詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱(chēng) | 肉桂染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Cortex cinnamomi |
貨號(hào) | FS-P99121 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀(guān)察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專(zhuān)門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶(hù)只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶(hù)自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶(hù)自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
XLT4瓊脂黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基-2(不含TPA)胰腺星狀細(xì)胞Endothelin-1 (ET-1) 內(nèi)皮素-1(抗原)
MLCB瓊脂成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白(抗原)
胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細(xì)胞)頜下腺上皮細(xì)胞ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)
胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基腮腺細(xì)胞TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1(抗原)
10%胰蛋白胨大豆肉湯骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原)
Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基小梁網(wǎng)細(xì)胞ER- Beta (Estrogen receptor beta)peptide 雌激素受體(多肽抗原)
Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ)動(dòng)物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
亞碲酸鹽卵黃增菌液腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基視網(wǎng)膜muller細(xì)胞EXPB-2 植物延展素-β(抗原)
GDF-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗生長(zhǎng)、分化因子1IgGCD38環(huán)戊基溴化鎂Rat OVA sIgE (Ovalbumin specific Immunoglobulin E) 檢測(cè)試劑盒
GDF-8/FITC 熒光素標(biāo)記肌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制素IgG碳酸酐酶14-氟溴乙基Rat CA125 (Carbohydrate Aigen 125) 檢測(cè)試劑盒
GDF8/MS/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制素IgG碳酸酐酶24-氟溴乙基Rat Tryptophan Hydroxylase 1(TPH1) 檢測(cè)試劑盒
GDF-9/FITC 熒光素標(biāo)記抗生長(zhǎng)、分化因子9IgG絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶2-氯-4-基吡啶Rat OLAb (Oxidized Lowdensity Lipoprotein Aibody) 檢測(cè)試劑盒
GDNF/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子IgGα-連環(huán)蛋白(鈣粘蛋白相關(guān)蛋白)Catenin α2-氯-4-基吡啶Rat OxLDL (Oxidized Lowdensity Lipoprotein) 檢測(cè)試劑盒
GDNF Receptor alpha 2/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體alphaIgG癌易感基因2相互作用蛋白2-氨基-4-乙基吡啶Rat MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) 檢測(cè)試劑盒
phospho-Arhgef2 (Ser810)/FITC 熒光素標(biāo)記抗人、大、小鼠磷酸化Rho鳥(niǎo)苷酸交換因子2IgG細(xì)胞質(zhì)連接蛋白12-氨基-4-乙基吡啶Rat PUMA (P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) 檢測(cè)試劑盒
Gelsolin/FITC 熒光素標(biāo)記凝溶膠蛋白IgG盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白22-羥基-5-三氟甲基吡啶Rat Smad3 (Mothers Against Decapeaplegic Homolog 3) 檢測(cè)試劑盒
肉桂染料法PCR鑒定試劑盒硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑Exportin-1/CRM1 (D6V7N) Rabbit mAb
1-芐基D-谷氨酸A20/TNFAIP3 Antibody
D-苯氨酸β-Catenin (L54E2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
D-氨酸Tri-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D5A7) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
β-氨酸TBC1D1 (V796) Antibody
β-氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)IL-2Rβ (D4X3H) Rabbit mAb
D-色氨酸Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb
D-酪氨酸Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb
D-組氨酸GADD45 alpha (D17E8) Rabbit mAb
D-氨酸甲酯鹽酸鹽RBAP46/RBAP48 Antibody