詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 膽南星染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Arisaema cum bile |
貨號(hào) | FS-P99070 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
DTYMK aibody24 kDa P23919Human, Mouse 資源名稱大木耳提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
DUS1L aibody53 kDa Q6P1R4Human, Mouse, Rat資源名稱杯形禿馬勃提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
DUS3L aibody72 kDa Q96G46Human, Mouse, Rat資源名稱密紋靈芝提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
DUS4L aibody22,30 kDa O95620Human, Mouse 資源名稱松口蘑(松茸)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
DUSP10 aibody53 kDa Q9Y6W6Human, Mouse, Rat資源名稱血紅擬革蓋菌提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
DUSP11 aibody39 kDa O75319Human, Mouse, Rat資源名稱薄樹(shù)靈芝提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
DUSP13 aibody22 kDa ,36 kDa Q9UII6Human, Mouse, Rat資源名稱新日本靈芝提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no
調(diào)料葡萄球菌CAS號(hào):1806-34英文名字:POPOP分子式:C24H16N2O2分子量:364.40物理性狀及指標(biāo):
法氏檸檬桿菌CAS號(hào):92-71-7英文名字:PPO分子式:C15H11NO分子量:221.26物理性狀及指標(biāo):
發(fā)酵乳桿菌CAS號(hào):83-07英文名字:4-Aminoaipyrine分子式:C11H13N3O分子量:203.244-氨基安替比林的溶解性,4-氨基安替比林在水中的溶解性,4-氨基安替比林在鹽水中的溶解性,4-氨基安替比林在PBS緩沖液中的溶解性,4-氨基安替比林在DMSO、醇等有機(jī)溶劑中的溶解性,4-氨基安替比林在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用,4-氨基安替比林在大鼠等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用。
抗輻射不動(dòng)桿菌CAS號(hào):59653-3英文名字:sulfosalicyclicacid分子式:C8H8O3分子量:152.155-磺基水楊的溶解性,5-磺基水楊在水中的溶解性,5-磺基水楊在鹽水中的溶解性,5-磺基水楊在PBS緩沖液中的溶解性,5-磺基水楊在DMSO、醇等有機(jī)溶劑中的溶解性,5-磺基水楊在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用,5-磺基水楊在大鼠等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用。
巴氏葡萄球菌CAS號(hào):1243英文名字:D-(+)-Camphoricacid分子式:C10H16O4,分子量:200.23物理性狀及指標(biāo):
膽南星染料法PCR鑒定試劑盒N-甲基糠酰羥肟酸(>99.0%(HPLC))FXR1 AntibodyIGF1R/CD221 胰島素樣生長(zhǎng)因子I受體抗體
2,2'-二辛可寧酸二鹽水合物(>98.0%(HPLC))TPA (12-O-Tetradecanoylphorbol-13-Acetate)IGF1R/CD221 胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體
氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)IGF II/IGF2 胰島素樣生長(zhǎng)因子-II抗體
N-肉桂酰-N-(2,3-二甲苯基)羥胺(>98.0%(HPLC)(N))Phospho-β-Catenin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAbIGF I 胰島素樣生長(zhǎng)因子1抗體
5,6-二苯基-3-(2-吡啶基)-1,2,4-三(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-β-Catenin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAbIGF I 胰島素樣生長(zhǎng)因子1抗體
α-聯(lián)呋喃甲酰二肟(>97.0%(W))RYBP (D8J7W) Rabbit mAbIGC 非洲爪蟾IGC抗體
5-二甲氨基-2-亞酚鹽酸鹽(>98.0%(HPLC)(T))AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAbIFRD1 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白PC4)
苯基-2-吡啶基酮肟(>98.0%(T))AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAbIFN-β 干擾素β抗體
焦棓酚紅α-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAbIFNGR2 干擾素-gamma受體2抗體
3-(2-吡啶基)-5,6-雙(4-磺苯基)-1,2,4-三二鈉鹽水合物(>98.0%(HPLC))α-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAbIFNGR1/CD119 干擾素-gamma受體1抗體