb
2-苯基苯并咪唑-5-磺酸,紫外線吸收劑 UV-TDJ-1 (D29E5) XP® Rabbit mAb
毛萼乙素Okadaic Acid
知母皂苷元Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
4'-去甲鬼臼毒素BRSK1 (D10F2) Rabbit mAb
杠柳毒苷Phospho-PRAS40 (Ser183) Antibody
1,2-二亞油酰甘油HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
4-基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷VMS1 (D10E6) Rabbit mAb
2-溴咪唑并[1,2-a]吡AIF (D39D2) XP® Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjugate)