詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 忍冬藤染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Caulis lonicerae |
貨號(hào) | FS-P99097 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
改良羅氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑GRP( Gastrin Releasing Peptide ) 促胃泌素釋放肽(抗原)
酸性L-J培養(yǎng)基基礎(chǔ)人真皮成纖維母細(xì)胞-新生原代骨細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑BSA(標(biāo)準(zhǔn)) 牛血清白蛋白(標(biāo)準(zhǔn))
堿性L-J培養(yǎng)基基礎(chǔ)人真皮成纖維母細(xì)胞-成人原代滑膜皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑MBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液人毛細(xì)胞原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(活性多肽)
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長(zhǎng)因子-I(抗原)
馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)人外根鞘細(xì)胞原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑VIP (Vasoactive Iestinal peptide) 血管活性腸肽
馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(不含氯霉素)人內(nèi)根鞘細(xì)胞原代單核細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長(zhǎng)因子-II(抗原)
Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基人角質(zhì)細(xì)胞原代軟骨細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑TP-5(Thymopein) 胸腺五肽
E.coli O157/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希氏菌O157IgG染色質(zhì)修飾蛋白2B2,5-呋喃二羧酸Rat HNF4a (Hepatocyte Nuclear Factor 4 Alpha) 檢測(cè)試劑盒
EPEC/E.coli /HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗腸致病性大腸桿菌IgG細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B2,5-呋喃二羧酸Rat HDGF (Hepatoma Derived Growth Factor) 檢測(cè)試劑盒
EPEC/E.coli/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗普通大腸埃希菌菌體蛋白IgG神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN52,5-呋喃二羧酸Rat Hepc (Hepcidin) 檢測(cè)試劑盒
E.coli/EPEC/FITC 熒光素標(biāo)記抗普通大腸埃希菌菌體蛋白IgG神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN81-甲基-3-吲哚酸Rat HNRPA1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A1) 檢測(cè)試劑盒
E.coli O6 (Escherichia coli O6)/FITC 熒光素標(biāo)記大腸埃希桿菌O6IgGcereblon蛋白1-甲基-3-吲哚酸Rat HK1 (Hexokinase 1) 檢測(cè)試劑盒
E.coli O139/FITC 熒光素標(biāo)記抗志賀素大腸桿菌O139IgG補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白5二乙酯Rat HK (Hexokinase) 檢測(cè)試劑盒
E.coli O157/FITC 熒光素標(biāo)記抗大腸埃希氏菌O157IgG胞苷尿苷鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白1二乙酯Rat HDL (High Density Lipoprotein) 檢測(cè)試劑盒
EPEC/E.coli /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗腸致病性大腸桿菌IgG原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白二乙酯Rat HMGB-1 (High Mobility Group Protein B1) 檢測(cè)試劑盒
忍冬藤染料法PCR鑒定試劑盒PR-619; 2,6-二氨基-3,5-二硫基吡啶Crizotinib
5'-胞苷酸(CMP)FoxP1 (D35D10) XP® Rabbit mAb
5-甲酰水楊酸FoxP1 (D35D10) XP® Rabbit mAb
D-核糖-5-磷酸二鈉鹽TWEAK Receptor/Fn14 Antibody
蘇木色精,蘇木素Phospho-EGF Receptor (Tyr1148) Antibody
核苷酸5’-一磷酸腺苷鈉鹽;AMP鈉鹽LCN2 (D4M8L) Rabbit mAb
CTP.Na2;胞苷-5’-三磷酸二鈉鹽TBP (D5C9H) XP® Rabbit mAb
5-甲基尿苷TBP (D5C9H) XP® Rabbit mAb
2,2’-脫水尿苷;環(huán)尿苷EGF Receptor (15F8) Rabbit mAb
X-gal;5-溴-4氯-3吲哚基β-D半乳糖BNIP3 (D7U1T) Rabbit mAb